走進(jìn)病理科

杭曉潔

作為一名病理科技術(shù)員，每當(dāng)身邊的親戚朋友們?cè)儐?wèn)我的職業(yè)時(shí)，他們往往對(duì)于我的職業(yè)感到非常陌生，甚至對(duì)于病理科這三個(gè)字也很少能有耳聞。但與此同時(shí)我又有一絲慶幸，因?yàn)榻佑|過(guò)醫(yī)院里的病理科并不是一件好事，往往一份癌癥病人的確診報(bào)告就是在那里誕生的。

根據(jù)國(guó)家癌癥中心公布的最新數(shù)字顯示，全國(guó)惡性腫瘤發(fā)病率為270.59/10萬(wàn)，死亡率為163.83/10萬(wàn)，面對(duì)這樣龐大的腫瘤人群，有好多人其實(shí)并不知道在各種腫瘤診斷技術(shù)中，病理診斷可以說(shuō)是腫瘤診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，病理診斷就是通過(guò)穿刺、切除或切取病變組織，將其制成病理切片通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)做出診斷。

記得在病理科窗口工作時(shí)，每天都會(huì)有很多病人家屬都會(huì)來(lái)詢問(wèn)，為什么報(bào)告還沒(méi)有好？抽血報(bào)告，B超報(bào)告等很快就能拿了，表示不能理解為什么這份報(bào)告需要至少4-5個(gè)工作日的時(shí)間，有些病人完全確診需要兩周及以上。一份病理報(bào)告的誕生并不是那么簡(jiǎn)單，首先需要將一塊“肉”——病人手術(shù)中取下的懷疑病變組織通過(guò)很多環(huán)節(jié)制作成一張病理切片，整個(gè)過(guò)程需要經(jīng)過(guò)固定、取材、脫水、包埋、染色、封片這些步驟。接下來(lái)一起跟著我去瞧一瞧吧。

1 固定標(biāo)本

手術(shù)醫(yī)生將新鮮標(biāo)本送至病理科巨檢室，雙人核對(duì)姓名、床號(hào)、住院號(hào)、標(biāo)本部位以及標(biāo)本數(shù)量這些信息，以最快的速度進(jìn)行處理并將標(biāo)本放置在10%中性福爾馬林固定液中，使組織得到充分的固定，而固定的作用就是為了防止組織自溶更重要的是保持組織或細(xì)胞的抗原性，這對(duì)于后期需要做免疫組化染色以及分子病理的病例相當(dāng)重要。

固定前要根據(jù)標(biāo)本的不同，進(jìn)行相應(yīng)的處理，以保證固定充分。比如像腸道標(biāo)本就需要用剪刀沿著腸系膜對(duì)側(cè)剪開(kāi)腸管，并將粘膜面向上平鋪釘于木板上。往往處理這些標(biāo)本時(shí)場(chǎng)面也是比較血腥的，作為一個(gè)普通人可能無(wú)法想象，而對(duì)于病理科醫(yī)生來(lái)說(shuō)這些都是家常便飯，在充斥著福爾馬林刺鼻氣味的巨檢室里，往往他們一站就是一個(gè)下午。

2 標(biāo)本取材

待標(biāo)本在固定液中浸泡8-24小時(shí)之后進(jìn)入取材環(huán)節(jié)。取材醫(yī)生需要從組織中將病變的部位按照取材規(guī)范取成大約2*2*0.3厘米的組織塊。整個(gè)過(guò)程不僅要找到躲藏于標(biāo)本中的那些小小的病灶，更要保證組織標(biāo)本的完整，這些都要靠醫(yī)生的經(jīng)驗(yàn)以及觀察能力，需要注意力高度集中，隨時(shí)觀察病變部位與周?chē)M織的關(guān)系，才能一擊就中，挑中關(guān)鍵部位！不同的組織有不同的取材方法，對(duì)于第一次取材組織不能做出明確診斷時(shí)，必須再次甚至多次取材。

巨檢室的技術(shù)員會(huì)事先將取材時(shí)需要用到的包埋盒事先用打號(hào)機(jī)處理印上標(biāo)本號(hào)碼，不同的?？撇课粍t會(huì)體現(xiàn)在包埋盒的顏色上，這樣也便于取材醫(yī)生分?？迫〔?，而事先處理好的標(biāo)本也會(huì)分?？品胖糜趯ｉT(mén)的櫥柜中，這大大加快了處理標(biāo)本的效率，使得相對(duì)繁瑣的工作變得更加井井有條起來(lái)。取完材后的組織將被放入包埋盒中送往制片室進(jìn)行脫水處理。

3 標(biāo)本脫水

接下來(lái)我們就要將這個(gè)包埋盒里的“肉”變成石蠟塊，首先我們就需要進(jìn)行最重要的一個(gè)步驟就是脫水。 因?yàn)槲覀兊臉?biāo)本經(jīng)過(guò)固定和水洗后會(huì)含有大量的水分，而水和石蠟是不能混合的，因此在進(jìn)行浸蠟和包埋前，必須進(jìn)行脫水將組織內(nèi)的水分通過(guò)某些溶液媒介置換出來(lái)，所以脫水后的組織會(huì)比脫水前的組織明顯“縮水”不少，這就得歸功于我們的溶液媒介了。而現(xiàn)在最常用的脫水劑是乙醇，因?yàn)槠淇梢院退S意混合，穿透速度很快，并且可以硬化組織。通過(guò)不同濃度的乙醇進(jìn)行梯度脫水后，再利用二甲苯透明劑使石蠟?zāi)芨玫慕虢M織，最后進(jìn)行三道石蠟的浸泡，整個(gè)脫水過(guò)程就完成了?，F(xiàn)在病理科中使用的都是全自動(dòng)脫水機(jī)，每臺(tái)脫水機(jī)大約一次可以脫水270個(gè)左右的組織，脫水時(shí)間為12個(gè)小時(shí)左右。

4 包埋、切片、染色

接下來(lái)的工作就是病理科技術(shù)人員大展身手的時(shí)刻了。完成浸蠟后的組織用鑷子夾取置于包埋框中，注入融化的石蠟，放在凍臺(tái)上等待冷卻，完全凝固后脫模，蠟塊就誕生了，這個(gè)過(guò)程就叫做包埋。這個(gè)步驟看上去相當(dāng)簡(jiǎn)單其實(shí)也蘊(yùn)藏著專業(yè)技巧，包埋面必須平整，不能混入雜物，對(duì)于有特殊包埋需求的組織需要進(jìn)行判斷，如有管腔的組織就需要將管腔豎立起來(lái)包埋，不清楚時(shí)需要與醫(yī)師及時(shí)溝通。特別是一些穿刺、胃鏡、腸鏡等標(biāo)本，本身標(biāo)本就比較小，包埋時(shí)更要平整，如果沒(méi)有包埋在同一個(gè)平面上，對(duì)于后面的切片步驟也會(huì)帶來(lái)不便。

組織經(jīng)過(guò)蠟塊包埋后制成的蠟塊，需要通過(guò)技術(shù)人員使用切片機(jī)制成切片。這也是我們病理技術(shù)員的日?！耙还P一鑷走天涯”。先將蠟塊固定在切片機(jī)上，修整蠟塊，使組織面完整暴露，再連續(xù)切片制成蠟帶，用鑷子將蠟帶置于水中，將微皺的組織撐開(kāi)展平，用鑷子挑選最好的蠟片用載玻片撈起放置于50度左右的水中數(shù)秒，待完全平整后再用載玻片撈起平鋪在玻片的中央位置，這樣一張切片就完成了。

切片完成后依舊不能馬上進(jìn)行顯微鏡的觀察，未經(jīng)染色的切片在顯微鏡下只能看到細(xì)胞和組織的輪廓，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足觀察及診斷的需要，所以還需要進(jìn)行染色處理使不同的組織和細(xì)胞成分被染上不同的顏色，產(chǎn)生不同的折射率，便于在顯微鏡下進(jìn)行觀察。染色前將組織玻片放入染色架中放置到60-70度的烤箱中，半個(gè)小時(shí)后待石蠟融化后就可以使用全自動(dòng)染色機(jī)進(jìn)行染色，過(guò)程約為45分鐘左右。使用的染色方法為蘇木素-伊紅染色法（簡(jiǎn)稱HE染色法），將組織中的嗜堿性組織（如細(xì)胞質(zhì)等）染成藍(lán)色，嗜酸性組織（胞質(zhì)，核仁等）染成紅色，病理醫(yī)生就是通過(guò)捕捉這些紅藍(lán)相間的病理切片中的“異類(lèi)”來(lái)進(jìn)行診斷的。

5 疑問(wèn)解答

5.1 去別的醫(yī)院會(huì)診的時(shí)候?yàn)槭裁匆覀儙瀴K??？蠟塊不借怎么辦？

答：通常去其他醫(yī)院就診時(shí)，病理科醫(yī)生會(huì)根據(jù)個(gè)人情況的不同，要求在本醫(yī)院再做一次免疫組化的檢測(cè)，這個(gè)時(shí)候就會(huì)需要回原單位醫(yī)院借取蠟塊，若原單位蠟塊不能借出，則可以借白片，白片是從蠟塊上切下的未染色切片，作用與蠟塊相同。

5.2 為什么去取報(bào)告時(shí)還要再交錢(qián)做進(jìn)一步檢測(cè)？加做檢測(cè)還需要做手術(shù)取組織嗎？

答：常規(guī)染色切片針對(duì)一些病例是不能滿足診斷要求的，需要通過(guò)加做免疫組化及分子檢測(cè)進(jìn)一步診斷。這些診斷也是通過(guò)從病人已取組織蠟塊上的切片進(jìn)行制作檢測(cè)的，病人只需等待結(jié)果即可。

5.3 為什么我的報(bào)告一直說(shuō)要討論？為什么醫(yī)生的效率那么慢？

答：病理科醫(yī)生每一張切片都要去反復(fù)推敲，每一個(gè)異常的細(xì)胞都是診斷重要證據(jù)，遇到疑難病例時(shí)需要進(jìn)行?？朴懻摬拍芟伦詈蟮脑\斷，因?yàn)檫@一份報(bào)告決定了病人日后的治療方案和走向，絕不能輕易地下判斷。

經(jīng)過(guò)了這些介紹是不是對(duì)于病理科有了更深一步的了解呢？從肉體上的組織再到最后一張張?jiān)\斷報(bào)告，這當(dāng)中承載著病理醫(yī)生與技術(shù)員的辛勞與汗水。也希望大家能夠?qū)τ谶@些“幕后英雄”抱以更多地理解與體諒。讓我們一起共同跨越“腫瘤”這道關(guān)卡，攜手面對(duì)健康美好的明天！

參考文獻(xiàn)

[1]姜元慶，馬越.病理檢驗(yàn)技術(shù). 北京：人民衛(wèi)生出版社，2002

[2]全國(guó)衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)資格考試用書(shū)編寫(xiě)專家委員會(huì).病理學(xué)技術(shù). 北京：人民衛(wèi)生出版社，2016

作者簡(jiǎn)介：

杭曉潔（1994-）女，?？疲K ，漢族，病理技士，研究方向：病理技術(shù)。