重組禽流感病毒二價滅活疫苗對融水香鴨免疫效果

韋鈺 曾慶倫 劉佳佳 謝艷林

摘要：為進一步研究重組禽流感病毒二價滅活疫苗對融水香鴨的免疫效果，該研究選擇某養(yǎng)殖場養(yǎng)殖的14日齡融水香鴨120只，按隨機原則將其劃分為3個組別，第1個組別在14日齡進行首次免疫接種，第2組融水香鴨在14日齡進行第1次免疫接種，27日齡后進行第2次強化免疫接種，對照組的40只融水香鴨不進行免疫接種。研究結(jié)果顯示，試驗1組免疫21d后，H5免疫抗體平均滴度為5.90log2，合格率為85%，免疫28d后抗體滴度為7.05log2，抗體合格率為100%，但60d后平均滴度逐步下降到5.95log2，抗體合格率為100%。第2組融水香鴨進行2次強化免疫接種，28日齡平均抗體滴度為7.20log2，合格率為100%，60日齡抗體滴度能維持在較高水平為7.20log2，抗體合格率同樣為100%。由此可得重組禽流感病毒二價滅活疫苗能有效刺激鴨子產(chǎn)生免疫保護抗體，適用于融水香鴨的免疫，但為提高免疫效果，建議對鴨子進行二次免疫。

關(guān)鍵詞：重組禽流感病毒二價滅活疫苗;融水香鴨;免疫效果

中圖分類號：S852.4

文獻標識碼：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.09.008

0 引言

免疫接種是預防禽流感的有效措施，但由于禽流感病毒具有很多亞型，變異十分頻繁且不同，毒株間極容易通過基因互換而轉(zhuǎn)變形成新的亞型[1]。其中對家禽造成危害最嚴重的是H5亞型的多個變異分支。在進行及禽流感免疫接種時，單一的禽流感疫苗難以對動物進行有效保護，給該種疾病防控造成極大難度，因此必須結(jié)合禽流感病毒的變異情況，及時調(diào)整免疫方案，確保所選擇的疫苗針對相應(yīng)的毒株。2017年我國針對禽流感變異情況，啟動新型重組禽流感病毒二價滅活疫苗[2]，最開始該疫苗沒計適用于雞群免疫，但由于鴨子對該種病毒也具有一定的敏感性，近年發(fā)生鴨子禽流感的病例呈現(xiàn)升高趨勢。為進一步驗證鴨子領(lǐng)域應(yīng)用該種疫苗的免疫效果，本次研究選擇融水香鴨為材料，利用重組禽流感病毒二價滅活疫苗對融水香鴨進行免疫接種，檢測接種后的抗體水平，現(xiàn)將具體研究內(nèi)容介紹如下。

1 材料與方法

1.1材料選取

該研究選取融水苗族白治縣種鴨場提供的融水香鴨120只，日齡為14日齡，臨床健康。在試驗前采集鴨子的血清和棉簽拭子樣品進行禽流感病毒檢測和母源抗體檢測，均符合要求，不存在患病情況。疫苗選擇使用重組禽流感病毒二價滅活疫苗，由融水縣動物疫病預防控制中心提供，生產(chǎn)批號為01721089，生產(chǎn)日期為2018年8月22日。在進行禽流感病毒抗體水平檢測中，主要應(yīng)用到禽流感病毒熒光檢測試劑盒，H5系禽流感病毒血凝和血凝抑制抗原，H7N9亞禽流感病毒血凝和血凝抑制抗原以及相應(yīng)的標準陰性陽性血清。

1.2試驗方法

按隨機原則將選取的120只融水香鴨劃分成3個組別，每組40只，命名為免疫1組、免疫2組和對照組，按照農(nóng)業(yè)部關(guān)于禽流感的免疫程序，免疫1組融水香鴨在14日齡進行第1次免疫注射，頸部皮下免疫注射，每只鴨子注射0.5mL。免疫2組融水香鴨在14日齡進行第1次免疫接種后，間隔21d進行第2次強化免疫接種，首次免疫，每只鴨子頸部皮下免疫注射0.5mL，第2次強化免疫頸部皮下注射1.5mL。對照組不進行疫苗免疫接種。試驗組和對照組的融水香鴨分別在免疫前Od和免疫后的第21、28、60天進行采樣。對照組融水香鴨每次同步采集血液和拭子樣品，對照組、免疫1組和免疫2組每次采集血清樣品20份。選擇使用熒光檢測法采集到的樣品進行禽流感病毒檢測，CT值<40判定為陰性。采集到的血清樣品應(yīng)用HA/HI檢測方法，分別對H5系亞型禽流感病毒抗體和H7N9禽流感病毒抗體進行檢測，HI≥4log2表示免疫合格[3]。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計

選擇使用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，對免疫1組和免疫2組進行t檢驗差異分析。

2結(jié)果

2.1

H5系亞型禽流感病毒抗體檢測

結(jié)合表1數(shù)據(jù)可知，對照組的40只融水香鴨，在第0、21、28和60天，抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)下降趨勢。免疫1組的融水香鴨在第0、21、28和60天抗體合格率呈現(xiàn)上升趨勢，平均抗體滴度在0～28d呈現(xiàn)平穩(wěn)上升趨勢，到第60天后呈現(xiàn)下降趨勢。免疫2組的融水香鴨進行第1次免疫接種后，21、28、60d H5系亞型禽流感病毒抗體合格率和平均滴度均呈現(xiàn)上升趨勢，與免疫1組相比，28d和60 d平均滴度均高于免疫1組。但是免疫1組和免疫2組在免疫接種28 d的95%的置信區(qū)間1竽在交叉重疊，但2組之間對比不顯著（P>0.05），免疫第60天后2個免疫組別95%置信區(qū)間存在無交叉重疊，2組對比差異性極其顯著（P<0.01）。見表1。

2.2

H7N9亞禽流感病毒抗體檢測

對照組融水香鴨在第0、21、28和60天，H7N9亞禽流感病毒抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)下降趨勢。免疫1組在免疫接種疫苗的0～28d內(nèi)，抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)上升趨勢，但到第60天后呈現(xiàn)下降趨勢。免疫2組的融水香鴨在免疫接種后的第21、28和60天H7N9亞禽流感病毒抗體合格率和平均抗體滴度均呈現(xiàn)上升趨勢，28d和60d的平均抗體滴度顯著高于免疫1組，但2組之間免疫28d的95%置信區(qū)間存在交叉重疊差異性不顯著（P>0.05），免疫第60天后2個免疫組別95%置信區(qū)間1竽在無交叉重疊，2組對比差異性極其顯著（P<0.01）。見表2。

3 結(jié)論

該研究選擇14日齡的融水香鴨進行重組禽流感病毒二價滅活疫苗免疫試驗，免疫試驗結(jié)果顯示，免疫1組和免疫2組融水香鴨分別在免疫接種21d后，H5系亞型禽流感病毒抗體和H7N9亞禽流感病毒抗體合格率均達到85%以上，免疫第60天后，抗體合格率高達100%，這說明本次所選擇的滅活疫苗對鴨子具有很好的免疫保護效果。但也應(yīng)該認識到免疫60d后，鴨子的抗體水平呈現(xiàn)下降趨勢，表明進行1次免疫不能維持體內(nèi)足夠的保護能力，需要進行第2次強化免疫接種。

參考文獻

[1] 李志賢，虞與理，禹婷婷.三黃雞免疫重組禽流感病毒（H5+H7）二價火活疫曲血清抗體檢測試驗報告[J]獸醫(yī)導刊，2018（19）：69-71.

[2]謝向萌，韋顯凱，梁晟，等重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活疫曲在肉鵝中的應(yīng)用效果評價[J] 中國動物檢疫，2018，35（8）：76-80.

[3]羅守保，李少炎，虞育紅.重組禽流感病毒（H5+H7）二價滅活曲接種鴨群免疫效果凋查報告[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)，2018（5）：76-77.