一例黑頸天鵝疑似感染心包積液-肝炎綜合征的病理學診斷報告

劉蕊，李富桂

（天津農(nóng)學院 動物科學與動物醫(yī)學學院，天津 300384）

心包積液-肝炎綜合征（Hydropericardiumhepatitis Syndrome，HHS）首次發(fā)現(xiàn)于1987年的巴基斯坦安卡拉地區(qū)，故被命名為安卡拉病，且沿用至今[1]。引起該病的病原體是禽類I群腺病毒的血清4型（FAV-4），其名是對臨床病死剖檢雞只眼觀病變特征的一種描述。該病的宿主動物主要集中在20～40日齡肉雞群體，發(fā)病時來勢迅速，感染后4～8 d死亡率逐漸升高，臨床癥狀為大量的心包積液和肝臟呈腫大變黃狀態(tài)[2]。天津地區(qū)首次發(fā)現(xiàn)該病于2016年7月，經(jīng)病毒分離鑒定，確診引起天津地區(qū) HHS的病原體為 TJ1607毒株（GenBank登錄號為:KY885021），TJ1607毒株與FAV-4的親緣關系最近[3]。HHS主要的宿主動物為3～5周齡肉雞群體，但也可感染麻雞、雜交雞、蛋雞和種雞，肉鴨也可發(fā)生[4]。此次病例發(fā)生在黑頸天鵝身上，是除上述易感宿主外的首次報道，應引起畜牧業(yè)工作者廣泛重視。組織病理學檢查是獸醫(yī)病理學常規(guī)的診斷方式，檢查組織所發(fā)生的病變，探討病變產(chǎn)生的原因、發(fā)病機理、病變的發(fā)生發(fā)展過程，最后做出病理診斷。此項技術已經(jīng)廣泛應用于臨床工作和科學研究。

1 病例簡介

1.1 發(fā)病情況

某動物園于2018年2月1日送檢病例，病例號為180201。送檢組織為病死幼雛黑頸天鵝的心臟、肝臟、腸道等固定組織。問診結果表明于2018年1月30日開始發(fā)病，于2018年2月1日開始出現(xiàn)死亡。

1.2 臨床癥狀

發(fā)病天鵝表現(xiàn)為精神沉郁，嗜睡；排泄物呈黃色稀便樣；羽毛蓬亂，逆立，無光澤。但采食量和飲水量未見明顯異常，且不影響生長發(fā)育。

1.3 剖檢變化

大體剖檢可見肝臟質脆，腫脹，顏色呈淺黃至深黃色，呈現(xiàn)部分壞死灶特征；心臟松弛柔軟，心包內積有淡黃色滲出性液體；脾臟有不同程度出血點。

2 實驗室檢查

2.1 細菌檢查

取送檢病料接種于 LB瓊脂培養(yǎng)基和血平板上，37 ℃ 培養(yǎng)48 h，觀察平板上有無細菌生長。

2.2 組織病理檢查

將固定好的肝臟、心臟、腸道修整，隨后進行沖水、脫水、透明、包埋、3 μm切片、HE染色、封片等處理，具體操作步驟參考文獻[5]。

3 結果分析

3.1 細菌檢查結果

將送檢病料接種于 LB瓊脂培養(yǎng)基和血平板培養(yǎng)基上，37 ℃ 培養(yǎng)48 h后，取出平板觀察，平板上無細菌生長。

3.2 病理檢查結果

病變組織石蠟切片，HE染色觀察發(fā)現(xiàn):肝臟呈水腫狀態(tài)，明顯淤血且有少量出血現(xiàn)象（圖1），部分區(qū)域呈現(xiàn)灶狀炎細胞浸潤，少量肝細胞發(fā)生變性壞死、并有少量嗜堿性核內包涵體存在（圖2）；心臟的心肌纖維發(fā)生斷裂，有明顯充血現(xiàn)象，部分區(qū)域出血（圖3），肌細胞濁腫，單核細胞和淋巴細胞發(fā)生浸潤（圖4）；腸道呈充血狀態(tài)（圖5）。

圖1 （HE×40）肝臟水腫，淤血

圖2 （HE×100）嗜堿性核內包涵體

圖3 （HE×40）心肌纖維斷裂

圖4 （HE×100）單核細胞

圖5 （HE×40）充血

4 診斷結果

綜合問診結果、大體剖檢結果和病理檢查結果表明，該黑頸天鵝為心肌炎和肝炎癥狀，初步診斷為疑似HHS。確診仍需取病料進行分子生物學診斷檢測病毒抗原。

5 討論

心包積液-肝炎綜合征（HHS）是以心包積液和包涵體肝炎為特征的一種高致病性傳染病，首次發(fā)生于巴基斯坦安卡拉地區(qū)，中國于2013年首次報道出現(xiàn)此類病例[6]。隨后，我國河南、山東、遼寧、吉林等相繼報道出該地區(qū)的部分雞群出現(xiàn)以心包積液和包涵體肝炎為特征的傳染性疾病。經(jīng)分離鑒定，引起上述地區(qū)該病的病原體均為血清4 型 I 群禽腺病毒。據(jù)文獻報道，該病多發(fā)生于20～30日齡的肉雞，發(fā)病的同時開始出現(xiàn)死亡，28～35日齡呈現(xiàn)死亡高峰期，且出現(xiàn)死亡的時間全程持續(xù)4～8 d，35～42日齡雞只死亡數(shù)量開始減少，全程病程持續(xù) 8～15 d[7-8]，其死亡率約為20%～75%，最高可達80%左右[9]。該病從發(fā)現(xiàn)至今，給我國養(yǎng)禽業(yè)造成的經(jīng)濟損失十分嚴重，因此對該病的病理學深入研究，對于保護禽類和促進我國養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展具有深遠的意義。天津地區(qū)于2016年7月首次發(fā)現(xiàn)該疾病，隨后進行了該病的病毒分離鑒定、疾病模型構建、后續(xù)抗體研制和免疫保護試驗，為天津地區(qū)的HHS防治提供了重要參考。

此次病例診斷為疑似感染，主要是由于送檢病料的局限性，導致后續(xù)病毒分離鑒定和基因組學研究未能進行，只能綜合問診情況、大體剖檢狀態(tài)和組織病理檢查在一定程度上確診疑似感染HHS。給予的建議是對環(huán)境進行消毒，注意病禽隔離；全群提高免疫力、防止繼發(fā)感染；減少應激；調理肝腎功能。送檢病料問題的出現(xiàn)也為后續(xù)試驗過程中的病料采集和臨床中的病理診斷敲醒了警鐘。病料采集應注意及時性與準確性，患病畜禽死后應立即進行，時間過長會阻礙病原體的檢驗，對于病變部位要準確的采集，同時分別根據(jù)不同的試驗需要進行不同方法的保存。采集病料過程中還應注意無菌操作，防止雜菌感染。

據(jù)報道，HHS主要感染于蛋雞、雜交雞、種雞、麻雞和肉鴨，此次診斷出黑頸天鵝疑似感染該疾病為除上述品種外的首次報道，在一定程度上使得HHS宿主的感染范圍擴大?；疾∷拗鞣秶臄U大，對于后續(xù)動物保護試驗具有更加重要的意義。患病禽類群體主要表現(xiàn)為初期無明顯臨床癥狀，而中途突然發(fā)生倒地死亡的現(xiàn)象[10]，因此造成HHS的前期預判尤為困難，加強對該病的預防成為養(yǎng)殖工作者的重要任務。在預防疾病的過程中，應以凈化種源為主，加強飼養(yǎng)管理，建設標準化養(yǎng)殖場。在養(yǎng)殖密度較大的養(yǎng)殖場使用0.1%甲醛溶液對飼養(yǎng)環(huán)境進行消毒，適當通風，科學飼養(yǎng)管理。后續(xù)對于HHS的免疫防治研究同樣重要。此病例問題的出現(xiàn)也為研究HHS的致病機理和免疫防治提供了良好的疾病模型。