介紹一種簡便的組織蠟塊修邊法

陳 穩(wěn)

在病理組織制片過程中，傳統(tǒng)的組織蠟塊修邊法常常是技術(shù)人員用刀具或者其它工具對蠟塊逐一刮削的方法，修掉蠟塊周圍余蠟(組織周圍要留有余蠟)[1]。隨著病理標(biāo)本的增多，蠟塊數(shù)量也不斷增加。手工逐一刮削蠟塊包埋盒的修邊方法已滿足不了日益增加的工作需要，嚴(yán)重影響制片效率，且人工成本較大，安全性低，影響切片的質(zhì)量。本科室在日常制片工作中發(fā)現(xiàn)，利用包埋機(jī)的工作臺(tái)去燙融組織蠟塊包埋盒(以下簡稱“燙削”)四邊的方法修邊，既經(jīng)濟(jì)環(huán)保又高效率，現(xiàn)介紹如下。

1 材料與方法

1.1 材料(1)隨機(jī)抽取本科室2018年9月17～26日包埋加蠟標(biāo)準(zhǔn)的1 020個(gè)蠟塊；(2)普通市售西瓜刀；(3)一次性薄膜手套、紙巾；(4)帆船牌載玻片，大小25.4 mm×75.6 mm，厚度1～1.2 mm；源氏安達(dá)蓋玻片，大小24 mm×24 mm，厚度0.16～0.19 mm。

1.2 儀器設(shè)備(1)常州中威電子公司生物組織包埋機(jī)，型號(hào)：BMJ-B；(2)德國Leica 輪轉(zhuǎn)切片機(jī)，型號(hào)：RM2245；(3)德國Leica顯微鏡，型號(hào)：DME雙目；(4)上海醫(yī)用激光儀器廠馬頭牌JYT-2架盤藥物天平。(5)藍(lán)駿牌計(jì)時(shí)器。(6)湖北定源醫(yī)用公司的生物組織自動(dòng)染色機(jī)，型號(hào)：CR-20。

1.3 方法(1)用紙巾清理干凈包埋機(jī)工作臺(tái)和工作臺(tái)下面的2個(gè)接蠟槽。(2)2018年9月17～26日工作日中隨機(jī)抽取540個(gè)蠟塊平分9個(gè)樣本為一組(即每60個(gè)蠟塊為一個(gè)樣本)，排列整齊，將每個(gè)樣本置于75 ℃以上的包埋機(jī)工作臺(tái)上(圖1)，“燙削”蠟塊包埋盒四邊直到包埋盒余蠟融化平整為止。另一組隨機(jī)抽取的480個(gè)蠟塊平分為8個(gè)樣本，用刀刮削每個(gè)蠟塊(圖2)。分別記錄兩種修邊方法每個(gè)樣本組回收余蠟的質(zhì)量和修邊時(shí)間，連續(xù)收集8天。(3)將修邊完成的蠟塊分別置于冰水中，均使用調(diào)整好同一標(biāo)準(zhǔn)切削平面[2]的同一臺(tái)切片機(jī)切片，切片時(shí)嚴(yán)格按規(guī)范切片，排除其他導(dǎo)致切片出現(xiàn)“跳片”[3]或者震顫的客觀因素，分別收集并記錄兩種方法修邊“合格率”。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析利用統(tǒng)計(jì)學(xué)兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)處理兩種修邊方法的數(shù)據(jù)和利用χ2檢驗(yàn)對蠟塊修邊“合格率”比較組間差異，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組余蠟量平均值比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=4.936，P<0.05，表1)，蠟塊燙削比人工刮削的修邊方法石蠟回收利用率更大；兩組修邊耗時(shí)平均值比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=7.346,P<0.05，表2)，蠟塊燙削比人工刮削的修邊方法更省時(shí)。兩組修邊方法“合格率”的比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.02,P<0.05，表3)，蠟塊燙削比人工刮削的修邊方法削出來的蠟塊質(zhì)量更好(圖3)。

表1 兩組樣本修邊方法回收余蠟平均值和方差S1

表2 兩組樣本修邊方法所需時(shí)間平均值和方差S2

表3 兩組修片方法蠟塊合格率

3 討論

在病理組織制片過程中，用塑料包埋盒包埋組織二次加蠟[4]完成后，將蠟塊從組織包埋機(jī)模具[5]分離，而蠟塊包埋盒四邊均會(huì)殘留余蠟使切片機(jī)夾頭不能夾緊蠟塊，導(dǎo)致切片操作時(shí)出現(xiàn)“跳片”厚薄不均、切片震顫現(xiàn)象和搓衣板或波紋樣改變[6]，影響制片質(zhì)量。

目前國內(nèi)許多的基層醫(yī)院病理科受各種條件限制，無法購置蠟塊修邊儀，多采用人工逐一刮削蠟塊包埋盒的方法修整組織蠟塊，時(shí)間成本高，操作不方便，安全性低，較難刮干凈，嚴(yán)重影響工作效率和質(zhì)量。為克服上述不足，采取利用包埋機(jī)工作臺(tái)對蠟塊批量燙融的方法對組織蠟塊修邊，不僅簡便而且修出來的蠟塊整齊劃一，容易被切片機(jī)夾具夾穩(wěn)，有利于蠟塊二次切片，避免因蠟塊修邊不足而出現(xiàn)切片跳片、厚薄不均、震顫和搓衣板或波紋樣改變的現(xiàn)象，大大提高制片效率和質(zhì)量。以廣東省高州市人民醫(yī)院病理科2017年約85 000個(gè)蠟塊量為例，燙削的方法可使每60個(gè)蠟塊回收14.178 g石蠟，1年可回收石蠟約20 kg，最大限度回收蠟塊包埋盒四邊的石蠟，有效提高石蠟回收利用率。

圖1 樣本蠟塊在包埋機(jī)工作臺(tái)“燙削” 圖2 用刀具對樣本蠟塊逐一刮削 圖3 搓衣板或波紋樣改變

與手工刮削的方法相比，蠟塊燙削的方法優(yōu)越性高于前者，使包埋到切片完成的制片環(huán)節(jié)用時(shí)縮短，本組使用修邊法比刮削法每60個(gè)蠟塊快約2 min，如我科室2017年度累積多省時(shí)47.7 h，相當(dāng)于多出6天的工作時(shí)長，大大降低時(shí)間成本。此外，該方法巧用現(xiàn)有的包埋機(jī)，一機(jī)兩用達(dá)到效益最大化，值得我國基層醫(yī)院病理科借鑒推廣。