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    加力膠囊對動物補(bǔ)血和抗疲勞作用研究

    2019-09-21 08:35:18金春花劉新宇金哲勇李忠寬
    特產(chǎn)研究 2019年3期
    關(guān)鍵詞:小鼠劑量

    金春花,劉新宇,金哲勇,李忠寬

    (1.吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院,長春 130021;2.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),長春 130118;3.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所,長春 130112)

    加力膠囊為中藥復(fù)方制劑,由阿膠和紅景天提取物等組成,臨床上擬用于改善運(yùn)動員由于過度訓(xùn)練引起的貧血與疲勞,提高運(yùn)動員的體能,增強(qiáng)運(yùn)動員的耐力,提高競技能力;也可用于各種原因引起的營養(yǎng)性貧血和疲勞。為探討其藥理作用,為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù),進(jìn)行如下試驗(yàn)。

    1 材料

    1.1 藥品與試劑

    加力膠囊(生產(chǎn)批號:030927,吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院);雪域紅景天(生產(chǎn)批號:030801,甘肅奇正實(shí)業(yè)有限公司);丙酸睪丸素(生產(chǎn)批號:020218,山東博山制藥廠)。

    加力膠囊混懸液的配制:將加力膠囊除去膠囊留下藥粉,稱取 11.00 g、5.50 g、2.75 g,分別置于 3 個容量瓶中,以蒸餾水定容至100 mL搖勻,配制出11.00%、5.50 %和2.75%,用于小鼠試驗(yàn)的3 個劑量的加力膠囊混懸液;再分別稱取加力膠囊藥粉15.00 g、7.50 g、3.75 g,分別置于3個容量瓶中,以蒸餾水定容至50 mL搖勻,配制出30.0%、15.0%和7.5%,用于大鼠試驗(yàn)的3 個劑量的加力膠囊混懸液。

    3.90%紅景天混懸液的配制:稱取紅景天粉劑3.90g,置于容量瓶中,以蒸餾水定容至100 mL 搖勻,用于小鼠實(shí)驗(yàn)。

    9.00%紅景天混懸液的配制:稱取紅景天粉劑4.50 g,置于容量瓶中,以蒸餾水定容至50 mL 搖勻,用于大鼠實(shí)驗(yàn)。

    丙酸睪丸素混懸液的配制:稱取45 mg 丙酸睪丸素,置于容量瓶中,以蒸餾水定容至50 mL 搖勻。

    所有混懸液均現(xiàn)用現(xiàn)配。

    1.2 試驗(yàn)動物

    雄性昆明種小鼠 150 只,體重 19~21 g;Wistar 雄性大鼠50 只,體重160~190 g,購于長春高新醫(yī)學(xué)動物實(shí)驗(yàn)研究中心〔合格證號為SCXK-(吉)2003-0004〕。

    1.3 儀器

    722 可見分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器有限公司)。

    2 設(shè)計(jì)與方法

    2.1 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠補(bǔ)血作用

    試驗(yàn)設(shè)計(jì):試驗(yàn)組設(shè)有膠囊高劑量(2.20 g/kg)、中劑量(1.10 g/kg)、低劑量(0.55 g/kg)3 個處理組,紅景天組(0.78 g/kg),對照組(蒸餾水)。

    試驗(yàn)方法:150 只小鼠進(jìn)入動物屏障系統(tǒng)適應(yīng)3 d后,隨機(jī)分為5 組,每組30 只。對照組按20 mL/kg 每日灌胃蒸餾水;紅景天組按20 mL/kg每日灌胃3.90%紅景天混懸液;加力膠囊高劑量組、中劑量組、低劑量組小鼠,每日按 20 mL/kg 灌胃加力膠囊高劑量(2.20 g/kg)、中劑量(1.10 g/kg)、低劑量(0.55 g/kg)混懸液。除灌胃受試物不同外,試驗(yàn)組、紅景天組、對照組的小鼠飼養(yǎng)管理?xiàng)l件均相同,飼養(yǎng)及給藥期間,實(shí)驗(yàn)動物自由攝食飲水。加力膠囊高劑量組、中劑量組、低劑量組及紅景天組、對照組均連續(xù)灌胃給予受試物20d;末次給藥后40 min,對各組小鼠均實(shí)施摘眼球術(shù)后[1],將其放入(32±1)℃的水中游泳,并分別于游泳前、游泳30min及游泳60 min 3 個時間點(diǎn),各取10 只小鼠的血樣(每只小鼠只采血1 次),用分光光度計(jì)測其血紅蛋白含量、紅細(xì)胞數(shù)及血糖含量。

    2.2 加力膠囊對大鼠補(bǔ)血作用

    試驗(yàn)設(shè)計(jì):試驗(yàn)組設(shè)有膠囊高劑量(1.500 g/kg)、中劑量(0.750 g/kg)、低劑量(0.375 g/kg)3 個處理組,紅景天組(0.54 g/kg),對照組(蒸餾水)。

    試驗(yàn)方法:50 只大鼠進(jìn)入動物屏障系統(tǒng)適應(yīng)3 d后,隨機(jī)分為5 組,每組10 只。對照組每日按5 mL/kg灌胃蒸餾水;紅景天組每日按5 mL/kg 灌胃9.00%紅景天混懸液;加力膠囊高劑量組、中劑量組、低劑量組大鼠,每日按5mL/kg灌胃加力膠囊高劑量(1.500g/kg)、中劑量(0.750 g/kg)、低劑量(0.375 g/kg)混懸液。除給予灌胃受試物不同外,試驗(yàn)組、紅景天組、對照組的大鼠飼養(yǎng)管理?xiàng)l件均相同,飼養(yǎng)及給藥期間,實(shí)驗(yàn)動物自由攝食飲水。高劑量組、中劑量組、低劑量組、紅景天組、對照組均連續(xù)灌胃給予受試物20 d;并分別于給藥前、給藥10 d 及20 d 對各組大鼠剪尾采血,用分光光度計(jì)測其血紅蛋白含量及紅細(xì)胞數(shù)。

    2.3 加力膠囊對大鼠抗疲勞作用

    試驗(yàn)設(shè)計(jì):試驗(yàn)組設(shè)有加力膠囊高劑量(1.500g/kg)、中劑量(0.750 g/kg)、低劑量(0.375 g/kg)3 個處理組,丙酸睪丸素組(4.5 g/kg),對照組(蒸餾水)。

    試驗(yàn)方法:50 只小鼠進(jìn)入動物屏障系統(tǒng)適應(yīng)3 d后,隨機(jī)分為5 組,每組10 只。對照組每日灌胃蒸餾水(5 mL/kg);丙酸睪丸素組每日灌胃丙酸睪丸素混懸液(5mL/kg);加力膠囊高劑量組、中劑量組、低劑量組大鼠,每日按5mL/kg分別灌胃加力膠囊高劑量(1.500 g/kg)、中劑量(0.750 g/kg)、低劑量(0.375 g/kg)混懸液。除給予灌胃受試物不同外,試驗(yàn)組、丙酸睪丸素組、對照組的大鼠飼養(yǎng)管理?xiàng)l件均相同,飼養(yǎng)及給藥期間,實(shí)驗(yàn)動物自由攝食飲水。高、中、低劑量組及陰性和陽性對照組均連續(xù)灌胃給予受試物10 d;末次給藥后40 min,斷頭處死大鼠,剖取前列腺、提肛肌-海綿球肌、睪丸于電子天平上稱重,計(jì)算臟器系數(shù)[2]。

    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    3 結(jié)果

    3.1 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠血紅蛋白、紅細(xì)胞及血糖含量的影響

    表1 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠血紅蛋白含量的影響Table 1 Effect of giali Capsule on hemoglobin in mice with exercise-induced blood loss (±s)(gHb/L)

    表1 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠血紅蛋白含量的影響Table 1 Effect of giali Capsule on hemoglobin in mice with exercise-induced blood loss (±s)(gHb/L)

    注:a.與對照組比較,P<0.05;b.與紅景天組比較,P<0.05。Note:a.Compared with control group,P<0.05;b.Compared with Rhodiola group,P<0.05.

    組別Group劑量(g/kg)Dose動物數(shù)(只)Nimal number游泳前(10 只)Foreswimmin游泳 30 min(10 只)Swimming30 min游泳 60 min(10 只)Swimming60 min對照組Control group 30 140.5±24.3 109.9±32.4 111.4±21.0紅景天組Rhodiola 0.78 30 131.9±19.0 117.9±25.7 115.8±23.7加力膠囊高劑量組High dose group of giali capsule 2.20 30 141.4±14.1 127.7±13.7 123.9±35.5加力膠囊中劑量組Middle dose group of giali capsule 1.10 30 139.8±12.6 127.0±24.0 133.6±19.8ab加力膠囊低劑量組Low dose group of giali capsule 0.55 30 132.7±6.56 116.2±23.6 116.1±29.4

    表2 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠紅細(xì)胞數(shù)的影響Table 2 Effect of giali Capsule on red blood cells in mice with exercise-induced blood loss (±s)(1012/L)

    表2 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠紅細(xì)胞數(shù)的影響Table 2 Effect of giali Capsule on red blood cells in mice with exercise-induced blood loss (±s)(1012/L)

    組別Group劑量(g/kg)Dose動物數(shù)(只)Animal number游泳前(10 只)Befores wimming游泳 30 min(10 只)Swimming 30 min游泳 60 min(10 只)Swimming 60 min對照組Control group 30 6.92±0.959 5.48±1.470 6.37±1.470紅景天組Rhodiola 0.78 30 7.44±1.302 5.82±1.300 5.85±1.490加力膠囊高劑量組Hig dose group of giali capsule 2.20 30 7.13±0.956 6.08±0.494 6.76±1.240加力膠囊中劑量組Middle dose group of giali capsule 1.10 30 6.88±1.070 6.20±1.590 6.68±0.895加力膠囊低劑量組Low dose group of giali capsule 0.55 30 6.56±1.070 6.73±0.920a 6.60±1.370

    表3 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠血糖的影響Table 3 Effect of giali Capsule on blood glucos with exercise-induced blood loss (±s)(mmol/L)

    表3 加力膠囊對運(yùn)動性失血小鼠血糖的影響Table 3 Effect of giali Capsule on blood glucos with exercise-induced blood loss (±s)(mmol/L)

    組 別Group劑 量(g/kg)Dose動物數(shù)(只)Animal number游泳前(10 只)Befores wimming游泳 30 min(10 只)Swimming 30 min游泳 60 min(10 只)Swimming 60 min對照組Control group 30 7.66± 3.20 4.44± 1.69 4.92±1.38紅景天組Rhodiola 0.78 30 9.57± 2.53 6.51± 5.69 8.04± 3.92加力膠囊高劑量組High dose group of giali capsule 2.20 30 9.57± 3.76 7.38± 4.02 8.53± 4.31加力膠囊中劑量組Middle dose group of giali capsule 1.10 30 7.73± 2.70 7.23± 2.69a 6.86±2.69加力膠囊低劑量組Low dose group of giali capsule 0.55 30 9.06± 2.60 6.86± 3.79 6.91±3.05

    表1、表2和表3結(jié)果表明,加力膠囊中劑量組在失血30 min 或60 min 與同時間點(diǎn)對照組比較,明顯提高血紅蛋白含量和血糖含量(P<0.05),低劑量組在失血30 min與同時間點(diǎn)對照組比較,明顯提高紅細(xì)胞值,表明加力膠囊對運(yùn)動性失血有明顯改善作用。加力膠囊中劑量組在60 min 與同時間點(diǎn)紅景天組比較,明顯提高血紅蛋白含量(P<0.05),表明加力膠囊中劑量組改善運(yùn)動性失血作用優(yōu)于紅景天組。

    3.2 加力膠囊對連續(xù)給藥20d大鼠的血紅蛋白含量及紅細(xì)胞數(shù)的影響

    表4 加力膠囊連續(xù)給藥20 d 對大鼠的紅細(xì)胞數(shù)的影響Table 4 The effect of erythrocyte on the 20 day after the continuou administration of giali Capsule in rats (±s)(1012/L)

    表4 加力膠囊連續(xù)給藥20 d 對大鼠的紅細(xì)胞數(shù)的影響Table 4 The effect of erythrocyte on the 20 day after the continuou administration of giali Capsule in rats (±s)(1012/L)

    組 別 Group 劑量(g/kg)Dose給藥前Before administration 10 d 20 d對照組 Control group 7.70±0.906 7.31±1.000 7.22±0.998紅景天組 Rhodiola 0.540 7.96±0.984 7.40±0.492 7.68±0.795加力膠囊高劑量組 High dose group of giali capsule 1.500 7.96±1.170 7.30±0.953 9.12±2.260a加力膠囊中劑量組 Middle dose group of giali capsule 0.750 8.07±1.220 7.10±0.875 8.54±1.330a加力膠囊低劑量組 Low dose group of giali capsule 0.375 7.53±0.902 6.99±0.485 8.57±1.640a

    表5 加力膠囊連續(xù)給藥20 d 對大鼠的血紅蛋白的影響Table 5 Effect of giali Capsule on hemoglobin in 20 day rats (±s)(gHb/L)

    表5 加力膠囊連續(xù)給藥20 d 對大鼠的血紅蛋白的影響Table 5 Effect of giali Capsule on hemoglobin in 20 day rats (±s)(gHb/L)

    組 別 Group 劑量(g/kg)Dose給藥前Before administration 10 d 20 d對照組 Control group 150.9±12.80 147.5±18.30 142.5±12.5紅景天組 Rhodiola 0.540 157.1±11.40 161.9±19.10 153.9±17.0加力膠囊高劑量組 High dose group of giali capsule 1.500 158.9±9.88 166.6±17.70a 158.7±19.7a加力膠囊中劑量組 Middle dose group of giali capsule 0.750 156.7±8.72 161.7±7.73a 159.6±19.9a加力膠囊低劑量組 Low dose group of giali capsule 0.375 156.8±14.50 145.7±12.40 144.9±13.3

    表4和表5結(jié)果表明,加力膠囊高、中劑量組于給藥10 d及20 d與同時間點(diǎn)對照組比較,明顯提高血紅蛋白含量,升高紅細(xì)胞數(shù)(P<0.05)。

    3.3 加力膠囊對大鼠血清睪酮、前列腺、提肛肌-海綿球肌、睪丸重量的影響

    表6 加力膠囊對大鼠睪丸重量的影響Table 6 Effect of giali Capsule on prostate,levator ani muscle and anus muscle or testis weight in rats (g/100g,±s)

    表6 加力膠囊對大鼠睪丸重量的影響Table 6 Effect of giali Capsule on prostate,levator ani muscle and anus muscle or testis weight in rats (g/100g,±s)

    注:d.與對照組比較,P<0.001。Note:d.Compared with control group,P<0.001.

    組 別 Group 劑量Dose前列腺Prostate睪丸Testis提肛肌-海棉球肌Levator ani muscle and anus muscle對照組 Control group 0.070 8±0.014 80 1.54±0.197 0 0.207±0.036 5丙酸睪丸素組 Testosterone propionate group 4.500 mg/kg 0.137 0±0.022 80d 1.54±0.090 9 0.331±0.034 6d加力膠囊高劑量組 High dose group of giali capsule 1.500 g/kg 0.078 2±0.018 10 1.51±0.177 0 0.220±0.052 8加力膠囊中劑量組 Middle dose group of giali capsule 0.750 g/kg 0.078 6±0.006 82 1.51±0.080 0 0.214±0.023 8加力膠囊低劑量組 Low dose group of giali capsule 0.375 g/kg 0.066 7±0.019 40 1.55±0.231 0 0.201±0.060 0

    表6結(jié)果表明,除丙酸睪丸素組與對照組比較,明顯增加前列腺、提肛肌-海綿球肌重量外,其余給藥各組與對照組比較,沒有明顯差異(P>0.05)。

    4 討論

    加力膠囊為中藥復(fù)方制劑,由阿膠和紅景天提取物等組成。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為,阿膠性味甘、平,有滋陰補(bǔ)血、安胎的功效。阿膠含有多種蛋白質(zhì)、氨基酸、鈣等,對缺血性動物的紅細(xì)胞、血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積有顯著的促進(jìn)作用,能改善血鈣平衡,促進(jìn)紅細(xì)胞的生成[3];此外,阿膠還能對骨髓細(xì)胞的功能有顯著的促進(jìn)作用。紅景天能顯著提高動物游泳耐力和耐缺氧能力[4];對人體運(yùn)動能力影響的實(shí)驗(yàn)研究表明,紅景天能降低心率和心肌酶活性,降低動脈血壓變化幅度,降低受試者心肌耗氧量,對運(yùn)動員引起的心肌缺血性缺氧具有較好的對抗作用[5]。

    血紅蛋白的主要功能是運(yùn)輸氧,血紅蛋白的含量直接影響運(yùn)動耐力。加力膠囊中劑量組在失血30 min或60 min與同時間點(diǎn)對照組比較,明顯提高血紅蛋白含量;低劑量組在失血30min 與同時間點(diǎn)對照組比較明顯提高紅細(xì)胞值,表明加力膠囊對小鼠運(yùn)動性失血有明顯改善作用;加力膠囊中劑量組在60 min與同時間點(diǎn)紅景天組比較,明顯提高血紅蛋白含量,表明加力膠囊中劑量組改善小鼠運(yùn)動性失血作用優(yōu)于紅景天組。

    血糖是影響長時間運(yùn)動能力的重要限制性因素之一,加力膠囊中劑量組在失血30 min 或60 min 與同時間點(diǎn)對照組比較,明顯提高血糖含量,加力膠囊能保持運(yùn)動失血小鼠血糖的相對穩(wěn)定,明顯提高失血小鼠血糖含量,明顯延緩疲勞的出現(xiàn),從而保證了動物運(yùn)動的耐力。

    血紅細(xì)胞的含量直接由造血機(jī)能決定,加力膠囊亦能顯著提高連續(xù)給藥大鼠血紅細(xì)胞的含量,具有較強(qiáng)的促進(jìn)造血機(jī)能的作用。

    以上實(shí)驗(yàn)為加力膠囊用于增強(qiáng)運(yùn)動員的體能與耐力提供了一定的理論依據(jù)。

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