市售薏苡仁飲片質(zhì)量分析與評(píng)價(jià)

畢天琛 ，趙丹彤 ，2△，周 欣 ，楊國寧

（1.山東省菏澤市食品藥品檢驗(yàn)檢測研究院，山東 菏澤 274000； 2.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250355）

薏苡仁為禾本科植物薏苡Coix lacryma-jobiL.var.mayuen（Roman.）Stapf的干燥成熟種仁，俗稱米仁、六谷子、川谷子、菩提子，又稱薏米、苡仁和薏仁等，性涼，味甘淡，用于治療水腫、腳氣、小便不利、脾虛泄瀉、濕痹拘攣、肺癰、腸癰、贅疣、癌腫［1-2］。目前，市售薏苡仁飲片主要有薏苡仁、炒薏苡仁、麩炒薏苡仁等。除青海、寧夏、甘肅等省區(qū)未見報(bào)道外，全國各省區(qū)均有分布種植，以貴州、福建、四川、湖南、河南、河北、遼寧、云南等省為主產(chǎn)地［3］。薏苡仁具有抗腫瘤、抗炎鎮(zhèn)痛、降血糖、調(diào)血脂、增強(qiáng)免疫力和抗菌等多種藥理活性［4］。目前，其臨床主要用于治療肺癌、胃癌、肝癌等多種惡性腫瘤，以及急性咽喉炎、腸炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨膜炎等炎癥，原發(fā)性多汗、頑固性失眠等免疫力低下癥狀［5］。本研究中通過對(duì)山東省內(nèi)流通與使用環(huán)節(jié)中44個(gè)企業(yè)生產(chǎn)的51批次薏苡仁飲片進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，以全面了解山東省薏苡仁飲片的質(zhì)量現(xiàn)狀，并分析存在的問題，為薏苡仁飲片的質(zhì)量提高和監(jiān)管提供參考。

1 資料與方法

1.1 基本信息

2015年版《中國藥典（一部）》收載的薏苡仁有薏苡仁和麩炒薏苡仁2種飲片規(guī)格。共抽取樣品51批次，抽樣地域覆蓋全省17個(gè)地市（涉及經(jīng)營單位24批、醫(yī)療機(jī)構(gòu) 27批）。樣品以薏苡仁為主，共 48批次（占94.12% ）；麩炒薏苡仁 3 批次（占 5.88% ）。標(biāo)示生產(chǎn)企業(yè)44家，覆蓋7個(gè)省市自治區(qū)，其中，安徽21家，河北13家，山東5家，湖北2家，浙江、江西、甘肅各1家。

1.2 檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

薏苡仁藥材及飲片均為2015年版《中國藥典（一部）》收載品種，飲片收載于藥材項(xiàng)下。薏苡仁和麩炒薏苡仁檢驗(yàn)項(xiàng)目包括炮制方法、性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測定等。本次抽驗(yàn)樣品均執(zhí)行2015年版《中國藥典（一部）》標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 抽驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 抽驗(yàn)總體結(jié)果

共檢驗(yàn)薏苡仁飲片51批次，合格樣品50批次，合格率為98.04%，不合格樣品1批次，不合格率1.96%，不合格項(xiàng)目為黃曲霉毒素。

2.1.2 性狀

均符合規(guī)定。長4～8 mm，寬3～6 mm，長寬比例為1.2 ∶1.0 ～1.6 ∶1.0。不同批次薏苡仁大小差異較大，其原因可能為藥材生長環(huán)境差異等因素。不同批次麩炒薏苡仁表面顏色深淺有明顯差異，可能與炮制時(shí)間和溫度有關(guān)。

2.1.3 鑒別

顯微鑒別：51批次薏苡仁及麩炒薏苡仁均符合規(guī)定。樣品粉末在顯微鏡下淀粉粒均清晰可見，單粒較多，為類圓形或多面形。詳見圖1。

圖1 薏苡仁粉末顯微鑒別圖

薄層色譜鑒別：51批次薏苡仁及麩炒薏苡仁均符合規(guī)定。供試品溶液色譜中，在與薏苡仁油對(duì)照提取物溶液相應(yīng)位置上，均有明顯相同的棕褐色斑點(diǎn)。詳見圖2。

圖2 薏苡仁薄層色譜圖

液相色譜鑒別：51批次薏苡仁及麩炒薏苡仁均符合規(guī)定。供試品溶液色譜中，均呈現(xiàn)與甘油三油酸酯對(duì)照品溶液保留時(shí)間一致的色譜峰；同時(shí)，呈現(xiàn)與薏苡仁油對(duì)照提取物溶液色譜峰保留時(shí)間一致的7個(gè)主要色譜峰。詳見圖3。

2.1.4 檢查

雜質(zhì)：2015年版《中國藥典（一部）》中未對(duì)麩炒薏苡仁雜質(zhì)作出規(guī)定，48批次樣品測定結(jié)果均符合規(guī)定（≤1%）。48批次樣品雜質(zhì)測定結(jié)果為0.2% ～0.7%，37批次不高于 0.5% （占 77.08% ）。結(jié)果普遍較低，說明薏苡仁不易摻雜雜質(zhì)。詳見圖4 A。

水分：51批次樣品中水分檢查結(jié)果均符合規(guī)定。薏苡仁水分均低于15.0%，主要集中在10.0% ～12.0%；麩炒薏苡仁水分均低于12.0%，相對(duì)薏苡仁較低，主要是因?yàn)榕谥七^程使其水分含量降低。詳見圖4 B。

總灰分：51批次樣品中總灰分檢查結(jié)果均符合規(guī)定（≤2.0%）。其中薏苡仁總灰分結(jié)果相差較大，其中9批次結(jié)果為1.8% ～2.0%，接近標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定上限，占全部樣品的17.65%，分析其原因?yàn)椴墒蘸团谥七^程中因含雜質(zhì)、輔料不純凈或其他因素形成污染。詳見圖4 C。

圖3 高效液相色譜圖

黃曲霉毒素：《中國藥典》中未對(duì)麩炒薏苡仁黃曲霉毒素檢查作出規(guī)定；48批次薏苡仁中，1批次不符合規(guī)定，不合格率2.08%。不符合規(guī)定的薏苡仁（Y3）黃曲霉毒素 B1含量為 8 μg/kg，超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定（≤5 μg/kg）。詳見圖5。觀察本批次薏苡仁外觀性狀，并無霉變等明顯異常。與該批次樣品同生產(chǎn)廠家同批次的不同供樣單位的薏苡仁（Y4）含量符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。導(dǎo)致該情況的原因如下。1）不同的貯藏及運(yùn)輸條件導(dǎo)致黃曲霉毒素結(jié)果的不同，黃曲霉生長溫度范圍為6～47℃，生長適宜溫度為30～38℃，生長最低相對(duì)濕度為80% ～86%。最適產(chǎn)毒溫度為24～30℃，最適產(chǎn)毒相對(duì)濕度為85% ～90%［6］。2）2批次樣品雖為同一生產(chǎn)廠家及批號(hào)，但性狀差異較大，考慮是樣品本身內(nèi)源性因素和人為摻雜等的影響。

圖448批次薏苡仁樣品一般檢查項(xiàng)目檢查概率分布直方圖

圖548批次薏苡仁黃曲霉毒素測定結(jié)果直方圖

2.1.5 浸出物

51批次樣品浸出物檢查結(jié)果均符合規(guī)定（≥5.5%）。薏苡仁樣品浸出物測定結(jié)果為6.3% ～12.5%，不同樣品間差異較大；麩炒薏苡仁測定結(jié)果為7.7% ～10.6%。詳見圖6 A。

2.1.6 含量測定

對(duì)51批次樣品進(jìn)行了甘油三油酸酯含量的測定，其中48批次薏苡仁均符合規(guī)定（≥0.50%），結(jié)果為0.58% ～2.41%；3批次麩炒薏苡仁也均符合規(guī)定（≥0.40% ），結(jié)果分別為 0.76% ，0.89% ，0.95% 。詳見圖6 B。

圖648批次薏苡仁樣品浸出物和含量測定概率分布直方圖

2.2 綜合分析

系統(tǒng)聚類分析：采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，采用系統(tǒng)聚類分析法對(duì)48批次薏苡仁樣品中甘油三油酸酯的含量測定結(jié)果進(jìn)行分析，以評(píng)價(jià)不同廠家樣品間的差異。由圖7可見，依據(jù)所測定成分的含量被聚為兩類，樣品 Y15（河北）、Y44（安徽）、Y31（江西）聚為Ⅰ類，其余樣品聚為Ⅱ類，每類樣品又可聚為其他亞類。結(jié)果顯示，不同批次樣品含量測定結(jié)果差異明顯，Ⅰ類樣品的結(jié)果明顯高于其余批次，說明質(zhì)量較好。

相關(guān)性分析：對(duì)雜質(zhì)、水分、總灰分、浸出物和含量測定數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果見表1?？梢?，總灰分與雜質(zhì)測定結(jié)果呈低度正相關(guān)，浸出物與雜質(zhì)測定結(jié)果呈低度負(fù)相關(guān)，其他項(xiàng)目之間均無相關(guān)性，提示此5項(xiàng)之間沒有對(duì)應(yīng)關(guān)系，即無可替代性，每項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)質(zhì)量控制均有意義。

圖748批次樣品的聚類分析圖

同廠家同批號(hào)不同抽樣地點(diǎn)樣品結(jié)果分析：樣品標(biāo)示生產(chǎn)企業(yè)44家，7家生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的多批樣品被抽取。其中，3家生產(chǎn)企業(yè)出現(xiàn)被抽取到同批號(hào)樣品（A，B，C），經(jīng)檢驗(yàn)B樣品（Y3，Y4）結(jié)果差異較大，黃曲霉毒素B1和總量相差約20倍，Y3水分測定結(jié)果高于Y4，結(jié)合2批次樣品性狀差異，分析存在保存不當(dāng)和人為摻雜的可能。詳見表2。

表1 相關(guān)性分析結(jié)果

表2 同廠家同批號(hào)不同抽樣地樣品檢驗(yàn)結(jié)果

2.3 探索性研究及分析

麩炒薏苡仁現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)2015年版《中國藥典（一部）》中，對(duì)黃曲霉毒素未作規(guī)定，因此對(duì)麩炒薏苡仁黃曲霉毒素進(jìn)行探索性研究。測定方法采用2015年版《中國藥典》黃曲霉毒素測定法第二法高效液相色譜-質(zhì)譜法，黃曲霉毒素B1和黃曲霉毒素總量（黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1和黃曲霉毒素G2）測定結(jié)果見圖8。結(jié)果表明，不同批次黃曲霉毒素含量不同，其中S1黃曲霉毒素含量較高，S2含量較低?？梢婋m然采取了麩炒的炮制方法，但黃曲霉毒素的分解溫度高達(dá)237～306℃［7］，簡單的加熱不能有效降低黃曲霉毒素的含量，麩炒薏苡仁仍存在黃曲霉毒素污染嚴(yán)重的風(fēng)險(xiǎn)。

圖83批次麩炒薏苡仁黃曲霉毒素測定結(jié)果

3 討論

3.1 樣品質(zhì)量狀況總體評(píng)價(jià)

市售薏苡仁飲片的質(zhì)量總體較好，抽樣合格率為98.04%。但質(zhì)量分析和評(píng)價(jià)結(jié)果仍顯示目前薏苡仁飲片質(zhì)量存在一定問題。個(gè)別批次產(chǎn)品黃曲霉毒素超標(biāo)，部分企業(yè)不同或相同批號(hào)產(chǎn)品質(zhì)量差異較大。因此，建議生產(chǎn)企業(yè)加強(qiáng)原料來源和質(zhì)量的控制，生產(chǎn)和銷售企業(yè)加強(qiáng)對(duì)運(yùn)輸和貯存環(huán)境的監(jiān)控，相關(guān)部門應(yīng)加強(qiáng)對(duì)生產(chǎn)和流通環(huán)節(jié)的日常監(jiān)督檢查。

3.2 對(duì)該品種現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的探討

通過對(duì)薏苡仁黃曲霉毒素含量的測定，發(fā)現(xiàn)黃曲霉毒素G1和黃曲霉毒素G2在薏苡仁中并不常見，說明黃曲霉菌以薏苡仁為基質(zhì)代謝產(chǎn)物不易產(chǎn)生黃曲霉毒素G1和黃曲霉毒素G2。薏苡仁易被污染真菌，除了黃曲霉，還有亮白曲霉 A.candidus、煙曲霉［8］、黑曲霉、赭曲霉［9］等。黃曲霉毒素不能全面反映薏苡仁微生物污染情況，建議增加薏苡仁微生物限度規(guī)定，加強(qiáng)中藥飲片微生物污染控制。

根據(jù)探索性研究發(fā)現(xiàn)，麩炒的炮制方法不能有效降低黃曲霉毒素含量，現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中并未對(duì)麩炒薏苡仁黃曲霉毒素設(shè)定限度標(biāo)準(zhǔn)，建議增加黃曲霉毒素和麩炒薏苡仁微生物限度標(biāo)準(zhǔn)。