一款膠原蛋白復(fù)合粉改善皮膚水分人體試食實(shí)驗(yàn)研究

□ 周致瑩 喬小青 張旭光

湯臣倍健股份有限公司，廣州，510000

1 引言

膠原蛋白（collagen）是一種非水溶性纖維狀的含糖蛋白質(zhì)，來(lái)自于脊椎動(dòng)物的結(jié)締組織。膠原蛋白不僅是脊椎動(dòng)物細(xì)胞外間質(zhì)的重要成分，而且是其體內(nèi)含量最為豐富的蛋白質(zhì)。在人體內(nèi)，膠原蛋白對(duì)皮膚具有保水、保濕以及保持彈性等重要作用[1]。另外有研究表明，口服膠原蛋白對(duì)真皮和表皮均具有改善作用，因其吸收利用率好，易于擴(kuò)散到皮膚的深層和表層，從而使角質(zhì)層水分得以提高，達(dá)到表皮細(xì)胞活性提高、皮膚膚質(zhì)提升的作用[2]。本款膠原蛋白復(fù)合粉除膠原蛋白外，還含有具有保濕作用的庫(kù)拉索蘆薈凝膠凍干粉（Aloe vera gel freeze-dried powder）和透明質(zhì)酸鈉（Sodium hyaluronate）。本研究將幾款具有補(bǔ)水保濕作用的原料制成粉劑產(chǎn)品，按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》的方法進(jìn)行功能學(xué)評(píng)價(jià)，對(duì)人體進(jìn)行改善皮膚水份功能實(shí)驗(yàn)研究，為開(kāi)發(fā)同類(lèi)型的膠原蛋白保健食品提供實(shí)驗(yàn)支持。

2 材料和方法

2.1 受試物

膠原蛋白復(fù)合粉，粉劑，淡黃色粉末，本品的主要成分及含量為膠原蛋白（66.7%）、庫(kù)拉索蘆薈凝膠凍干粉（0.8%）、透明質(zhì)酸鈉（0.6%）。核準(zhǔn)凈含量：4.5g/袋，人體推薦量為每日1次，每次1袋，服用量為4.5g/日。安慰劑除功效成分外，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試物一致。

2.2 受試對(duì)象

按自愿原則選擇30-50歲，皮膚水分≤12的受試者

2.2.1 診斷標(biāo)準(zhǔn)

前額眉間皮膚水分≤12，無(wú)炎癥、痛癢等癥狀。

2.2.2 納入者標(biāo)準(zhǔn)

凡前額眉間皮膚水分≤12的自愿受試者，經(jīng)體檢合格均可進(jìn)行試食觀察。

2.2.3 排除者標(biāo)準(zhǔn)

2.2.3.1 年齡在30歲以下或者50歲以上者，妊娠或者哺乳期婦女，對(duì)本保健品過(guò)敏者。

2.2.3.2 合并有心肝腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病，精神疾病患者。

2.2.3.3 不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定用受試物，無(wú)法判定功效或資料不全影響功效或安全性判斷者。

2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組

采用自身前后對(duì)照和組間對(duì)照兩種形式。104名受試者隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組，試食組服用受試物，對(duì)照組服用安慰劑。

2.4 服用劑量和時(shí)間

每日1次，每次1袋，服用限量為4.5g/日，連續(xù)30天，受試者在試食期間停止服用有關(guān)改善皮膚水分的藥物或者其他保健品及化妝品，不改變?cè)瓉?lái)的飲食習(xí)慣，正常飲食。

2.5 儀器與試劑

CA-500型血球計(jì)數(shù)儀（日本產(chǎn)），BM-200尿十項(xiàng)分析儀（美國(guó)產(chǎn)），日立7100全自動(dòng)生化分析儀（日本產(chǎn)），Skin Analyzer SHP88儀（德國(guó)產(chǎn)），生化試劑盒全部由中生公司提供。

2.6 觀察指標(biāo)

以下觀察指標(biāo)實(shí)驗(yàn)前后各檢查一次。

2.6.1 功效性觀察

2.6.1.1 一般情況

詳細(xì)詢(xún)問(wèn)病史，了解受試者飲食情況，觀察精神狀況、睡眠、飲食、大小便、血壓等主要臨床癥狀。觀察受試物對(duì)受試者是否有不良影響。

2.6.1.2 皮膚水分檢測(cè)

2.6.1.2.1 測(cè)定環(huán)境：在寬敞、通風(fēng)條件良好，溫度、濕度適中的空間環(huán)境穩(wěn)定的檢查室中進(jìn)行。

2.6.1.2.2前額眉間皮膚水份測(cè)定

在安靜狀態(tài)下，用潔凈棉球蘸蒸餾水清潔眉間被測(cè)部位，擦干后15分鐘進(jìn)行水分的測(cè)定，試食前后測(cè)定工作由同一臺(tái)儀器、同一人操作完成。

2.6.2 安全性觀察

2.6.2.1 血液、尿常規(guī)及便常規(guī)檢查

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，血紅蛋白，白細(xì)胞計(jì)數(shù)，尿十項(xiàng)，便常規(guī)檢測(cè)。

2.6.2.2 生化指標(biāo)測(cè)定

血清白蛋白ALB，總蛋白TP，肝腎功能（總膽紅素TBIL，谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT，尿素氮BUN，肌酐CRE），血糖GLU、血脂（總膽固醇TC，甘油三酯TG）。

2.6.2.3 腹部B超，心電圖，X線(xiàn)胸部透視。（在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)檢查一次）

2.7 改善皮膚水分功效判定

有效：水分得到改善，并經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)有顯著性差異。

無(wú)效：水分沒(méi)有得到明顯的改善。

2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為劑量資料，用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。凡自身對(duì)照資料可以采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需要進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿(mǎn)足正態(tài)方差后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。

有效率采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)。四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改為確切概率法。

3 結(jié)果與分析

3.1 一般狀況

受試者104人，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，共100例有效，均為女性。試食組50例，年齡最小35歲，最大50歲，平均年齡（45.10±4.85）歲；對(duì)照組50例，年齡最小31歲，最大50歲，平均年齡（44.34±5.15）歲。

3.2 受試物對(duì)皮膚水分變化的影響

?

3.3 功效判斷

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由表1、2可見(jiàn)，試食組試食前后皮膚水分增加有顯著性差異（P＜0.001），總有效率為84.00%顯著高于對(duì)照組（P＜0.001）；實(shí)驗(yàn)后試食組皮膚水分增加2.70±2.21，而對(duì)照組無(wú)明顯變化，兩組比較（P＜0.001）。試食組試食后與對(duì)照組相比，皮膚水分有顯著性差異（P＜0.001）。

3.4 一般情況

?

3.5 血常規(guī)和血生化變化

?

由表4可見(jiàn)，試食前后試食組和對(duì)照組各項(xiàng)血生化和血常規(guī)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。

3.6 血壓、心率、尿和便常規(guī)變化

?

由表5可見(jiàn)，試食前后試食組和對(duì)照組血壓、心率、尿和便常規(guī)指標(biāo)均在正常范圍。

3.7 腹部B超，心電圖，X線(xiàn)胸部透視試食前后試食組和對(duì)照組均在正常范圍內(nèi)。

3.8 受試者脫失率

納入受試者104例，試食組52例、對(duì)照組52例。其中試食組試食結(jié)束時(shí)有2例未在規(guī)定時(shí)間按時(shí)接受復(fù)查；對(duì)照組有2例未在規(guī)定時(shí)間內(nèi)按時(shí)接受復(fù)查。試食組與對(duì)照組各有2例符合受試者排除標(biāo)準(zhǔn)，有效受試者每組50例，受試者脫失率均為3.85%。

3.9 不良反應(yīng)觀察

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未見(jiàn)過(guò)敏及其他不良反應(yīng)。

3.10 結(jié)論

采用自身與組件對(duì)照兩種對(duì)照設(shè)計(jì)，納入病例104例，隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組。有效受試者100例，試食組、對(duì)照組各50例。試食組按要求服用該膠原蛋白復(fù)合粉30天后，皮膚水分平均增加2.70±2.21，與對(duì)照組比較有顯著差異（P＜0.001），其中42例皮膚水分增加，有效率為84.00%；對(duì)照組為安慰劑組，30天后復(fù)查時(shí)有20例皮膚水分增加，有效率為40.00%。試食組有效率高于對(duì)照組（P＜0.001）。服用該膠原蛋白復(fù)合粉前后，試食組自身比較及與對(duì)照組比較，皮膚水份均顯著性增加（P＜0.001）。因此，可以認(rèn)定，該膠原蛋白復(fù)合粉具有改善皮膚水分的作用。

試食者胸透、腹部B超、心電圖均基本在正常范圍內(nèi)。試食該膠原蛋白復(fù)合粉前后，血常規(guī)、尿常規(guī)、便常規(guī)及血生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，說(shuō)明該膠原蛋白復(fù)合粉對(duì)受試者健康無(wú)不良影響。此外，試食該膠原蛋白復(fù)合粉后，未見(jiàn)過(guò)敏及其他不良反應(yīng)。

4 討論

本研究采用的方法為將受試者隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組兩組，分別使用膠原蛋白復(fù)合粉和安慰劑，安慰劑除功效成分外，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試產(chǎn)品一致。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：食用膠原蛋白復(fù)合粉后受試者皮膚水分得到了顯著的改善，同時(shí)血常規(guī)、血生化等各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果也均未見(jiàn)異常。試食組在試食膠原蛋白復(fù)合粉之后皮膚水分得到了明顯的提高，并與試食前皮膚水分具有顯著性差異，同時(shí)也與對(duì)照組皮膚水分改善情況比較后也具有顯著性差異，說(shuō)明該種膠原蛋白復(fù)合粉不僅能夠改善皮膚水分，而且對(duì)人體沒(méi)有任何的不良影響。

皮膚老化是人體衰老的外在表現(xiàn)，是內(nèi)源性和外源性因素等綜合作用的結(jié)果。膠原蛋白因其獨(dú)特的皮膚修復(fù)能力，且具有較大的親和力、良好的生物相容性，已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域[3]。由于膠原蛋白分子含有許多的親水取代基，因此，具有很強(qiáng)的保濕能力，具體體現(xiàn)在提高組織細(xì)胞的貯水能力、使皮膚潤(rùn)澤保濕[4]。大量的實(shí)驗(yàn)研究表明，試食膠原蛋白能起到改善皮膚水分的作用。馬慧軍[5]應(yīng)用膠原蛋白凝膠對(duì)各類(lèi)淺Ⅱ度以下燒傷創(chuàng)面進(jìn)行護(hù)理，發(fā)現(xiàn)膠原蛋白凝膠組在色素沉著發(fā)生率及疼痛緩解時(shí)間上均有明顯下降。周雙琳[6]通過(guò)人體試食實(shí)驗(yàn)，口服小分子魚(yú)膠原蛋白粉，發(fā)現(xiàn)可在一定程度地改善女性面部膚質(zhì)，且無(wú)明顯不良反應(yīng)，具有較好的安全性和有效性。余宙[7]等使用魚(yú)膠原蛋白粉進(jìn)行了人體試食的安全性與功能性研究，發(fā)現(xiàn)試食組食用前后，自身對(duì)照皮膚水分有顯著差異（P＜0.05），具有顯著的改善皮膚水分作用。

作為該款膠原蛋白復(fù)合粉其他兩種成分亦有保濕作用，有研究表明庫(kù)拉索蘆薈提取液可以很好的降低皮膚失水率和提高皮膚的含水量[8]。萬(wàn)克英等[9]通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)，表明蘆薈凝膠中的多糖成分能促進(jìn)皮膚組織中纖維連接蛋白增加，有助于皮膚水分的改善。透明質(zhì)酸由于具有很強(qiáng)的吸水性而有保濕作用，其保濕效果與甘油相比效果更好，能夠使用皮膚在不同季節(jié)環(huán)境下保濕的需求[10]。