• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    防治西洋參立枯病木霉菌株的篩選鑒定及其小區(qū)防治效果

    2019-10-18 00:58:50李紀(jì)順陳凱王貽蓮李紅梅唐永輝魏艷麗扈進(jìn)冬趙忠娟楊合同
    山東科學(xué) 2019年5期
    關(guān)鍵詞:立枯病木霉西洋參

    李紀(jì)順,陳凱,王貽蓮,李紅梅,唐永輝,魏艷麗,扈進(jìn)冬,趙忠娟,楊合同

    (1.齊魯工業(yè)大學(xué)(山東省科學(xué)院),山東省科學(xué)院生態(tài)研究所,山東省應(yīng)用微生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 濟(jì)南 250103;2.榮成市農(nóng)業(yè)農(nóng)村事務(wù)服務(wù)中心,山東 榮成 264300)

    西洋參PanaxquinquefoliumL.又名花旗參、洋參等,五加科人參屬植物,具有抗腫瘤、抗疲勞、抗心律失常、増強(qiáng)機(jī)體免疫力等多種功效,既是名貴上品中藥,又是高級(jí)滋補(bǔ)佳品[1-3]。西洋參原產(chǎn)于美國(guó)和加拿大,我國(guó)于20世紀(jì)70年代末期開(kāi)始引種,主產(chǎn)區(qū)集中在東北、華北、華東的膠東半島和西北的漢中地區(qū)[4-5]。西洋參成藥周期一般為4年,忌地性極強(qiáng),在生產(chǎn)上存在嚴(yán)重的連作障礙,其中土壤微生態(tài)失衡和土傳病害的泛濫是導(dǎo)致連作障礙的重要原因[6-8]。立枯病是西洋參苗期的主要病害,其病原菌為立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani),一般發(fā)病率在20%以上,嚴(yán)重地塊高達(dá)50%,甚至造成參苗成片死亡,目前主要的防治措施是化學(xué)藥劑防治,但容易造成農(nóng)藥污染以及病原菌產(chǎn)生耐藥性[9-10]。對(duì)西洋參真菌病害特別是苗期立枯病的生物防治研究報(bào)道較少,張愛(ài)華等[11]通過(guò)木霉30371菌劑和放線菌F05菌劑復(fù)配使用,使西洋參立枯病的防效達(dá)46%,使西洋參銹腐病的盆栽和田間相對(duì)防效分別達(dá)88.93%和44.57%,防治效果不理想。如何有效控制西洋參病害,提高產(chǎn)品品質(zhì),保護(hù)生態(tài)環(huán)境,成為西洋參生產(chǎn)中亟需解決的問(wèn)題。

    木霉(Trichodermaspp.)是自然界廣泛分布的真菌,研究表明木霉具有多種生防機(jī)制,至少對(duì)18個(gè)屬20余種病原真菌和多種病原細(xì)菌有拮抗作用,可在多種逆境下生存和定殖,能夠有效利用環(huán)境中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),抑制植物病害,促進(jìn)植物生長(zhǎng)和誘導(dǎo)植物系統(tǒng)抗性等。目前國(guó)際上有60多個(gè)國(guó)家使用100多種含有木霉菌成分的生物制劑產(chǎn)品[12-14]。不同木霉菌株的生防效果不同,故篩選高效廣譜的木霉菌株以及正確的施用方法至關(guān)重要[15]。

    本實(shí)驗(yàn)室一直從事木霉菌株的篩選與生物活性研究,前期已分離到多株木霉菌株,研究表明其對(duì)多種植物真菌病害具有較好的防治效果及抗逆增產(chǎn)功能[16-17]。本文在前期工作基礎(chǔ)上,通過(guò)抑菌實(shí)驗(yàn)篩選高效抑制西洋參立枯病的木霉菌株,并在小區(qū)條件下進(jìn)行防治效果評(píng)價(jià),為病害防治及高效無(wú)毒微生物農(nóng)藥的推廣應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 供試菌株

    生防木霉為實(shí)驗(yàn)室前期篩選的10株效果較好的木霉菌株。病原真菌為西洋參立枯病菌(RhizoctoniasolaniKuehn)、西洋參黑斑病菌(AlternariapanaxWhetz)、西洋參疫病菌(Phytophthoracactorum)、西洋參猝倒病菌(PythiumdelaryanumHess)、西洋參灰霉病菌(Botrytiscinerea)、西洋參炭疽病菌(ColletotrichumpanacicolaUyeda et Takim),由本實(shí)驗(yàn)室分離自山東榮成西洋參感病植株。西洋參銹腐病菌(Cylindrocarpondestructans)ACCC39132及西洋參根腐病菌(Fusariumsolani)ACCC37121,購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心。

    1.2 試劑與培養(yǎng)基

    PDA(potato dextrose agar)培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂15 g、蒸餾水1000 mL。

    SNA(synthetic low nutrient agar)培養(yǎng)基:KH2PO41.0 g、KNO31.0 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、葡萄糖0.2 g、蔗糖0.2 g、瓊脂15 g、蒸餾水1000 mL。

    CMD(corn meal dextrose)培養(yǎng)基:玉米粉30 g、葡萄糖20 g、瓊脂15 g、蒸餾水1000 mL。

    西洋參種子:供試西洋參種子為自采。

    化學(xué)藥劑:體積分?jǐn)?shù)為2.5%的咯菌腈懸浮種衣劑、33.5 g/L精甲霜靈、25 g/L咯菌腈。

    儀器:Fungal DNA Mini Kit試劑盒(Omega公司);Ta KaRaTaqTM聚合酶(寶生物工程(大連)有限公司),CX31顯微鏡(Olympus公司);MyCycler PCR儀(Bio-Rad公司);GenoSens 1880凝膠成像分析系統(tǒng)(上海勤翔科學(xué)儀器有限公司)。

    1.3 木霉與病原真菌的平板對(duì)峙培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

    利用對(duì)峙實(shí)驗(yàn)篩選對(duì)立枯病菌抑制效果較好的木霉,并測(cè)定優(yōu)良木霉的抑菌譜。PDA平板直徑兩端距中心35 mm處分別接種直徑5 mm的木霉菌株和病原真菌,以只接種病原真菌為對(duì)照,25 ℃培養(yǎng)6 d,對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的病原真菌,預(yù)培養(yǎng)1~2 d后再接種木霉對(duì)峙培養(yǎng),記錄病原真菌對(duì)峙方向生長(zhǎng)半徑,計(jì)算抑制率(RI)。

    (1)

    其中r0為對(duì)照病菌生長(zhǎng)半徑,r為與木霉對(duì)峙培養(yǎng)的病菌生長(zhǎng)半徑。

    1.4 木霉可濕性粉劑制備

    通過(guò)對(duì)峙培養(yǎng),篩選可用于小區(qū)試驗(yàn)的木霉菌株。以硅藻土為載體,制備木霉的可濕性粉劑,制劑初始分生孢子量為2億/g,水分為5%~10%。

    1.5 木霉制劑防治西洋參立枯病小區(qū)試驗(yàn)

    1.5.1 拌種處理

    試驗(yàn)時(shí)間為2015-10-30—2016-11-07,在山東省榮成市上莊鎮(zhèn)東上莊村西洋參種植地進(jìn)行,該地塊上年立枯病發(fā)病率中等偏上。試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理:CK(清水對(duì)照);化學(xué)藥劑,體積分?jǐn)?shù)為2.5%的咯菌腈懸浮種衣劑,10 mL稀釋為原濃度1/5后拌種2~3 kg西洋參種子;HB20111可濕性粉劑,200~300 g稀釋為原濃度1/5后拌種10 kg西洋參種子;QT21979可濕性粉劑,200~300 g稀釋為原濃度1/5后拌種10 kg西洋參種子;TW21990可濕性粉劑,200~300 g稀釋為原濃度1/5后拌種10 kg西洋參種子。小區(qū)面積10 m2,每小區(qū)播種數(shù)量一致的西洋參種子,設(shè)保護(hù)行,隨機(jī)分布,每處理設(shè)3個(gè)重復(fù),常規(guī)管理。

    西洋參完全出苗28 d后調(diào)查病株數(shù),每次處理隨機(jī)抽取5行進(jìn)行調(diào)查(每行播種26粒種子),計(jì)算病株率(d)和防治效果(c),如式(2)~(3)。于2016-10-20—2016-11-10期間挖出參苗,統(tǒng)計(jì)1年生西洋參的單株參鮮重和總參鮮重,計(jì)算單株參增重率(wgs)和總參增重率(wga),如式(4)~(5)。

    (2)

    其中di為病株數(shù),da為總調(diào)查株數(shù)。

    (3)

    其中d為處理組病株率,d0為對(duì)照組病株率。

    (4)

    其中ws為處理組單株參鮮重,ws0為對(duì)照組單株參鮮重。

    (5)

    其中wa為處理組總參鮮重,wa0為對(duì)照組總參鮮重。

    1.5.2 蘸根處理

    試驗(yàn)期為2016-11-07—2017-10-11,在1.5.1試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,挖取1年生參苗,蘸根后移栽。試驗(yàn)設(shè)5個(gè)處理:(Ⅰ)CK(清水對(duì)照);(Ⅱ)化學(xué)藥劑對(duì)照,33.5 g/L精甲霜靈+25 g/L咯菌腈10 g兌水30 kg蘸根1 min;(Ⅲ)HB20111可濕性粉劑稀釋為原濃度的1/50蘸根10 min;(Ⅳ)QT21979可濕性粉劑稀釋為原濃度的1/50蘸根10 min;(Ⅴ)TW21990可濕性粉劑稀釋為原濃度的1/50蘸根10 min。小區(qū)面積5 m2,每小區(qū)移栽數(shù)量一致的西洋參幼苗,設(shè)保護(hù)行,隨機(jī)分布,每處理設(shè)3個(gè)重復(fù),常規(guī)管理。

    第2年移栽30~40 d后調(diào)查病株數(shù),每次處理隨機(jī)抽取5行進(jìn)行調(diào)查(每行移栽16株幼苗),計(jì)算d和c。于2017-10-1—2017-10-11期間挖出參苗,統(tǒng)計(jì)2年生西洋參的單株參鮮重和總參鮮重,計(jì)算wgs和wga。計(jì)算公式同1.5.1。

    1.6 木霉菌株鑒定

    1.6.1 形態(tài)學(xué)觀察

    分別在SNA、PDA和CMD平板上培養(yǎng)木霉菌株,定期觀察菌落形態(tài)及分生孢子梗、瓶梗的發(fā)育形態(tài)。

    1.6.2 分子鑒定

    利用Omega公司的Fungal DNA Mini Kit試劑盒提取木霉基因組DNA,用ITS(internal transcribed spacer)通用引物ITS1-F/ITS4進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物交上海生工生物股份有限公司進(jìn)行測(cè)序,結(jié)果分別提交NCBI(national center for biotechnology information)[18]和ISTH(international subcommission onThrichodermaandHypocrea)[19]網(wǎng)站進(jìn)行比對(duì)分析。選取NCBI上與目標(biāo)菌株同源性較高的ITS序列,利用MEGA 5.0中的Upgma構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù),自展數(shù)據(jù)集為1000次,分析其親緣關(guān)系。

    1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    本文數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件中的Duncan’s方法進(jìn)行分析,結(jié)果為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,以不同小寫字母表示各處理間在0.05水平上存在顯著性差異,以不同大寫字母表示各處理間在0.01水平上存在極顯著性差異。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 木霉菌株對(duì)立枯絲核菌的抑制作用

    供試木霉菌株在PDA平板上對(duì)R.solani均有一定的抑制作用,不同木霉菌株的抑制率不同。其中菌株HB20111的抑制效果最好,抑制率達(dá)99.33%,與其他菌株間存在極顯著性差異(P<0.01),另外菌株QT21979和TW21990的抑制效果也達(dá)到了93.00%以上,效果稍低于HB20111,結(jié)果見(jiàn)圖1。下文將利用這3株木霉制備可濕性粉劑,進(jìn)行西洋參立枯病的小區(qū)防治效果評(píng)價(jià)。

    圖1 木霉菌株在PDA平板上對(duì)立枯絲核菌的抑制作用Fig.1 Inhibition ratio of Trichoderma spp. strains against R. solani on a PDA plate

    2.2 木霉可濕性粉劑對(duì)西洋參立枯病的小區(qū)防治效果

    2.2.1 拌種處理

    木霉可濕性粉劑拌種處理結(jié)果見(jiàn)表1。木霉處理和化學(xué)包衣處理對(duì)西洋參立枯病均有一定的防治效果,不同處理的病株率不同。3種木霉制劑處理的病株率與清水對(duì)照間均存在極顯著性差異(P<0.01)。不同木霉處理與化學(xué)包衣間的差異不同,其中木霉QT21979效果比化學(xué)包衣差,木霉TW21990與化學(xué)包衣間無(wú)差異,木霉HB20111效果最好,與化學(xué)包衣處理間存在極顯著性差異(P<0.01),拌種處理后防治效果達(dá)到了71.81%。

    表1 木霉可濕性粉劑拌種處理對(duì)西洋參立枯病的小區(qū)防治效果

    注:結(jié)果為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差

    木霉可濕性粉劑對(duì)西洋參有促生長(zhǎng)作用,3種木霉處理后的1年單株參鮮重與清水對(duì)照間均存在極顯著性差異(P<0.01),其中HB20111和TW21990與化學(xué)包衣間也存在極顯著性差異(P<0.01),單株參增重率分別達(dá)到了33.54%和24.63%。

    3種木霉處理后的1年總參鮮重與清水對(duì)照間均存在極顯著性差異(P<0.01),其中HB20111和TW21990與化學(xué)包衣處理間也存在極顯著性差異(P<0.01),總參增重率分別達(dá)到了92.75%和68.97%。

    2.2.2 蘸根處理對(duì)西洋參立枯病的小區(qū)防治效果

    在2.2.1拌種處理的基礎(chǔ)上,繼續(xù)用木霉蘸根處理西洋參防治立枯病,結(jié)果見(jiàn)表2。各處理組的病株率與清水對(duì)照間存在極顯著性差異(P<0.01),但木霉QT21979處理與化學(xué)包衣間無(wú)差異,木霉TW21990處理與化學(xué)包衣間存在顯著性差異(P<0.05),木霉HB20111效果最好,與化學(xué)包衣間存在極顯著性差異(P<0.01),蘸根處理后防治效果達(dá)到了91.04%。

    表2 木霉可濕性粉劑蘸根處理對(duì)西洋參立枯病的小區(qū)防治效果

    注: 結(jié)果為3次重復(fù)的平均值±標(biāo)準(zhǔn)差

    3種木霉處理后的2年單株參鮮重與清水對(duì)照及化學(xué)包衣間均存在極顯著性差異(P<0.01),其中HB20111效果最好,單株參增重率達(dá)到了158.06%。

    3種木霉處理后的2年總參鮮重與清水對(duì)照及化學(xué)包衣間均存在極顯著性差異(P<0.01),其中HB20111效果最好,總參增重率達(dá)到了1 369.34%。

    2.3 木霉菌株HB20111的抑菌譜

    將上述效果最好的木霉菌株HB20111進(jìn)行抑菌譜檢測(cè),結(jié)果見(jiàn)圖2。HB20111在PDA平板上對(duì)供試8種西洋參病原真菌均有拮抗作用,對(duì)不同病原真菌的抑制率間存在極顯著性差異(P<0.01),其中對(duì)R.solani、F.solani、B.cinerea、P.delaryanum、C.panacicola抑制效果最好,25℃對(duì)峙培養(yǎng)6 d的抑制率均達(dá)到了98.5%以上。

    圖2 木霉菌株HB20111的抑菌譜Fig.2 Antimicrobial spectrum of Trichoderma spp. strain HB20111

    2.4 木霉菌株HB20111的種類鑒定

    2.4.1 菌株形態(tài)學(xué)特征

    對(duì)木霉菌株HB20111進(jìn)行種類鑒定,該菌株采集自山東省濱州黃河濕地土壤,該地區(qū)經(jīng)度117.964°E,緯度32.292°N,在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心的保藏編號(hào)為CGMCC No. 16963。

    圖3 木霉菌株HB20111的形態(tài)特征Fig. 3 Morphological characteristics of Trichoderma spp. strain HB20111

    木霉菌株HB20111的形態(tài)特征見(jiàn)圖3,其中,圖3a~c為在不同培養(yǎng)基上25 ℃培養(yǎng)7 d的菌落特征。菌株HB20111在SNA培養(yǎng)基上20、25、30、35 ℃培養(yǎng)72 h,菌落半徑分別為15.0~17.0 mm、26.0~28.5 mm、30.0~32.0 mm、2.5~4.0 mm,高于40 ℃不生長(zhǎng),最適生長(zhǎng)溫度為25~30 ℃。在SNA培養(yǎng)基上25 ℃培養(yǎng)7 d,菌落表面氣生菌絲疏松,分生孢子綠色,產(chǎn)生鋸齒狀同心輪紋,邊緣有綠色產(chǎn)孢簇,基質(zhì)中無(wú)水溶性色素分布,菌落反面無(wú)色。

    在PDA培養(yǎng)基上20、25、30、35 ℃培養(yǎng)72 h,菌落半徑分別為43.0~44.5 mm、56.5~58.5 mm、40.0~42.0 mm、2.0~3.5 mm,高于40 ℃不生長(zhǎng),最適生長(zhǎng)溫度為25~30 ℃。在PDA培養(yǎng)基上25 ℃培養(yǎng)7 d,菌落表面呈絲絨狀,邊界清晰,中央有一菌絲相對(duì)致密的圓盤狀結(jié)構(gòu),是分生孢子的主要產(chǎn)生區(qū)域,分生孢子綠色濃密,菌落反面白色,有椰香味氣體產(chǎn)生。

    在CMD培養(yǎng)基上25 ℃培養(yǎng)7 d,菌落表面呈粉塵顆粒狀,菌絲疏松、有兩圈綠色同心輪紋,菌落邊緣分布直徑為2.0~3.0 mm的產(chǎn)孢簇,分生孢子綠色,菌落反面白色,基質(zhì)中無(wú)水溶性色素產(chǎn)生,有椰子氣味。

    分生孢子梗分枝特征與深綠木霉(T.atroviride)一致[20],為典型的單側(cè)分枝,分枝角度近似90°,但也常見(jiàn)成對(duì)著生分枝。瓶梗長(zhǎng)度(4.2~)6.0~9.7(~15.0) μm,長(zhǎng)寬比例(1.1~)1.8~3.5(~6.3),基部寬度為(1.2~)1.7~2.5(~3.5) μm,無(wú)間生瓶梗。

    分生孢子綠色,亞球型或卵圓形,表面光滑,(2.3~)2.8~3.5(~4.0) μm,長(zhǎng)寬比例為(0.8~)1.0~1.3(~1.6)。

    在CMD培養(yǎng)基上25 ℃培養(yǎng)7 d可產(chǎn)生大量的厚垣孢子,球形至亞球形,端生或間生,直徑為(5.0~)8.5~7.5(~11.0) μm。

    2.4.2 菌株序列分析

    菌株HB20111的ITS序列為608 bp,在GenBank上的登錄號(hào)為EU272523.1,經(jīng)http:∥www.isth.info中的TrichOKEY進(jìn)行比對(duì),分別在73、94、241、399、503處發(fā)現(xiàn)了木霉的5個(gè)DNA寡核苷酸條形編碼,種類鑒定結(jié)果表明菌株HB20111為深綠木霉(T.atroviride)。

    將ITS序列提交NCBI進(jìn)行比對(duì),菌株HB20111與T.atroviride菌株ACCC32886 [MF871543.1]同源性最高,為100.0%。選取NCBI中與菌株HB20111的ITS同源性較高的序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù),結(jié)果見(jiàn)圖4。進(jìn)化樹(shù)中HB20111與T.atroviride位于同一分枝,同源性最高,故HB20111應(yīng)為T.atroviride。

    圖4 基于ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)Fig.4 Phylogenetic tree based on ITS sequences

    3 討論

    本試驗(yàn)中清水對(duì)照西洋參病株率較高,第1年病株率為38.20%、第2年病株率為83.75%,第2年清水對(duì)照病株率升高可能與立枯病情加重有關(guān)。3種供試木霉制劑在西洋參立枯病的小區(qū)防治結(jié)果表明,菌株不同,效果差異顯著。其中菌株QT21979對(duì)西洋參立枯病的防治效果比化學(xué)藥劑差,菌株TW21990對(duì)西洋參立枯病的防治效果與化學(xué)藥劑無(wú)極顯著性差異(P≥0.01),菌株HB20111效果最好;第1年拌種處理對(duì)西洋參立枯病的防治效果、單株參增重率及總參增重率分別為71.81%、33.54%和92.75%;第2年蘸根處理對(duì)西洋參立枯病的防治效果、單株參增重率及總參增重率分別為91.04%、158.06%和1369.34%。由于在第1年的基礎(chǔ)上繼續(xù)施用木霉,故第2年效果更顯著。主要原因是木霉處理后大大降低了西洋參的病株率,單位面積總參增重率更加明顯,且木霉可產(chǎn)生植物生長(zhǎng)素,促進(jìn)參苗生長(zhǎng)[21],故對(duì)單株參鮮重也有明顯的增產(chǎn)作用,其機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

    2年蘸根處理后,化學(xué)包衣處理較清水對(duì)照,雖降低了病株率,但單株參鮮重較清水對(duì)照有所降低,推測(cè)原因可能是試驗(yàn)過(guò)程中用化學(xué)藥劑蘸根1 min,處理時(shí)間較長(zhǎng)(可能處理時(shí)間10~20 s較合適),對(duì)根造成了傷害,故處理后參苗生長(zhǎng)緩慢。

    本試驗(yàn)篩選得到的木霉菌株HB20111,經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子序列鑒定,結(jié)果均為深綠木霉(T.atroviride),該菌株生長(zhǎng)速度快,產(chǎn)孢能力強(qiáng),抑菌譜結(jié)果表明對(duì)西洋參多種真菌病害均有較高的抑制效果。另外,菌株HB20111在西洋參上效果較好,也可能與西洋參生長(zhǎng)的土壤濕度、溫度與木霉生長(zhǎng)條件一致,木霉可以在根際及土壤中有效定殖,抑制病菌生長(zhǎng)及侵染植物。

    試驗(yàn)結(jié)果表明,HB20111能夠替代化學(xué)殺菌劑應(yīng)用于西洋參生產(chǎn),具有潛在應(yīng)用價(jià)值。下一步將進(jìn)行殺蟲劑替代技術(shù)和土壤綠色消毒技術(shù)研究,構(gòu)建西洋參全程綠色防控和種植技術(shù),為鄉(xiāng)村振興提供高效、綠色、環(huán)保、可持續(xù)的技術(shù)和產(chǎn)品。

    猜你喜歡
    立枯病木霉西洋參
    木霉和殺菌劑聯(lián)用對(duì)橡膠榕白絹病菌的抑制作用
    “參”得人心的文登西洋參
    金橋(2020年7期)2020-08-13 03:07:02
    益氣養(yǎng)陰西洋參
    歐盟評(píng)估來(lái)自一種轉(zhuǎn)基因里氏木霉的α-淀粉酶的安全性
    西洋參的前世 今生
    青海云杉的生長(zhǎng)習(xí)性及葉銹病、立枯病的防治
    水稻立枯病防治技術(shù)
    綠色木霉發(fā)酵制備雷竹筍渣膳食纖維的工藝研究
    不同保存條件對(duì)里氏木霉孢子粉保質(zhì)期的影響
    種好西洋參致富奔小康
    天天躁夜夜躁狠狠久久av| 男女高潮啪啪啪动态图| 午夜av观看不卡| 日本wwww免费看| 精品国产乱码久久久久久小说| 激情五月婷婷亚洲| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 人妻 亚洲 视频| 免费观看av网站的网址| 日本色播在线视频| 丁香六月欧美| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲欧美精品自产自拍| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 色婷婷久久久亚洲欧美| 午夜福利乱码中文字幕| 热99久久久久精品小说推荐| 日韩av在线免费看完整版不卡| 91国产中文字幕| 最近的中文字幕免费完整| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 咕卡用的链子| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 夫妻午夜视频| 亚洲欧美激情在线| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 久久性视频一级片| av在线播放精品| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 亚洲欧美一区二区三区久久| 中文字幕制服av| 亚洲久久久国产精品| 最新的欧美精品一区二区| 欧美少妇被猛烈插入视频| 又黄又粗又硬又大视频| 青春草视频在线免费观看| 亚洲欧美精品自产自拍| av一本久久久久| 九色亚洲精品在线播放| 国产成人一区二区在线| 日韩伦理黄色片| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产一级毛片在线| 波野结衣二区三区在线| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲四区av| 午夜影院在线不卡| 最新的欧美精品一区二区| 久久午夜综合久久蜜桃| 妹子高潮喷水视频| 五月开心婷婷网| 操出白浆在线播放| 亚洲精品国产av成人精品| 精品亚洲成国产av| 久久久久久久久久久久大奶| 9色porny在线观看| 性色av一级| 深夜精品福利| 久久这里只有精品19| 中文字幕高清在线视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 亚洲欧美一区二区三区黑人| xxx大片免费视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产一区有黄有色的免费视频| 免费观看人在逋| 成人国语在线视频| 亚洲五月色婷婷综合| 免费看不卡的av| 日韩大码丰满熟妇| 天美传媒精品一区二区| 亚洲少妇的诱惑av| 老鸭窝网址在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 久久国产精品大桥未久av| 亚洲av男天堂| 97人妻天天添夜夜摸| 蜜桃在线观看..| 日韩一本色道免费dvd| 精品一区在线观看国产| 午夜精品国产一区二区电影| 久久人妻熟女aⅴ| 啦啦啦在线观看免费高清www| 久久久久网色| 欧美av亚洲av综合av国产av | 成人国产av品久久久| 亚洲久久久国产精品| 免费人妻精品一区二区三区视频| 在线观看免费高清a一片| 亚洲伊人色综图| 国产有黄有色有爽视频| www.熟女人妻精品国产| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲中文av在线| 国产一区二区在线观看av| av电影中文网址| 免费少妇av软件| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国产男女内射视频| 秋霞在线观看毛片| 亚洲人成77777在线视频| e午夜精品久久久久久久| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲国产欧美在线一区| 各种免费的搞黄视频| 男女高潮啪啪啪动态图| av网站在线播放免费| 国产亚洲最大av| 热re99久久国产66热| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 777久久人妻少妇嫩草av网站| 久久久久久久大尺度免费视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 精品酒店卫生间| 最近中文字幕2019免费版| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产成人欧美在线观看 | 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 下体分泌物呈黄色| 亚洲成人国产一区在线观看 | 久久 成人 亚洲| 亚洲国产精品国产精品| 日韩大码丰满熟妇| 咕卡用的链子| 熟女av电影| 少妇被粗大猛烈的视频| 五月天丁香电影| 久久天堂一区二区三区四区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| av不卡在线播放| 久久久精品免费免费高清| 国产 一区精品| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产不卡av网站在线观看| 波多野结衣一区麻豆| 精品少妇内射三级| 国产av一区二区精品久久| 国产精品一国产av| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 国产精品嫩草影院av在线观看| 午夜免费观看性视频| 成人手机av| 精品卡一卡二卡四卡免费| 免费少妇av软件| av在线观看视频网站免费| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 午夜激情av网站| 成人漫画全彩无遮挡| 国产成人免费无遮挡视频| av在线观看视频网站免费| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| av一本久久久久| 青春草国产在线视频| 大香蕉久久网| 各种免费的搞黄视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品人妻一区二区三区麻豆| 久久免费观看电影| 黄色怎么调成土黄色| 最近2019中文字幕mv第一页| 成人免费观看视频高清| 男女国产视频网站| 在线观看人妻少妇| 两性夫妻黄色片| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 久久婷婷青草| 成人黄色视频免费在线看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 久久久久精品性色| 日韩大片免费观看网站| 精品久久久久久电影网| 观看美女的网站| 老司机深夜福利视频在线观看 | 久久精品亚洲av国产电影网| 国产精品人妻久久久影院| 国产日韩欧美视频二区| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 久久久精品94久久精品| av线在线观看网站| 一区二区三区精品91| 亚洲国产欧美网| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日日撸夜夜添| 中文字幕亚洲精品专区| 满18在线观看网站| 9191精品国产免费久久| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲国产中文字幕在线视频| 午夜精品国产一区二区电影| 国产极品天堂在线| 亚洲国产精品成人久久小说| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 精品一区在线观看国产| 亚洲少妇的诱惑av| 99香蕉大伊视频| av女优亚洲男人天堂| 岛国毛片在线播放| 美女扒开内裤让男人捅视频| 97在线人人人人妻| 十八禁人妻一区二区| 美国免费a级毛片| 免费在线观看完整版高清| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲熟女毛片儿| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲成人免费av在线播放| 欧美日韩成人在线一区二区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 大陆偷拍与自拍| av天堂久久9| 亚洲少妇的诱惑av| 国产精品无大码| 国产精品熟女久久久久浪| 91精品三级在线观看| 国产成人91sexporn| 欧美成人午夜精品| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 丁香六月欧美| 黄片小视频在线播放| 国产成人免费观看mmmm| 999精品在线视频| av.在线天堂| 看免费av毛片| 日韩精品免费视频一区二区三区| 最新在线观看一区二区三区 | 亚洲少妇的诱惑av| 欧美另类一区| 久久精品国产a三级三级三级| 1024视频免费在线观看| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 考比视频在线观看| 777米奇影视久久| 国产精品蜜桃在线观看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 国产在线视频一区二区| 夫妻午夜视频| 在线观看人妻少妇| 精品一区二区免费观看| 久热爱精品视频在线9| 精品国产露脸久久av麻豆| 青青草视频在线视频观看| 欧美在线黄色| 成人国语在线视频| 国产乱人偷精品视频| 街头女战士在线观看网站| 国产精品嫩草影院av在线观看| 性高湖久久久久久久久免费观看| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产毛片在线视频| 男女高潮啪啪啪动态图| h视频一区二区三区| 少妇人妻久久综合中文| 久久久久久久国产电影| 国产精品无大码| 午夜激情av网站| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 日本av手机在线免费观看| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲国产欧美在线一区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 七月丁香在线播放| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 欧美日韩一级在线毛片| 老司机靠b影院| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美日韩精品网址| 男女下面插进去视频免费观看| 久久韩国三级中文字幕| 久久鲁丝午夜福利片| 欧美精品av麻豆av| 考比视频在线观看| √禁漫天堂资源中文www| 一个人免费看片子| 免费不卡黄色视频| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美日韩视频精品一区| 国产乱来视频区| 男女免费视频国产| 亚洲四区av| 夫妻性生交免费视频一级片| 日本爱情动作片www.在线观看| 热99久久久久精品小说推荐| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 高清在线视频一区二区三区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 国产成人欧美| 中文欧美无线码| 9热在线视频观看99| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲第一青青草原| 久久ye,这里只有精品| 精品国产一区二区三区四区第35| 少妇的丰满在线观看| 久久人人97超碰香蕉20202| 制服诱惑二区| 国产成人欧美| 只有这里有精品99| 日韩一区二区三区影片| 免费高清在线观看视频在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 国产av一区二区精品久久| 亚洲av欧美aⅴ国产| h视频一区二区三区| 在线看a的网站| 久久久久国产一级毛片高清牌| 欧美日韩av久久| 国产毛片在线视频| 少妇被粗大猛烈的视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 一级爰片在线观看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 搡老乐熟女国产| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产欧美亚洲国产| e午夜精品久久久久久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 少妇被粗大的猛进出69影院| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 亚洲欧美一区二区三区久久| 亚洲专区中文字幕在线 | 人体艺术视频欧美日本| 一本色道久久久久久精品综合| av不卡在线播放| 亚洲国产精品999| 精品一区二区免费观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲精品国产区一区二| 国产熟女午夜一区二区三区| 久久久久久人人人人人| 国产精品一国产av| 中文字幕亚洲精品专区| 午夜老司机福利片| 男女午夜视频在线观看| 成人国产av品久久久| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲美女视频黄频| 亚洲国产最新在线播放| 日韩一区二区视频免费看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 97精品久久久久久久久久精品| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 欧美 日韩 精品 国产| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产视频首页在线观看| 999久久久国产精品视频| 久久99一区二区三区| 欧美精品av麻豆av| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产精品人妻久久久影院| 一区二区三区激情视频| 国产精品偷伦视频观看了| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 亚洲av男天堂| 亚洲第一av免费看| 多毛熟女@视频| 欧美变态另类bdsm刘玥| 丰满迷人的少妇在线观看| 国产成人一区二区在线| 亚洲,一卡二卡三卡| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 欧美国产精品一级二级三级| 国产又爽黄色视频| xxx大片免费视频| av在线app专区| 哪个播放器可以免费观看大片| 超碰97精品在线观看| 制服诱惑二区| 欧美日韩亚洲高清精品| bbb黄色大片| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 制服诱惑二区| 免费黄网站久久成人精品| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 高清在线视频一区二区三区| 亚洲国产欧美在线一区| 久久婷婷青草| av片东京热男人的天堂| 老鸭窝网址在线观看| 一级片'在线观看视频| 午夜免费鲁丝| 国产成人a∨麻豆精品| 国产高清不卡午夜福利| 国产国语露脸激情在线看| 高清欧美精品videossex| 99国产精品免费福利视频| 天美传媒精品一区二区| 国产成人精品在线电影| 老司机深夜福利视频在线观看 | 国产精品久久久人人做人人爽| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲国产精品999| 免费观看性生交大片5| 女人久久www免费人成看片| 9191精品国产免费久久| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 精品一品国产午夜福利视频| 久久久久人妻精品一区果冻| 看免费成人av毛片| 丰满少妇做爰视频| 中文天堂在线官网| 日韩一区二区三区影片| 精品国产乱码久久久久久小说| 乱人伦中国视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 日本欧美视频一区| 久久午夜综合久久蜜桃| 岛国毛片在线播放| 中文字幕精品免费在线观看视频| 人体艺术视频欧美日本| 校园人妻丝袜中文字幕| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产精品一二三区在线看| tube8黄色片| 国产精品.久久久| 国产极品天堂在线| av国产久精品久网站免费入址| 国产免费现黄频在线看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 中文天堂在线官网| 亚洲成人一二三区av| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久精品国产亚洲av涩爱| av在线播放精品| 欧美人与善性xxx| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 午夜免费鲁丝| 无遮挡黄片免费观看| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 久久久国产欧美日韩av| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 在线观看www视频免费| 久久精品国产亚洲av高清一级| 日韩免费高清中文字幕av| 99国产综合亚洲精品| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 2018国产大陆天天弄谢| 99久久人妻综合| av福利片在线| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 精品国产露脸久久av麻豆| 在线精品无人区一区二区三| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲美女搞黄在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 丝袜在线中文字幕| 欧美日韩视频精品一区| 另类精品久久| 男的添女的下面高潮视频| 日本欧美国产在线视频| 大陆偷拍与自拍| 精品第一国产精品| av国产久精品久网站免费入址| 男女床上黄色一级片免费看| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产成人系列免费观看| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲四区av| 99国产综合亚洲精品| 毛片一级片免费看久久久久| 捣出白浆h1v1| 天美传媒精品一区二区| 国产成人一区二区在线| 在线观看国产h片| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲精品国产一区二区精华液| 一个人免费看片子| 国产97色在线日韩免费| 高清在线视频一区二区三区| av片东京热男人的天堂| 人人妻,人人澡人人爽秒播 | 精品酒店卫生间| 亚洲色图综合在线观看| 日本黄色日本黄色录像| 校园人妻丝袜中文字幕| 在线精品无人区一区二区三| 黄片播放在线免费| 久久av网站| 久久综合国产亚洲精品| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲情色 制服丝袜| 99re6热这里在线精品视频| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲第一青青草原| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 天天添夜夜摸| 最近的中文字幕免费完整| 久久久久精品久久久久真实原创| 一区福利在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 男女免费视频国产| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲精品国产av蜜桃| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 久久99精品国语久久久| 韩国av在线不卡| 久久免费观看电影| 国产 精品1| 国产黄色免费在线视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 久久99精品国语久久久| 免费看av在线观看网站| 亚洲一区二区三区欧美精品| 99热全是精品| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 欧美日韩av久久| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 大片免费播放器 马上看| 久久女婷五月综合色啪小说| 丝袜美足系列| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲成人手机| 成人免费观看视频高清| 大片免费播放器 马上看| 丝袜美腿诱惑在线| 2021少妇久久久久久久久久久| 成人毛片60女人毛片免费| 欧美日韩精品网址| 这个男人来自地球电影免费观看 | 欧美日韩综合久久久久久| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 满18在线观看网站| 九色亚洲精品在线播放| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 另类精品久久| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 婷婷色综合www| 国产精品一国产av| 美女午夜性视频免费| xxxhd国产人妻xxx| 交换朋友夫妻互换小说| 丝瓜视频免费看黄片| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美激情高清一区二区三区 | 最新在线观看一区二区三区 | 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| xxx大片免费视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | avwww免费| 国产99久久九九免费精品| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲美女搞黄在线观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 婷婷成人精品国产| 2018国产大陆天天弄谢| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产日韩欧美视频二区| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产免费福利视频在线观看| 中文字幕亚洲精品专区| 激情五月婷婷亚洲| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 国产成人欧美| 国产精品 欧美亚洲| 国产av精品麻豆| 久久久久久免费高清国产稀缺| 午夜激情久久久久久久| 国产免费现黄频在线看| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲av福利一区| 黄色视频不卡| 狂野欧美激情性bbbbbb| 一本色道久久久久久精品综合| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品免费视频内射| 国产成人91sexporn| 国产一卡二卡三卡精品 | 看十八女毛片水多多多| 久久人人爽人人片av| 亚洲国产欧美在线一区| 色94色欧美一区二区| 性色av一级| 国产激情久久老熟女| 午夜福利在线免费观看网站| 另类精品久久| 国产成人啪精品午夜网站| 久久女婷五月综合色啪小说| 啦啦啦啦在线视频资源| 啦啦啦在线观看免费高清www| 亚洲av电影在线进入| 亚洲av综合色区一区| svipshipincom国产片| 香蕉丝袜av| 国产爽快片一区二区三区| 丰满迷人的少妇在线观看|