基因靶向治療在禽流感病毒領(lǐng)域的應(yīng)用探析

鄒丹丹

摘要? ? 為分析探究基因靶向治療在禽流感病毒領(lǐng)域的應(yīng)用效果，結(jié)合現(xiàn)階段基因靶向技術(shù)應(yīng)用的基本原則，對其在禽流感病毒領(lǐng)域的應(yīng)用研究進(jìn)展展開分析，對禽流感治療干預(yù)措施提出相應(yīng)的建議。綜合分析來看，基因靶向治療技術(shù)的出現(xiàn)在很大程度上使人們在基因功能方面的研究得以進(jìn)一步深入，同時基因靶向治療技術(shù)在禽流感病毒領(lǐng)域中的廣泛應(yīng)用，為尋找新的治療禽流感疾病的靶點(diǎn)提供了強(qiáng)有力的支持?；虬邢蛑委熢谇萘鞲胁《绢I(lǐng)域的應(yīng)用效果顯著，為禽流感疾病的治療提供了新思路。

關(guān)鍵詞? ? 基因靶向;禽流感病毒;基因功能;治療方案

中圖分類號? ? S858.3? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼? ? A

文章編號? ?1007-5739（2019）15-0222-02

禽流感屬于甲型流感病毒中較為常見的一種，一般多發(fā)于禽類動物中，少部分甲型流感病毒也會感染到豬、馬以及人類等哺乳動物。禽流感的高發(fā)季節(jié)主要為春季和冬季，通常情況下人與人之間不會發(fā)生感染，但是一旦發(fā)生感染，原本低致病性的禽流感病株會在短時間內(nèi)快速發(fā)展變異成為高致病性毒株，直接威脅感染患者的生命健康。對此，為了最大程度地確保禽流感病毒的防治效果，相關(guān)學(xué)者提出了基因靶向治療方案。

1? ? 禽流感病毒領(lǐng)域中基因靶向治療應(yīng)用研究進(jìn)展

從現(xiàn)階段基因靶向技術(shù)在禽流感病毒領(lǐng)域中的應(yīng)用情況來看，復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)分子病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室針對基因靶向技術(shù)及其在禽流感病毒領(lǐng)域中的應(yīng)用效果這一問題作出了深入研究，并在H7N9禽流感藥物研發(fā)方面獲得了至關(guān)重要的研究進(jìn)展。通過多名研究人員的共同努力，研究結(jié)果顯示可靶向H7N9禽流感病毒新表位的高活性抗病毒全人源抗體m826。這一研究成果最終以《一種靶向H7N9流感血凝素pH敏感表位的強(qiáng)效全人源胚系單克隆抗體》公開發(fā)表。研究人員認(rèn)為，m826抗體主要是通過從超大型天然全人源抗體庫中層層篩選而獲取。m826抗體的作用機(jī)制有一定的獨(dú)特性，即當(dāng)抗體與禽流感病毒不直接中和的情況下，可以通過誘發(fā)ADCC活性，招募天然殺傷細(xì)胞等免疫細(xì)胞，進(jìn)而完成對禽流感病毒或者其他被病毒感染細(xì)胞的消除任務(wù)[1]。此外，深層次的動物試驗(yàn)結(jié)果顯示，m826抗體在多種病毒防治中的應(yīng)用效果顯著，同時在保護(hù)試驗(yàn)對象不被高劑量禽流感病毒感染方面起到重要的作用，因而可以判定該抗體具有較強(qiáng)的體內(nèi)抗病毒活性。

此外，關(guān)于m826抗體在人類禽流感疾病防治中的應(yīng)用效果研究結(jié)果顯示，m826抗體作為一種天然的“胚系”抗體，尚未經(jīng)過任何體細(xì)胞突變。同時，研究人員在H7N9感染康復(fù)后的患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了類似m826抗體的抗體序列，這一抗體序列在健康人體以及新生兒體內(nèi)均存在類似的抗體[2]。這次研究結(jié)果在很大程度上為新發(fā)禽流感傳染病的疫苗以及相關(guān)防治藥物的研發(fā)提供了重要依據(jù)與啟示。H7N9禽流感藥物研發(fā)課題組的一名重要成員表示，通過建立完善的全人源抗體快速研發(fā)平臺，可針對多類類似禽流感病毒靶點(diǎn)制備相應(yīng)的高活性全人源抗體，憑借這些抗體自身的安全性高以及成藥性優(yōu)等特征優(yōu)勢制作出應(yīng)對禽流感病毒等新發(fā)突發(fā)傳染病的重要防治藥物。

2? ? 基因靶向治療方案分析

基因靶向技術(shù)在禽流感病毒領(lǐng)域中的應(yīng)用主要依靠同源重組這一方式，通過促使生物體內(nèi)特定內(nèi)源基因發(fā)生改變的方式，從而達(dá)到預(yù)期的治療干預(yù)效果，是現(xiàn)階段應(yīng)用較廣泛的一類遺傳學(xué)技術(shù)手段。通常情況下，對于基因靶向技術(shù)的應(yīng)用可以通過刪除生物體內(nèi)特定基因或者消除外顯子，誘導(dǎo)導(dǎo)入點(diǎn)發(fā)生突變，實(shí)現(xiàn)對特定基因功能的深入研究。綜合分析來看，基因靶向技術(shù)在禽流感病毒領(lǐng)域中的應(yīng)用，體現(xiàn)出了顯著的持續(xù)性與條件化特征。因此，基因靶向技術(shù)在禽流感病毒防治中的作用發(fā)揮對其應(yīng)用條件有一定的要求。

基因靶向技術(shù)也被稱為基因敲除，主要是指從分子水平開展試驗(yàn)，針對特定的結(jié)構(gòu)已知但功能不明確的基因，通過將該基因去除或者利用其他同類型基因進(jìn)行代替的方式，方便從整體角度對試驗(yàn)動物的反映狀態(tài)進(jìn)行觀察，進(jìn)而探究該基因具有的功能[3-4]。而基因靶向技術(shù)在臨床上的應(yīng)用主要是借助MOGT微創(chuàng)生物基因靶向技術(shù)來實(shí)現(xiàn)，靈活借助智能腦電檢測系統(tǒng)對患者病癥神經(jīng)元路徑位點(diǎn)進(jìn)行檢測，在此基礎(chǔ)上通過利用特殊的基因蛋白植入患者神經(jīng)元路徑位點(diǎn)部位的方式，誘發(fā)生物體出現(xiàn)一系列的生物效應(yīng)。同時，合理調(diào)控中樞和其他周圍神經(jīng)元的發(fā)育、分化、生長、再生及功能特性，促使患者受損的組織逐漸恢復(fù)。

3? ? 基因靶向治療在禽流感病毒領(lǐng)域的應(yīng)用原理分析

基因靶向技術(shù)在禽流感病毒領(lǐng)域的應(yīng)用是依據(jù)基因重組原理，通過將外源DNA導(dǎo)入靶細(xì)胞這一方式，促使外源DNA與靶細(xì)胞內(nèi)染色體上同源DNA間發(fā)生重組，在此基礎(chǔ)上為外源DNA定點(diǎn)整合入靶細(xì)胞基因組這一操作奠定基礎(chǔ)。通常情況下，針對不同的生物體具體采用的基因打靶方式也存在一定的差異性。以小鼠為例，基因打靶的操作流程：從小鼠胚胎上提取干細(xì)胞;完成靶載體的構(gòu)建工作，其間需要確保靶載體中含有與靶基因同源的DNA片段;將靶載體轉(zhuǎn)移到干細(xì)胞內(nèi);篩選出含有靶載體的干細(xì)胞，對其實(shí)施擴(kuò)增操作;將含有靶載體的干細(xì)胞注入小鼠胚胎內(nèi)，促使胚胎發(fā)育形成嵌合體小鼠，然后通過選擇性培育的方式獲得基因敲除小鼠[5]。從現(xiàn)階段基因敲定的研究情況來看，修改后的基因靶向在牛、羊、人類等哺乳動物中的應(yīng)用效果同樣可觀。針對基因靶向在禽流感病毒領(lǐng)域中的應(yīng)用研究，早在 2016 年4月19日，國際學(xué)術(shù)期刊在線發(fā)表了“腺病毒表達(dá)的血凝素靶向人工微RNA可保護(hù)小鼠免受不同的H5N1感染”相關(guān)研究內(nèi)容。這一研究內(nèi)容作為中國科學(xué)院上海巴斯德研究所抗感染免疫與疫苗研究課題組聯(lián)合匹茲堡大學(xué)兒童醫(yī)院協(xié)作獲得的重要研究成果，其結(jié)果顯示，通過將miRNA技術(shù)與腺病毒載體2組的有機(jī)結(jié)合，進(jìn)一步研發(fā)出了一種新型的禽流感防控技術(shù)。與此同時，借助專業(yè)軟件設(shè)計(jì)，配合科學(xué)的細(xì)胞體外篩選，科研人員發(fā)現(xiàn)一條靶向H5N1 HA 基因的miRNA，即HA1405，并且證實(shí)了該基因?qū)τ贖5N1病毒有較強(qiáng)的拮抗功能[6]。研究發(fā)現(xiàn)，HA1405基因在細(xì)胞水平對clade 2.3.2H5N1亞型病毒的抑制效果，最高可以達(dá)到96.7%。這一結(jié)果為禽流感病毒防治提供了重要的理論依據(jù)。其間，科研人員通過將HA1405克隆至復(fù)制缺陷型腺病毒載體AdC68的E1缺失區(qū)這一方式，進(jìn)一步獲得了重組腺病毒——AdC68-HA1405，這一重組腺病毒可以促使4種不同H5N1亞型的流感病毒在感染患者體內(nèi)的實(shí)際含量下降3～40倍，因而驗(yàn)證了基因靶向在禽流感病毒領(lǐng)域中的應(yīng)用價值。

4? ? 結(jié)語

綜上所述，隨著醫(yī)療技術(shù)水平的不斷提高，人們的關(guān)注點(diǎn)向著闡明基因功能的方向發(fā)生轉(zhuǎn)變，并且在此基礎(chǔ)上探尋具有治療價值的基因產(chǎn)物?；虬邢蚣夹g(shù)的出現(xiàn)及其在多個領(lǐng)域中的廣泛應(yīng)用為禽流感病毒以及其他病毒的防治工作提供了全新思路，具有較大的臨床實(shí)踐價值。因此，應(yīng)該給予高度重視。

5? ? 參考文獻(xiàn)

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