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    GRP78、CHOP和 Beclin-1與持續(xù)性房顫患者左心耳的關(guān)系

    2019-09-27 01:24:16劉金鵬張二偉張格慶白夢媛
    中國實驗診斷學(xué) 2019年9期
    關(guān)鍵詞:心耳內(nèi)質(zhì)網(wǎng)心房

    劉金鵬,張二偉,張格慶,白夢媛,費 瑜

    (吉林大學(xué)第二醫(yī)院 心內(nèi)科,吉林 長春130041)

    左心耳(LAA)是從左心房起始的指狀延伸,具有緩解心房壓力和分泌心房肽等作用[1,2]。有研究顯示,復(fù)雜的LAA結(jié)構(gòu)和功能與持續(xù)性房顫(PeAF)病理過程有關(guān)[3-6],但也有不同的報道[7],為此,本文對PeAF患者LAA結(jié)構(gòu)功能進(jìn)行檢測,并探討GRP78、 CHOP和 Beclin-1與LAA結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1 研究對象

    依據(jù)《心房顫動:目前的認(rèn)識和治療的建議-2018》[8]和《赫爾辛基宣言》,選擇2017年1月-2018年4月我院行食道超聲心動圖(TEE)的陣發(fā)性AF(PAF)和PeAF患者,前者27例,男15例,女12例,年齡63.56±11.29歲,后者18例,男12例,女6例,年齡69.72±10.59歲。兩組患者經(jīng)詢問病史、體格檢查、有關(guān)實驗室、常規(guī)心電圖及心臟超聲等檢查后比較一般資料,結(jié)果具有可比性。惡性腫瘤,內(nèi)分泌性及自身免疫性疾病,嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全,感染性疾病,肺纖維化,急性心梗,心肌病,風(fēng)心病,嚴(yán)重高血壓未控制(血壓≥160/100 mmHg),近期(1個月內(nèi))重大手術(shù)史等均排除本研究范圍之外。

    1.2 實驗方法

    用彩色多普勒超聲儀(Philips iE33,荷蘭)在LAA的長軸切面測量如下指標(biāo)。

    1.2.1LAA的形態(tài)結(jié)構(gòu) 在LAA最大舒張狀態(tài)時:①測量左心房與 LAA壁交界點至LAA與左上肺靜脈交界點的距離,即LAA開口的寬度(LAAW);②測量LAAW中點至LAA頸部的距離,即LAA長度(LAAL)。

    1.2.2LAA的功能 將取樣線與LAA長軸角度調(diào)到最小,在AF節(jié)律下使用脈沖多普勒:①測量LAA血流頻譜中的最大正向流速,即LAA排空速度(LAA-EV);②測量LAA血流頻譜中的最大負(fù)向流速,即LAA充盈速度(LAA-FV)。

    1.2.3采集所有患者肘靜脈血,將5 ml的血液以3 000 r/min 離心,10 min后收取上清,-80℃保存待測。葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)、CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白(CHOP)和 Beclin-1 的水平采用ELISA檢測。試劑盒購于塔爾德生物技術(shù)有限公司。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

    2 結(jié)果

    2.1 PeAF患者血漿GRP78、 CHOP和Beclin-1水平與左心耳結(jié)構(gòu)功能的變化

    與PAF組比較,PeAF組血漿 GRP78、CHOP 和 Beclin-1 的水平以及LAAW、LAAL均明顯升高,而LAA-EV、LAA-FV均明顯降低(P<0.05)(見表1)。

    表1 PeAF患者血漿GRP78、CHOP和Beclin-1水平與左心耳結(jié)構(gòu)功能的變化

    *P<0.05,與 PAF組相比

    2.2 相關(guān)分析

    LAAW和LAAL分別與血漿GRP78、CHOP和Beclin-1水平呈明顯正相關(guān)(r=0.571,r=0.592;r=0.498,r=0.439;r=0.419,r=0.500,均P<0.05);LAA-EV和LAA-FV分別與血漿GRP78、CHOP和Beclin-1水平呈明顯負(fù)相關(guān)(r=-0.599,r=-0.480;r=-0.421,r=-0.438;r=-0.487,r=-0.526,均P<0.05)。

    3 討論

    近年研究發(fā)現(xiàn),LAA口部主要是由富含彈性纖維的膠原層組成,其內(nèi)有少量散雜的心肌細(xì)胞,但沒有血管成分。它是多條優(yōu)勢傳導(dǎo)通路如Bachmann束、Marshal韌帶等交匯處,成為潛在的折返性心律失常的關(guān)鍵傳導(dǎo)區(qū),因此它是房性心律失常產(chǎn)生和維持的重要部位[9]。有研究發(fā)現(xiàn) PeAF患者LAAW明顯大于PAF患者,舒張期 LAA-EV明顯小于非PeAF患者[3,4]。還有研究發(fā)現(xiàn),隨著AF病程的延長,心房與心室也會發(fā)生相應(yīng)變化,如左心房內(nèi)徑、左心室內(nèi)徑、 LAAW、 LAAL增大,左心室射血分?jǐn)?shù)、LAA-EF、LAA-EV、LAA-FV降低等[5]。本研究結(jié)果與文獻(xiàn)報道大致相符,進(jìn)一步證明PeAF患者存在LAA結(jié)構(gòu)和功能異常。

    以往的研究顯示AF心房肌組織和心耳組織中有GRP78、CHOP、 GRP94和Beclin-1表達(dá),它們與心房內(nèi)徑增大呈正相關(guān)[10-12],但近年來有關(guān)PeAF與LAA形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系越來越受到人們重視。Kishima H回顧性研究了225名患者(PeAF76例,PAF70例,對照組79例),并用超聲心動圖和計算機(jī)斷層掃描研究LAA形態(tài)與其重塑的關(guān)系,結(jié)果發(fā)現(xiàn)PeAF的發(fā)生與非雞翼型LAA的高發(fā)病率相關(guān),它的重塑可導(dǎo)致LAA形態(tài)學(xué)改變[13]。本研究發(fā)現(xiàn)PeAF患者血漿 GRP78、CHOP 和 Beclin-1的水平升高,且與LAAW、LAAL、LAA-EV和LAA-FV密切相關(guān),提示GRP78、CHOP 和 Beclin-1影響了PeAF 患者LAA結(jié)構(gòu)和功能。GRP78和CHOP是一種與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上啟動未折疊蛋白反應(yīng)跨膜蛋白相結(jié)合的結(jié)合蛋白,在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激時,它們與跨膜蛋白分離,并啟動未折疊蛋白反應(yīng),同時激活一系列細(xì)胞凋亡信號途徑,導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,因而它是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的標(biāo)志性蛋白。Beclin-1是細(xì)胞發(fā)生自噬的一種關(guān)鍵蛋白,作為一種調(diào)控自噬和凋亡之間平衡的重要連接分子,它的升高不僅預(yù)示細(xì)胞發(fā)生自噬,而且預(yù)示著細(xì)胞凋亡發(fā)生。PeAF患者發(fā)生的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在引起心房細(xì)胞凋亡的同時,可誘導(dǎo)細(xì)胞自噬,這種自噬是一種適應(yīng)性反應(yīng),對維持基本的細(xì)胞代謝中起著重要作用,當(dāng)嚴(yán)重的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激不能被自噬所逆轉(zhuǎn),過度自噬將再一次啟動細(xì)胞凋亡途徑,加重心房細(xì)胞凋亡,這種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬相互影響相互作用,改變了PeAF患者LAA 結(jié)構(gòu),并影響了它的功能,而功能改變可促進(jìn)結(jié)構(gòu)重構(gòu),結(jié)果導(dǎo)致PeAF的發(fā)生和持續(xù)。

    引起PeAF患者內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬變化的確切因素還不十分清楚,結(jié)合文獻(xiàn)我們推測可能是與下列因素有關(guān):①LAA解剖特點和血流動力學(xué)引起LAA壓力過高,當(dāng)LAA入口明顯增寬,并呈球形或半球形改變不能緩解壓力時,過高的壓力迫使心房細(xì)胞能量代謝障礙和鈣超載,它們可以引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[14],進(jìn)而誘發(fā)自噬。②過高壓力可刺激LAA壓力感受器,促進(jìn)神經(jīng)內(nèi)分泌物質(zhì)釋放,如利鈉肽,腎素血管緊張素系統(tǒng)等,它們可引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[6,11,15],進(jìn)而誘發(fā)自噬。③LAA壓力過高可使機(jī)體發(fā)生氧化應(yīng)激[16]和炎癥反應(yīng),進(jìn)而激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,造成LAA組織損傷,同時誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生自噬。

    綜上所述,本研究進(jìn)一步證明了LAA結(jié)構(gòu)功能異常與PeAF有關(guān),發(fā)現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬是LAA結(jié)構(gòu)功能改變的原因之一。但本研究還存在收集的病例數(shù)較少以及未對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和自噬導(dǎo)致PeAF患者LAA結(jié)構(gòu)功能改變的具體信號通路進(jìn)行研究的不足。因此,相關(guān)內(nèi)容有待于進(jìn)一步深入研究。

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