農(nóng)藥多殘留檢測前處理注意事項(xiàng)

李雪丹

摘要? ? 隨著人們對農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的日益關(guān)注，準(zhǔn)確的定量檢測對政府加強(qiáng)監(jiān)管具有舉足輕重的作用?！妒卟撕退杏袡C(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）是目前基層實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險監(jiān)測最常用的定量檢測方法，該方法準(zhǔn)確、高效、簡便、易掌握、成本低、便于普及。因此，本文對抽樣、樣品制備、提取及濃縮等前處理過程的關(guān)鍵控制點(diǎn)進(jìn)行了分析討論，以期為NY/T 761—2008的廣泛應(yīng)用提供參考。

關(guān)鍵詞? ? 農(nóng)藥殘留;氣相色譜;前處理;農(nóng)產(chǎn)品

中圖分類號? ? S481+.8? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼? ? A

文章編號? ?1007-5739（2019）15-0113-02

Matters? Needing? Attention? of? Pretreatment? in? Pesticide? Multi-residue? Detection

LI Xue-dan

（Hebei Inspection Technology Center for Product Quality Safety，Shijiazhuang Hebei 050051）

Abstract? ? With people′s increasing concern about pesticide residues in agricultural products，accurate quantitative detection plays an important role in strengthening government supervision."NY/T 761—2008" is the most commonly used method of risk monitoring in junior laboratories for its accurate，efficient，convenient，easy to master，low cost and easy to popularize.Therefore，the key control points of pretreatment were analyzed and discussed in this paper，including sampling，sample preparation，extraction，concentration and other pretreatment.It provids a reference for the wide application of "NY/T 761—2008".

Key words? ? pesticide residue;gas chromatography;pretreatment;agricultural product

農(nóng)藥的廣泛使用，提高了農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量與產(chǎn)量，保障了農(nóng)業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展，但是在此過程中農(nóng)殘超標(biāo)的問題日益顯著。殘留農(nóng)藥在食物鏈中具有極強(qiáng)的富集作用，在人體和動物體內(nèi)累積，嚴(yán)重威脅人類的食品安全[1]。其中，有機(jī)磷殺蟲劑的使用占農(nóng)藥使用總量的70%以上，導(dǎo)致中毒事件時有發(fā)生[2-4]。

《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）原為美國加州農(nóng)業(yè)部的農(nóng)藥多殘留檢測方法，后來經(jīng)農(nóng)業(yè)部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心（天津）引進(jìn)，并發(fā)布為農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[5]，是目前農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中農(nóng)殘檢測應(yīng)用最多的標(biāo)準(zhǔn)之一，實(shí)用性較強(qiáng)。與《食品中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測定》（GB/T 5009.20—2003）等標(biāo)準(zhǔn)相比，該標(biāo)準(zhǔn)前處理方法明顯步驟少、操作簡單[6]，實(shí)驗(yàn)設(shè)備簡便，易掌握，便于在基層實(shí)驗(yàn)室普及使用。

在農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測過程中，無論傳統(tǒng)方法還是現(xiàn)代儀器分析方法，都離不開大量的前處理操作。因此，前處理過程是農(nóng)殘分析檢測非常關(guān)鍵的步驟，直接關(guān)系到整個分析過程的準(zhǔn)確性與精密度[7]。有統(tǒng)計(jì)表明，大部分農(nóng)藥殘留檢測過程中，有機(jī)溶劑提取、濃縮、凈化等前處理步驟耗時占整個分析過程的70%以上，前處理過程所造成的誤差也占整個分析過程誤差的絕大部分[8]。越來越多的試驗(yàn)證明，90%的試驗(yàn)誤差來自于樣品的采集及制備，只有約10%來自于分析儀器[9]。因此，本文針對NY/T 761—2008中有機(jī)磷農(nóng)藥多殘留檢測過程中樣品前處理的關(guān)鍵環(huán)節(jié)把控及需要注意的事項(xiàng)進(jìn)行了簡述。

1? ? 抽樣過程

樣品采集過程即是人們根據(jù)需要，從批量產(chǎn)品中選取部分有代表性的樣品用于檢測的過程。因此，其關(guān)鍵控制點(diǎn)是保證樣品的代表性。

按照抽樣地點(diǎn)的不同，抽樣方法可分為3類：生產(chǎn)基地、批發(fā)市場、農(nóng)貿(mào)市場和超市。因?yàn)闃悠贩植嫉奶攸c(diǎn)不同，采取不同的抽樣方法，抽取成熟期、即將上市的樣品。在噴施農(nóng)藥安全間隔期內(nèi)的樣品不要抽取，雨天不宜抽樣[10]。

一般每個樣品的抽取量不少于3 kg。當(dāng)產(chǎn)品單個個體重量較大時，按照個體數(shù)量進(jìn)行抽樣。抽樣部位，一般原則為可食用部分。實(shí)驗(yàn)室樣品的取樣量根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測和合同要求執(zhí)行，其最低取樣量參見表1[11]。

因?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品的特殊性，樣品在放置過程中可能因?yàn)槊傅淖饔枚罐r(nóng)藥殘留分解，進(jìn)而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[12]，故抽樣完成后應(yīng)盡快送達(dá)實(shí)驗(yàn)室。原則上不準(zhǔn)郵寄和托運(yùn)，應(yīng)由抽樣人員隨身攜帶[13]。

2? ? 樣品的制備

試樣的制備即是樣品分取、粉碎、縮分、混勻、保存的過程。因此，該環(huán)節(jié)的關(guān)鍵控制點(diǎn)即是保證樣品的待測成品不發(fā)生改變并穩(wěn)定保存。

取樣品可食用部分進(jìn)行樣品的制備，可食用部分的判定可參照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)? 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2016）附錄A。按照四分法、等分法等常用縮分方法，將樣品縮分至1 kg左右，放入組織搗碎機(jī)中制成勻漿，取2 份各300 g左右的勻漿放入聚乙烯瓶中，一份留樣，另一份供分析用。每處理1個樣品后制樣工具應(yīng)沖洗或擦洗干凈，嚴(yán)防交叉污染[14]。

樣品組織勻漿的過程增加了樣品顆粒數(shù)，減小了縮分的誤差，提高了浸提率[15]。因此，組織搗碎的越細(xì)，試驗(yàn)數(shù)據(jù)越準(zhǔn)確;但是過于精細(xì)，會增加時間和能量的消耗。對于農(nóng)產(chǎn)品來說，一般搗碎至糊狀，無明顯塊狀物質(zhì)即可。

樣品保存時，將樣品裝入聚乙烯塑料瓶后，置于-20～

-16 ℃的冰柜或冰箱中冷凍。樣品盒上標(biāo)注樣品基本信息，包括樣品名稱、樣品批號、日期、分析項(xiàng)目和制樣人員等信息[16]。檢測后的樣品應(yīng)至少保存半年，以供復(fù)檢。保存樣品的冰箱要保持整潔，與試劑分開保存。

3? ? 提取

NY/T 761—2008采用的是較為傳統(tǒng)的液液萃取法，利用不同組分溶劑之間的溶解度差異來對目標(biāo)組分進(jìn)行提取[17]，是目前最常用的農(nóng)藥殘留提取方法，操作簡單，對試驗(yàn)器材要求較低，但操作繁瑣，操作不當(dāng)易影響試驗(yàn)的重復(fù)性[18]。一般操作是樣本加提取劑后高速搗碎，使溶劑與微細(xì)試樣反復(fù)緊密接觸、萃取，從而提取出檢測成分。因此，提取過程在整個前處理過程中至關(guān)重要，其關(guān)鍵在于浸提并分離有效成分。農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留前處理流程如圖1所示[19]。根據(jù)農(nóng)殘?zhí)崛∵^程，勻漿機(jī)高速分散樣品和鹽析為其中較為重要的2個操作步驟。

勻漿分散：該過程是將樣品勻漿至更細(xì)小的顆粒，利于待測成分有效溶解于乙腈溶液中。使用高速勻漿的目的有2個，一是為了待測成分更快速地溶于乙腈溶液;二是為了快速打碎樣品，防止有效成分損失。因此，一般將勻漿過程設(shè)為1 500 r/min、2 min。

鹽析：該過程是利用過飽和氯化鈉溶液與乙腈溶液的比重不同，形成有明顯界線的兩相。因此，該過程需要稱量過量的氯化鈉，但不宜過多，振蕩后瓶底有少量氯化鈉剩余即可，否則可能會增加后期移液管吸取的難度，含水量較高的樣品可酌情增加。此外，該過程中振蕩因無法機(jī)械代替，因而振蕩的方式不同會對檢測結(jié)果的平行性有影響。一般要求縱向振蕩，頻率與振幅盡量保持一致，充分振蕩。

靜置至少需要30 min，水相和有機(jī)相有明顯分層才可進(jìn)行提取，否則易造成回收率較低。若發(fā)生乳化現(xiàn)象，則長時間靜置或者加少量蒸餾水，直到分層清晰[20]。

4? ? 濃縮

因?yàn)檗r(nóng)藥殘留屬于微量甚至痕量檢測，故需要濃縮提取物，以有效提高靈敏度和準(zhǔn)確性。根據(jù)國標(biāo)要求，農(nóng)產(chǎn)品中有機(jī)磷的濃縮過程使用氮吹儀完成。許多待測農(nóng)藥具有熱不穩(wěn)定性，加熱過程若操作不當(dāng)會導(dǎo)致對熱不穩(wěn)定的農(nóng)藥損失，影響檢測準(zhǔn)確性。在此過程中，既要保證農(nóng)藥的濃度合適，又要防止農(nóng)藥損失。因此，濃縮過程的關(guān)鍵在于對氮吹儀的控制。首先，氮吹過程中的水浴用水必須是去離子水或者蒸餾水[21]，因?yàn)榧訜徇^程中會有水蒸氣出現(xiàn)，不純凈的水可能會污染樣品;且水浴溫度不宜過高，一般保持在80 ℃ 以下，否則熱不穩(wěn)定農(nóng)藥會在高溫下分解，影響樣品回收率。其次，氮吹時間和流速對農(nóng)藥測定亦有影響。氮吹的流速可根據(jù)不同的儀器和氮吹管的高度進(jìn)行調(diào)整，試樣液面呈現(xiàn)微微晃蕩即可。氮吹管不可離液面過近，防止液體飛濺污染氮吹管。不同樣品的氮吹時間不盡相同，按照國標(biāo)要求試樣需吹至“近干”狀態(tài)，即殘留液體不成股流下、表面微潮的狀態(tài)。具體操作可在液體體積小于0.5 mL時，離開熱源，單用氣流吹至近干。切忌樣品完全吹干。若遇到易氧化樣品，應(yīng)嚴(yán)格使用氮?dú)猓乐寡趸?/p>

氮吹過程是直接影響試樣回收率和重復(fù)率的重要環(huán)節(jié)，需在實(shí)際檢驗(yàn)中反復(fù)熟練根據(jù)儀器設(shè)備特點(diǎn)摸索出適合本實(shí)驗(yàn)室的操作模式。

5? ? 凈化

使用有機(jī)溶劑提取時，樣本中的油脂、蛋白質(zhì)、色素、糖類等易與農(nóng)藥一起被提取出來，嚴(yán)重干擾殘留量的測定[22]。因此，凈化環(huán)節(jié)的關(guān)鍵點(diǎn)是去除干擾物。凈化的要求與方法在很大程度上取決于農(nóng)藥和樣本的性質(zhì)、檢測方法、對分析結(jié)果準(zhǔn)確度的要求。根據(jù)國標(biāo)，有機(jī)磷檢測采用FPD檢測器，定容后不需要凈化即可達(dá)到檢測要求。

6? ? 結(jié)語

農(nóng)藥多殘留分析是一項(xiàng)綜合性強(qiáng)和涉及面廣的分析檢測。為達(dá)到快速、安全、準(zhǔn)確且高通量的檢測目的，需要從樣品采集、制備、提取等各個方面進(jìn)行嚴(yán)格操作;并結(jié)合自身實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的特點(diǎn)，勤加練習(xí)，逐步摸索適合實(shí)驗(yàn)室操作的試驗(yàn)?zāi)Ｊ?，加?qiáng)基層農(nóng)藥殘留檢測力量，提高基層農(nóng)藥殘留檢測能力，保障檢測結(jié)果的可靠性及可信度。

7? ? 參考文獻(xiàn)

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