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    注射用伏立康唑細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法探究

    2019-10-17 05:36:28鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院河南省兒童醫(yī)院鄭州兒童醫(yī)院450000許哲
    首都食品與醫(yī)藥 2019年15期
    關(guān)鍵詞:生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)

    鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 河南省兒童醫(yī)院 鄭州兒童醫(yī)院(450000)許哲

    1 資料與方法

    1.1 資料

    1.1.1 樣品 選取我院采購(gòu)的不同生產(chǎn)廠家、不同生產(chǎn)批次的注射用伏立康唑共8種(商品名:輝瑞威凡,Pfizer Limited生產(chǎn),國(guó)藥準(zhǔn)字H20040662、H20090717、針劑,規(guī)格:200mg/支;珠海億邦制藥有限公司生產(chǎn),國(guó)藥準(zhǔn)字H20058964、H20052296針劑,規(guī)格:50mg/瓶;商品名:迪爾達(dá)寧,晉城海斯制藥有限公司生產(chǎn),國(guó)藥準(zhǔn)字H20160105、H200058963、H20052298針劑,規(guī)格:50mg/瓶;麗珠集團(tuán)麗珠制藥廠生產(chǎn),國(guó)藥準(zhǔn)字H20064493針劑,規(guī)格:50mg/瓶)。

    選取我院采購(gòu)的鱟試劑2種,美洲鱟試劑(Limulus Amebocyte Lysate,LAL),美國(guó)CR恩度斯弗公司生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)1606072靈敏度為0.5EU/mL;LALII,廈門市鱟試劑廠生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)1602024靈敏度0.5EU/mL。選取我院采購(gòu)的BET水(廈門市鱟試劑廠生產(chǎn),生產(chǎn)批號(hào)1602025規(guī)格:每瓶50ml)。選取我院采購(gòu)的細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品(中國(guó)食品藥品檢定研究院產(chǎn)品,生產(chǎn)批號(hào)150601-201174,規(guī)格160EU/支)。

    1.1.2 檢驗(yàn)儀器 恒溫水浴鍋(北京斯普特科技有限公司生產(chǎn),型號(hào):HHS-21-4);試管恒溫儀(北京京晶科技有限公司,型號(hào):TAL-40D);旋渦混合器(德國(guó)IKA公司生產(chǎn),型號(hào):VORTEX2);高溫烘箱(上海喆圖科學(xué)儀器有限公司型號(hào):THG-9249A)等。實(shí)驗(yàn)使用的所有用具均高溫消毒。

    附表 復(fù)核實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    1.2 檢驗(yàn)方法

    1.2.1 確定注射用伏立康唑細(xì)菌內(nèi)毒素檢查的限值 由臨床用量及靜脈滴注時(shí)間可知細(xì)菌內(nèi)毒素總量限值為1.68EU/mg,但根據(jù)相關(guān)要求[1],應(yīng)將限值下調(diào)為計(jì)算值的1/3~1/2,即其限值應(yīng)為0.76EU/mg。

    1.2.2 復(fù)核本次研究選取的鱟試劑的靈敏度 按2015年版藥典通則部分可知細(xì)菌內(nèi)毒素檢查凝膠法[2]。

    1.2.3 注射用伏立康唑干擾實(shí)驗(yàn) 首先對(duì)其進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。然后再進(jìn)行確認(rèn)實(shí)驗(yàn):將樣品全部稀釋為0.66mg/mL作為供試品A;將供試品A與BET水把內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品分別稀釋為含內(nèi)毒素2、1、0.5、0.25λ的溶液B、C;再取BET作為陰性對(duì)照組D;溶液配好后再按照最新版藥典的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查凝膠法進(jìn)行檢驗(yàn)。做4組平行的B溶液和2組平行的A、C、D溶液。

    1.2.4 按照擬定的BET標(biāo)準(zhǔn)檢查樣品 按最新版中國(guó)藥典通則-細(xì)菌內(nèi)毒素檢查凝膠限度實(shí)驗(yàn)法。

    2 結(jié)果

    2.1 兩種鱟試劑的靈敏度復(fù)核符合要求(λ都為0.5~2)。見附表。

    2.2 干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果 配制的A、D溶液經(jīng)試驗(yàn)均為陰性結(jié)果,B、C溶液經(jīng)試驗(yàn)證明均符合鱟試劑靈敏度復(fù)核要求,不僅說明實(shí)驗(yàn)有效,而且證明注射用伏立康唑稀釋至0.66mg/mL后,再使用0.25EU/mL的鱟試劑進(jìn)行BET,無(wú)干擾作用。

    2.3 按BET標(biāo)準(zhǔn)檢查樣品結(jié)果 由上述結(jié)果可知伏立康唑細(xì)菌內(nèi)毒素應(yīng)該<0.76EU/mg。采用鱟試劑對(duì)其進(jìn)行檢查,確定本次研究使用的8個(gè)樣品均符合要求。

    3 討論

    伏立康唑是臨床上經(jīng)常使用的一種抗真菌藥物。臨床使用的伏立康唑有多種藥劑形式,例如:膠囊、片劑、注射劑等。目前,我們此次研究的伏立康唑?yàn)樽⑸鋭瑑?yōu)點(diǎn)為藥品作用迅速,準(zhǔn)確,但如何保證注射用伏立康唑的安全使用就成為我們必須要注重的問題。研究表明,細(xì)菌內(nèi)毒素已成為多種并發(fā)癥的致病原因。主要原因?yàn)榧?xì)菌內(nèi)毒素可以進(jìn)入血液循環(huán),從而引起機(jī)體的病理反應(yīng),即內(nèi)毒素血癥。但由于其不能得到及時(shí)有效的治療,嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致微循環(huán)障礙或多器官功能衰竭等,此病的死亡率逐年上升。因此,嚴(yán)格把控注射用藥的細(xì)菌內(nèi)毒素含量、提高用藥的安全性是極為重要的。通過對(duì)此研究的結(jié)果資料分析顯示,采用2015年版《中華人民共和國(guó)藥典:四部》通則規(guī)定的方法對(duì)注射用伏立康唑細(xì)菌內(nèi)毒素進(jìn)行檢驗(yàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明稀釋至0.66mg/mL的樣品對(duì)鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素反應(yīng)無(wú)干擾,且限值為0.76EU/mg的鱟試劑都可以對(duì)其進(jìn)行BET。

    綜上所述,注射用伏立康唑細(xì)菌內(nèi)毒素檢查應(yīng)嚴(yán)格按要求確定限值,確保其小于0.76EU/mg。

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