急性冠狀動脈綜合征患者外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF—α的變化及其臨床意義

朱杰 周鑫 胡文杰

摘要：目的：分析急性冠狀動脈綜合征患者外周血單個核細(xì)胞Toll 樣受體4（TLR4）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的變化及其臨床意義。方法：2017年1月～2018年2月，六安市人民醫(yī)院收治的急性冠脈綜合征患者84例，納入觀察組。同期收治的穩(wěn)定性心絞痛冠心病患者50例，納入對照組。觀察對照組、觀察組對象的外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α水平。觀察組按照預(yù)后進(jìn)行分組，入院時、1周后的外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α水平。結(jié)果：觀察組TLR4、TNF-α水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。TLR4、TNF-α水平ROC下曲線面積分別為0.924、0.882。觀察組84例，其中預(yù)后不良的對象35例、預(yù)后良好的對象49例。1周后，預(yù)后良好與預(yù)后不良對象TLR4、TNF-α低于入院時，預(yù)后不良對象高于預(yù)后良好者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：急性冠狀動脈綜合征患者外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α可以作為冠脈疾病診斷指標(biāo)，同時可以預(yù)測患者的預(yù)后。

關(guān)鍵詞：急性冠狀動脈綜合征；外周血；TLR4；TNF-α

急性冠脈綜合征是冠心病患者常見并發(fā)癥，已成為人類死亡常見病因之一[1]。因人口老齡化、煙草的泛濫、高血壓等慢性疾病的發(fā)生率逐年上升，我國冠心病發(fā)生率呈快速上升趨勢[2]。冠脈綜合征預(yù)后影響因素較多，本文嘗試采用對照研究，分析急性冠脈綜合征患者外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α水平以及變化情況，評價兩種指標(biāo)在急性冠脈綜合征診斷、預(yù)后預(yù)測中的價值。2017年1月～2018年2月，醫(yī)院收治的急性冠脈綜合征患者84例，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料及方法

1.1 一般資料

2017年1月～2018年2月，六安市人民醫(yī)院收治的冠脈綜合征患者84例，納入觀察組，其中男50例、女34例，年齡（61.0±8.4）歲，其中不穩(wěn)定性心絞痛53例、急性心肌梗死31例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料完整；②明確診斷為急性冠脈綜合征；③患者及其家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①各種原因誘發(fā)的急性冠脈綜合征，如急性一氧化碳中毒引起急性冠脈綜合征；②入院時出現(xiàn)休克，瀕死。同期收治的穩(wěn)定性心絞痛冠心病患者50例，納入對照組，其中男31例、女19例，年齡（60.5±8.4）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①明確診斷為穩(wěn)定性心絞痛；②知情同意；③門診收治。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他重大疾病急性發(fā)作；②拒絕參與研究。

1.2 方法

所有對象入院時，都采集外周靜脈血5ml，檢測外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α。觀察組對象需要在1周后，再次采血復(fù)查。

采用流式細(xì)胞儀檢測外周血單個細(xì)胞中的TLR4、TNF-α。每份標(biāo)本分裝4管，分別標(biāo)記為A、B、C、D，加入100μl血清學(xué)，A中加入5μl TLR4-APC、5μl FITC-CD14抗體，B管加入二者等量的同型對照抗體，室溫下避光反應(yīng)20min，A、B管中加入1ml溶血素，避光反應(yīng)5min，室溫下2000r/min離心5min，棄上清液。A、B管加入1mlPBS，室溫下2000r/min離心5min，棄上清液，加入200μl鞘液重懸。按照規(guī)范處理C管、D管。流式細(xì)胞儀檢測，收集20000個細(xì)胞/管，選擇Cell Quest軟件進(jìn)行細(xì)胞分析，以前向角、側(cè)向角固定單核細(xì)胞，參照TLRs同型對照設(shè)定陰性對照，使同型對照陽性率在2%以下，檢測單個核細(xì)胞TLR4陽性表達(dá)率，同法嚴(yán)格按照說明書檢測TNF-α。

1.3 觀察指標(biāo)

對照組、觀察組對象的外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α水平。觀察組按照預(yù)后進(jìn)行分組，所有對象都進(jìn)行冠脈介入治療、血管開通治療，其中預(yù)后良好（血管開通、無嚴(yán)重并發(fā)癥），預(yù)后不良（血管未完全開通、出現(xiàn)心力衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥）對象，入院時、1周后的外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α指標(biāo)水平服從正態(tài)分布，采用（ ±s）表示，服從正態(tài)分布，比較采用t檢驗(yàn)或配對t檢驗(yàn)，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 診斷價值分析

觀察組TLR4、TNF-α水平高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。TLR4、TNF-α水平ROC下曲線面積分別為0.924、0.882。

2.2 預(yù)后價值分析

觀察組84例，其中預(yù)后不良的對象35例、預(yù)后良好的對象49例。1周后，預(yù)后良好與預(yù)后不良對象TLR4、TNF-α低于入院時，預(yù)后不良對象指標(biāo)高于預(yù)后良好者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

Toll樣受體是一種新型保守模式識別的受體家族，可促進(jìn)白細(xì)胞活化，在先天免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用[3]。TLR4廣泛分布在內(nèi)皮細(xì)胞、免疫系統(tǒng)、腎臟之中，可以識別多種配體，識別DAMPs，可以激活NF-kB，引起炎癥細(xì)胞因子、趨化因子表達(dá)，在炎癥、內(nèi)皮損傷中發(fā)揮重要作用[4]。TNF-α是一種重要的細(xì)胞損傷相關(guān)因子。本次研究顯示，急性冠脈綜合征患者，TLR4、TNF-α水平高于對照組穩(wěn)定性心絞痛患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），反映了冠脈綜合征對象的炎癥、細(xì)胞損傷明顯偏高，這與冠脈綜合征導(dǎo)致急性心肌細(xì)胞缺血、冠脈損傷有關(guān)[5]。

從預(yù)后來看，預(yù)后良好、不良的對象入院時、1周后的TLR4、TNF-α水平差異顯著，預(yù)后不良入院時、1周后指標(biāo)更高，提示較高水平的對象預(yù)后相對更差，同時1周后若仍然處于高位，患者預(yù)后更差。高TLR4、TNF-α水平提示患者病情更重，再開通血管難度更大，心肌梗死面積更大，出現(xiàn)再灌注損傷的風(fēng)險(xiǎn)更高，預(yù)后也更差。

小結(jié)：急性冠狀動脈綜合征患者外周血單個核細(xì)胞TLR4和TNF-α可以作為急性冠脈疾病診斷指標(biāo)，同時可以預(yù)測患者的預(yù)后。

參考文獻(xiàn)：

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[2]景國際，劉大偉，李敏靜，等.平谷地區(qū)慢性心力衰竭流行病學(xué)調(diào)查研究及治療對策分析[J].中國地方病防治雜志，2016，31（06）：652-653.

[3]劉俊田.動脈粥樣硬化發(fā)病的炎癥機(jī)制的研究進(jìn)展[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2015，36（2）：141-152.

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[5]王建旗，史旭波，馬長生，等. 炎癥預(yù)測和預(yù)防動脈粥樣硬化性心血管事件的研究進(jìn)展[J]. 心血管病學(xué)進(jìn)展，2018，39（5）：687-690.

作者簡介：朱杰，（出生于1988年8月）男，安徽省六安市，2015年畢業(yè)于江蘇大學(xué)內(nèi)科學(xué)，現(xiàn)供職于安徽醫(yī)科大學(xué)附屬六安醫(yī)院，住院醫(yī)師，碩士學(xué)位，研究方向：動脈粥樣硬化的基礎(chǔ)與臨床。郵編：237005