杧果葉素膠囊的制備工藝研究

王舒暢　楊兆祥　廖榮

【摘?要】??目的：篩選杧果葉素膠囊劑制備工藝方法。方法：以芒果苷含量、溶出度、得率、含水量等為指標(biāo)，進(jìn)行制備工藝選擇、粉碎制粒干燥制劑工藝關(guān)鍵參數(shù)考察。結(jié)果：選擇濕法制粒制備工藝;粉碎工藝參數(shù)振動進(jìn)料壓力0.2MPa，進(jìn)料壓力0.5MPa，粉碎壓力0.4MPa;制粒工藝攪拌速度為700r/min、切碎速度為1000r/min、制粒時間5min;采用流化床干燥或電熱鼓風(fēng)箱干燥均可。結(jié)論：該制備工藝簡單、可行、穩(wěn)定。

【關(guān)鍵詞】?杧果葉素;膠囊;制劑工藝

【中圖分類號】R284???【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A????【文章編號】1007-8517（2019）11-0018-04

Study on the preparation technology of capsule with extraction from Mango leaf

WANG Shuchang1，2?YANG Zhaoxiang2*?LIAO Rong2

1.Dali University，Dali 671000，China;2.KPC pharmaceutical，Inc，Kunming 650100，China

Abstract： Objective To screen method for preparing capsule with extraction from Mango leaf.Methods Taking mangiferin content， dissolution rate， yield and water content as indicators， the key parameters of the process of filling material selection and pulverization and granulation drying preparation were investigated.Results The material was granulated by wet granulation; the vibration feed pressure of the pulverization process parameters was 0.2 MPa， the feed pressure was 0.5 MPa， the pulverization pressure was 0.4 MPa， and the granulation process with the stirring speed was 700 r/min. The breaking speed was 1000 r/min， and the granulation time was 5 min; it can be dried by fluidized-bed bioreactor or electric blast box.Conclusion The preparation process is simple， feasible and stable.

Keywords：Extraction from Mango leaf;Capsule;Preparation process

杧果（Mangifera indica L.）為漆樹科杧果屬熱帶常綠大喬木，種植區(qū)域主要分布在海南、廣西、廣東、云南、四川和福建等地[1]。杧果葉含有酚酸類、黃酮類、萜類、甾體皂苷類、揮發(fā)油類等。黃酮類如芒果苷、槲皮素、金絲桃苷等。杧果葉在傣醫(yī)臨床應(yīng)用已有悠久歷史，主要用于痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎等。杧果葉中主要活性成分為芒果苷[2]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明芒果苷對高尿酸血癥導(dǎo)致的痛風(fēng)有明顯療效[3-5]。

本實驗在前期實驗研究確定的杧果葉素（杧果葉提取物）制劑處方基礎(chǔ)上，擬將其研制成治療痛風(fēng)臨床新藥。以芒果苷溶出度、顆粒得率、含水量等為指標(biāo)，進(jìn)行制劑工藝關(guān)鍵參數(shù)研究，為杧果葉素制劑成型提供簡單、可行、穩(wěn)定的制備方法。

1?儀器與材料

1.1?儀器?JA51001電子天平（上海精密儀器廠），XSE205DU電子天平（瑞士梅特勒-托利多公司），MQP01實驗室型超微氣流粉碎機(jī)（青島德瑞特粉體技術(shù)設(shè)備有限公司），HLSHZ-6A高效濕法混合制粒機(jī)（北京航空制造工程研究院），702-4電熱鼓風(fēng)箱（大連實驗設(shè)備廠），WBF-2多功能流化床（重慶英格造粒包衣技術(shù)公司），MA35水分測定儀（德國賽多利斯公司），BT-1001智能粉體特性測定儀（丹東百特儀器有限公司）;PT WS1210智能溶出儀（德國PHARMATEST公司），UV-2450紫外可見光分光光度計（日本島津公司）。

1.2?材料?芒果苷對照品（批號：111607-200402，中國食品藥品檢定院），杧果葉素（批號：170301，昆藥集團(tuán)自制），糊精（批號：160706，安徽山河藥用輔料股份有限公司），羧甲基淀粉鈉（批號：161110，安徽山河藥用輔料有限公司），硬脂酸鎂（批號：160317，安徽山河藥用輔料股份有限公司），其它所用試劑均為分析純。

1.3?處方?杧果葉素110g，羧甲基淀粉鈉19g，糊精 60g，硬脂酸鎂1g ，50%乙醇適量，制成硬膠囊1000粒。

2?方法與結(jié)果

2.1?溶出度方法的建立?依據(jù)《普通口服固體制劑溶出度試驗技術(shù)指導(dǎo)原則》，選擇籃法，溶出介質(zhì)為900mL pH6.8的磷酸鹽緩沖溶液，轉(zhuǎn)速為100 r/min。

2.2?含量檢測方法的建立?參照紫外-可見分光光度法（2015年版《中國藥典》四部通則0401）與參考文獻(xiàn)[6]，建立紫外-可見分光光度法測定杧果葉素膠囊中芒果苷的方法。

2.2.1?對照品溶液的制備?取芒果苷對照品適量，精密稱定，加pH6.8的磷酸鹽緩沖液制成每1mL中含0.1mg的溶液，即得。

2.2.2?供試品溶液的制備?稱取提取物適量，精密稱定，加pH6.8的磷酸鹽緩沖液，超聲30min，制成每1mL中含0.1mg的溶液，搖勻，即得。

2.2.3?檢測波長的確定?取對照品及供試品溶液，在200～900nm進(jìn)行全波長掃描，確定紫外最大吸收波長為258nm。

2.2.4?樣品酸濃度的考察?因為活性成分芒果苷顯弱酸性，在酸性條件下不易電離。所以加入少量酸抑制其電離。取配制好的對照品溶液0.5mL，共18份，置5mL量瓶中，加pH6.8磷酸鹽緩沖液至刻度，分別加入0、10、20、40、60、80μL 10%鹽酸，搖勻，即得。在258nm處測定吸光度（A）。由表1可知，隨著酸用量增加其吸光度增加，當(dāng)加入60μL時樣品吸光度基本保持不變，因此，溶出時考慮樣品中加入60μL 10%鹽酸。

2.3?方法學(xué)考察

2.3.1?線性考察?取對照品溶液0.1、0.2、0.6、0.8、1.0、1.2mL，分別置于5mL容量瓶，加pH6.8緩沖液稀釋至刻度，加入60μL 10%鹽酸，搖勻。以pH6.8緩沖液（加入等量10%鹽酸）作為空白，在258nm處測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程：Y=56.02X+0.199（R2=0.9997）。表明樣品在0.002～0.024mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.3.2?精密度試驗?取對照品溶液0.5mL，置于5mL容量瓶，加pH6.8緩沖液稀釋至刻度，加60μL 10%鹽酸搖勻。在258nm下測定吸光度，連續(xù)測定6次。6次測定的RSD為0.18%，表明儀器精密度良好。

2.3.3?重復(fù)性試驗?取供試品溶液1mL，置于5mL容量瓶，加pH6.8緩沖液稀釋至刻度，加60μL 10%鹽酸，搖勻。平行制備6份，測定吸光度，計算含量，測得含量RSD為1.09%，表明方法重復(fù)性良好。

2.3.4?穩(wěn)定性試驗?取供試品溶液0.5mL，置于5mL容量瓶，加pH6.8緩沖液稀釋至刻度，加60μL 10%鹽酸，搖勻。分別在于0、30、60、120、180、240min測定吸光度。6次測定吸光度的RSD為0.54%，說明供試品溶液在pH 6.8緩沖液240min內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.5?加樣回收率試驗?取杧果葉素樣品6份，置100mL量瓶中，分別加入芒果苷對照品溶液20mL，加pH 6.8緩沖液按樣品制備方法超聲溶解后定容至刻度，備用。取上述溶液各0.5mL，置于5mL容量瓶中，加pH6.8緩沖液稀釋至刻度，加60μL 10%鹽酸，搖勻，即得。分別測定吸光度，計算回收率。平均回收率為99.07%，RSD為0.96%，說明該方法回收率良好。

2.4?制備工藝選擇?硬膠囊目前常用的制備方式有粉末直接混合填充和濕法制粒填充等。杧果葉提取物水溶性差，流動性差，粉末直接混合填充裝量差異大，含量均勻度差。因此選擇濕法制粒填充。

2.5?粉碎工藝考察?根據(jù)現(xiàn)有設(shè)備和后續(xù)工業(yè)化生產(chǎn)可行性，采用氣流式粉碎機(jī)對杧果葉素進(jìn)行粉碎。根據(jù)氣流式粉碎機(jī)的影響因素，對振動進(jìn)料壓力、進(jìn)料壓力與粉碎壓力的參數(shù)進(jìn)行考察，研究不同條件對杧果葉提取物得率和粒徑大小的影響，由表2可知，杧果葉素粉碎前D90約為103μm，經(jīng)氣流式粉碎后其粒徑D90約為5μm，說明杧果葉素容易粉碎。當(dāng)工藝參數(shù)振動進(jìn)料壓力為0.2MPa，進(jìn)料壓力為0.5MPa，粉碎壓力為0.4MPa時粉碎粒徑滿足要求且得率最高。

2.3?制粒工藝參數(shù)研究?根據(jù)制備工藝選擇高速剪切濕法制粒的方式進(jìn)行制粒，因此主要對高剪切制粒影響因素進(jìn)行考察。按處方比例稱取杧果葉提取物、糊精和羧甲基淀粉鈉，總重189g，共3份，置于濕法制粒機(jī)，混合均勻（混合3min），以50%乙醇為粘合劑（加量為100g），考察不同攪拌速度、切碎速度、制粒時間對制粒的影響，置烘箱干燥（60℃），控制顆粒水分小于9%，整粒（20目篩網(wǎng)）。取部分顆粒加入適量硬酯酸鎂，混勻，裝入2號膠囊中，測定藥物的溶出。從表3和圖1可知，加入同樣量的粘合劑，不同的攪拌速度、切碎速度以及制粒時間對顆粒得率沒有顯著性影響。但是對顆粒松散程度有影響，顆粒松散程度影響了藥物的溶出。為了確保藥物的溶出效果，確定制粒工藝為攪拌速度700r/min、切碎速度1000r/min、制粒時間5min。

2.4?干燥工藝考察?藥物的含水量對產(chǎn)品的穩(wěn)定性會產(chǎn)生一定影響，所以對顆粒干燥方式進(jìn)行考察。按處方比例稱取杧果葉提取物、糊精和羧甲基淀粉鈉，總重378g，置濕法制粒機(jī)中，混合均勻（混合3min），加入200g 50%乙醇為粘合劑，設(shè)定上述制粒工藝參數(shù)，濕顆粒分成兩份，分別采用不同干燥方式，控制顆粒水分小于9%，整粒（20目篩網(wǎng)）。取部分顆粒加入適量硬酯酸鎂，混勻，裝入2號膠囊中，測定藥物的溶出。由表4可知不同干燥方式均可以使顆粒含水量控制在5%左右，且不同干燥方式對藥物的溶出不會產(chǎn)生較大的影響。

綜上所述，制備工藝如下：按處方比例稱取杧果葉提取物、糊精和羧甲基淀粉鈉，置濕法制粒機(jī)中，混合均勻（混合3min），加入50%乙醇，設(shè)定制粒工藝參數(shù)（攪拌速度為700r/min、切碎速度1000為r/min、制粒時間5min），干燥，控制顆粒水分在5%左右，整粒（20目篩網(wǎng)），取顆粒加入適量硬酯酸鎂，混勻，裝入膠囊，即得。

2.5?制備工藝驗證?按上述確定的工藝參數(shù)按表5進(jìn)行3批小試，從表5可知不同小試批量工藝較穩(wěn)定。

3?討論

目前，杧果葉有效部位及其制劑并未在國內(nèi)上市，實驗對杧果葉提取物膠囊劑的制備工藝進(jìn)行研究，通過對物制備工藝、粉碎工藝、制粒工藝及干燥工藝的考察，選定最佳制備工藝并使其滿足《中國藥典》膠囊劑要求，為以后杧果葉提取物膠囊劑的進(jìn)一步研究及工業(yè)化生產(chǎn)提供了有力的實驗依據(jù)。

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