中藥復(fù)方蒲地藍質(zhì)量控制研究進展

劉路路 張麗娜 章凡

摘要：中藥復(fù)方蒲地藍是由蒲公英、板藍根、苦地丁和黃芩四味中藥配伍組成，具有清熱解毒、消腫利咽的功效，在臨床上應(yīng)用廣泛，是治療呼吸類疾病、消化類疾病的良方.本文通過查閱整理蒲地藍質(zhì)量研究相關(guān)研究從薄層鑒別、化學(xué)成分、蒲地藍片劑、膠囊、口服液質(zhì)控標準研究對其質(zhì)量控制研究做一綜述，為蒲地藍進一步的研究利用提供理論依據(jù).

關(guān)鍵詞：中藥復(fù)方；蒲地藍；質(zhì)量控制；研究進展

中圖分類號：R285 文獻標識碼：A 文章編號：1673-260X（2019）03-0104-03

蒲地藍由四味中藥蒲公英、板藍根、苦地丁和黃芩組成，具有清熱解毒、消炎抗炎等作用[1]，臨床上可用于咽炎、腮腺炎、扁桃體炎等疾病的治療.市場上復(fù)方蒲地藍有片劑、口服液、膠囊，提取方法多采用超聲提取、加熱回流等.中藥復(fù)方蒲地藍藥效物質(zhì)基礎(chǔ)復(fù)雜，近年來，對蒲地藍的含量測定成分以包括黃芩苷、腺苷、表告依春、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、芹菜素、黃芩素和漢黃芩素等.目前各研究者多采用HPLC對蒲地藍各制劑進行質(zhì)量研究，也有采用UPLC、RP-HPLC、UPLC-MS-MS.本文即對近年來對蒲地藍質(zhì)量控制的研究做一綜述，為蒲地藍資源開發(fā)利用提供參考.

1 復(fù)方蒲地藍的薄層鑒別

楊秀峰等[2]采用薄層色譜法（TLC）對蒲地藍消炎片中黃芩、蒲公英和板藍根進行定性鑒別，黃芩TLC鑒別取黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素為對照品，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（10：3：1：2）為展開劑，在紫外燈365nm處檢測，供試品溶液和對照藥材溶液色譜相應(yīng)的位置顯現(xiàn)顏色相同的斑點；蒲公英TLC鑒定取咖啡酸為對照品，以乙酸丁酯-甲酸-水（7：2.5：2.5）為展開劑，在紫外燈365nm下檢視，供試品色譜中在與對照品色譜相應(yīng)的位置上出現(xiàn)相同顏色的熒光斑點；板藍根TLC鑒定取精氨酸為對照品，以正丁醇-冰醋酸-水（10：5：5）為展開劑，噴以茚三酮試液，日光燈下檢視.蔣磊等[3]采用薄層色譜法鑒定蒲地藍口服液，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（9：1：0.5）為展開劑，365nm紫外燈下檢視，薄層色譜中供試品在與對照品色譜相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點.

2 復(fù)方蒲地藍的主要化學(xué)成分

化學(xué)成分是復(fù)方蒲地藍發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)，對復(fù)方化學(xué)成分的研究具有重要的應(yīng)用價值.蒲地藍全方的化學(xué)成分未見有報道，僅有各單味藥的化學(xué)成分報道：如蒲公英主要含有萜類、黃酮類、香豆精類、多糖類、植物甾醇類、色素類、揮發(fā)油、乙酰酯類等[4]；板藍根主要含有有機酸類、生物堿類、苷類、微量元素等[5]；苦地丁主要含有生物堿、酚酸類、揮發(fā)油、黃酮類、蛋白質(zhì)等[6]；黃芩主要含有黃酮類、芬酸類、氨基酸、微量元素等[7].

3 復(fù)方蒲地藍質(zhì)控標準研究

中藥復(fù)方是中醫(yī)防病治病的主要手段，對中藥復(fù)方制劑質(zhì)量的控制具有重要意義[8].為了保證復(fù)方制劑的安全性與有效性，現(xiàn)代化的研究方法越來越多地被運用到中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標準的制定上[9].目前各研究者多采用HPLC對蒲地藍各制劑進行質(zhì)量研究，也有采用UPLC、RP-HPLC、UPLC-MS-MS.

3.1 蒲地藍片劑質(zhì)控標準研究

劉德勝等[10]建立了HPLC法同時測定蒲地藍消炎片、膠囊和口服液三種制劑中綠原酸和咖啡酸的含量；采用75%甲醇作為提取溶劑，超聲提取；其中綠原酸檢測濃度在14.7～3750.0ng/mL，咖啡酸在68.4～4376.0ng/mL.覃華亮等[11]采用Diamonsil C18色譜柱，測定了蒲地藍消炎片中紫堇靈的含量，得出紫堇靈進樣量在0.1415～0.3773μg與峰面積呈良好的線性關(guān)系.王葳等[12]利用HPLC對蒲地藍消炎片中黃芩苷含量進行測定，得出黃芩苷線性范圍為0.422～16.88μg.胡冰[13]以C18色譜柱，甲醇：水=10：90，檢測波長為260nm，HPLC測定蒲地藍消炎片中腺苷的含量，得出腺苷對照品在0.0128～0.128mg/mL線性關(guān)系良好.邵禮梅[14]等建立HPLC同時測定蒲地藍消炎片中黃芩苷和黃芩素，以甲醇-0.1%磷酸流動相采用梯度洗脫，得出黃芩苷和黃芩素分別在0.02839～0.62458μg、0.01061～0.23342μg范圍內(nèi)與相應(yīng)峰面積具有良好線性關(guān)系.李凱等[15]對蒲地藍消炎片的研究采用TLC測定蒲公英、苦地丁，同時采用HPLC測定黃芩苷的含量，檢測波長280nm，黃芩苷在4.02～32.16μg呈現(xiàn)線性關(guān)系良好.米建萍等[16]建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定蒲地藍消炎片中腺苷、表告依春、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、芹菜素、黃芩素和漢黃芩素十種成分含量，該實驗方法簡便快速，適用于蒲地藍消炎片的質(zhì)量控制.

3.2 蒲地藍口服液質(zhì)控標準研究

代磊[17]使用ODS-C18柱，以甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液（8：7：85），檢測波長為323nm，采用HPLC測定蒲地藍消炎口服液中咖啡酸的含量，得出該方法準確可靠適合于鋪地藍口服液的質(zhì)量控制.董自波等[18]建立了HPLC同時測定蒲地藍消炎口服液中黃芩苷、漢黃芩苷、綠原酸、咖啡酸、菊苣酸、紫堇靈和腺苷7中化學(xué)成分的含量，7個被測成分在各自的測量范圍內(nèi)有著良好的線性關(guān)系，該方法適合蒲地藍消炎口服液的質(zhì)量控制.朱粉霞等[19]建立UPLC同時測定鋪地藍口服液中腺苷、表告依春、咖啡酸、黃芩苷、漢黃芩苷、千層紙素A苷、黃芩素和漢黃芩素的含量八種成分的含量，各成分加樣回收率在100.67%～106.92%且八種成分均能分離.儲繼紅等[20]建立UPLC-MS-MS法同時測定蒲地藍消炎口服液中腺苷、胞苷和鳥苷的含量，腺苷和胞苷在15～150ng/mL范圍內(nèi)、鳥苷在20～200ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，該方法為完善蒲地黃消炎口服液的質(zhì)量控制了重要的提供依據(jù).吳婷等[21]以高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定蒲地藍消炎口服液中野黃芩苷、黃芩苷、綠原酸、漢黃芩素、黃芩素和咖啡酸六種成分，采用質(zhì)譜采用電噴霧離子源及多反應(yīng)監(jiān)測方式進行負離子掃描，6種成分在測定范圍濃度內(nèi)線性關(guān)系良好.張學(xué)東等[22]采用反相液相色譜法同時測定蒲地藍消炎口服液中綠原酸和咖啡酸的含量，綠原酸與咖啡酸的質(zhì)量濃度為4.0g/mL～19.0g/mL時，與峰面積的線性關(guān)系良好.

3.3 蒲地藍膠囊質(zhì)控標準研究

張曉風[23]采用HPLC測定蒲地藍膠囊中黃芩苷的含量，5批次蒲地藍膠囊內(nèi)容物甲醇超聲提取，以甲醇-水-磷酸（40：60：0.2）流動相，檢測波長為280nm進行檢測，得出以黃芩苷作為質(zhì)控標準較為穩(wěn)定.吳襲[24]建立HPLC法測定其綠原酸和咖啡酸的含量，采用50%甲醇超聲20min提取蒲地藍消炎膠囊，以甲醇-0.2%磷酸為流動相，檢測波長323nm，流1.0mL/min，結(jié)果相關(guān)系數(shù)r=0.99999，回收率高達98.7%，RSD大于0.36%，得出該方法簡便、重現(xiàn)性好.胡世強等[25]建立了高分離度快速液相色譜法同時測定蒲地藍消炎膠囊中綠原酸、野黃芩苷、黃芩苷和黃芩素四中成分的檢測方法，得出綠原酸、野黃芩苷、黃芩苷和黃芩素分別在0.004330～0.4330μg、0.01740～1.740μg、0.005860～ 0.5860μg及0.006700～0.6700μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好.

4 其他

韋娟[26]使用自身對照法對三個生產(chǎn)廠家的蒲地藍消炎片的溶出度進行測定，得出三個廠家的蒲地藍消炎片溶出度存在差異，本研究建議將溶出度檢查加入蒲地藍消炎片的檢查項目.劉華等[27]采用培養(yǎng)基稀釋法和離心薄膜法檢查蒲地藍顆粒樣品中微生物限度，選用了大腸埃希菌、金色葡萄球菌、白色念珠菌和黑曲霉菌且四種菌的回收率達到70%以上.李桂水等[28]采用絮凝和超濾耦合聯(lián)用，以咖啡酸和黃芩苷的保留率、蛋白質(zhì)去除率以及水提液的澄清度為指標，對蒲地藍中藥水提液除雜工藝優(yōu)選，確定了該研究絮凝處理后的最佳超濾參數(shù)，比單一的絮凝工藝除雜率更高，但是黃芩苷的保留率卻降低了.程麗君等[29]采用天然高分子絮凝劑殼聚糖對蒲地藍水提液進行絮凝處理，以咖啡酸保留率、蛋白質(zhì)去除率和濁度為指標，對絮凝劑用量、溫度和攪拌速度進行考察，結(jié)果表明殼聚糖量為1g/L、溫度為40℃、攪拌速度為550r/min時，絮凝效果最好.邢玉娟等[30]對蒲地藍消炎顆粒的抗菌、解熱、抗炎作用進行了體內(nèi)和體外研究.體內(nèi)實驗通過試管二倍稀釋法測定最低抑菌濃度和最低殺菌濃度，體外實驗通過對因金黃色葡萄球菌引起小鼠死亡的保護作用，以評價其體內(nèi)外抑菌作用；通過二甲苯導(dǎo)致小鼠耳腫脹實驗評價其抗炎療效；通過對2，4-二硝基苯酚致大鼠體溫升高的影響，評價蒲地藍消炎顆粒的解熱療效.結(jié)果表明蒲地藍消炎顆粒具有抗菌、解熱、抗炎作用.

5 小結(jié)與展望

復(fù)方蒲地藍目前藥用劑型有片劑、口服液、膠囊和顆粒，質(zhì)量研究多采用HPLC，也有采用UPLC、RP-HPLC、UPLC-MS-MS，對蒲地藍的含量測定成分以包括黃芩苷、腺苷、表告依春、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、芹菜素、黃芩素和漢黃芩素等.復(fù)方蒲地藍具有抗炎、抗菌、解熱作用，臨床應(yīng)用廣泛.本文通過查閱整理蒲地藍質(zhì)量研究相關(guān)研究從薄層鑒別、化學(xué)成分、蒲地藍片劑、膠囊、口服液質(zhì)控標準研究對其質(zhì)量控制研究做一綜述，為蒲地藍進一步的研究利用提供理論依據(jù).

參考文獻：

〔1〕國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.1641-1642.

〔2〕楊秀峰，周超，劉峰.蒲地藍消炎片主要成分的薄層色譜鑒別[J].中國藥業(yè)，2008，17（06）：36.

〔3〕蔣磊，孟祥松，李軍，等.蒲地藍消炎口服液質(zhì)量控制方法的研究[J].齊魯藥事，2012，31（02）：75-77.

〔4〕許先猛，董文賓，盧軍，等.蒲公英的化學(xué)成分和功能特性的研究進展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2018，9（07）：1623-1627.

〔5〕倪華，施霞，劉云海.板藍根化學(xué)成分及其藥理活性研究進展[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，19（13）：1609-1611.

〔6〕肖揚，楊春娟，鐘明亮，等.苦地丁化學(xué)成分研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2013，25（12）：1665-1668+1689.

〔7〕吉曉麗.黃芩的化學(xué)成分與藥理作用研究進展[J].中醫(yī)臨床研究，2017，9（09）：128-129.

〔8〕鄧啟榮.中藥復(fù)方質(zhì)量標準研究的主要策略分析[J].中國藥物經(jīng)濟學(xué)，2015，10（S2）：47-48.

〔9〕李萍.中藥復(fù)方制劑質(zhì)量標準的建立及其物質(zhì)基礎(chǔ)研究[J].中醫(yī)臨床研究，2014，6（06）：97-98.

〔10〕劉德勝，呂青志，張曉帆，等.HPLC法對不同蒲地藍消炎制劑中綠原酸和咖啡酸含量的測定[J].濱州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2012，35（01）：51-54.

〔11〕覃華亮，韋怡.HPLC測定蒲地藍消炎片中紫堇靈的含量[J].中國現(xiàn)代中藥，2015，17（01）：58-60.

〔12〕王葳，劉冬麗，李維熙，等.蒲地藍消炎片中黃芩苷的含量測定[J].中國民族民間醫(yī)藥，2016，25（03）：17-18.

〔13〕胡冰.高效液相色譜法測定蒲地藍消炎片中腺苷的含量[J].海峽藥學(xué)，2014，26（06）：71-73.

〔14〕邵禮梅，王云龍，李延雪.高效液相色譜法測定蒲地藍消炎片中黃芩苷與黃芩素含量[J].中國藥業(yè)，2012，21（04）：37-38.

〔15〕李凱，逯海龍.蒲地藍消炎片質(zhì)量標準的研究[J].寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2012，34（08）：859-860+748.

〔16〕米建萍，龐倩，徐遠金.UHPLC-MS/MS法同時測定蒲地藍消炎片中10種成分[J].中成藥，2016， 38（06）：1269-1273.

〔17〕代磊.HPLC法測定蒲地藍消炎口服液中咖啡酸的含量[J].黑龍江醫(yī)藥，2013，26（03）：355-357.

〔18〕董自波，李超，邵建國.HPLC同時測定蒲地藍消炎口服液中7個成分的含量[J].中國中藥雜志，2015，40（09）：1747-1750.

〔19〕朱粉霞，董自波，舒欣，等.UPLC同時測定蒲地藍消炎口服液中8種成分的含量[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報，2013，44（01）：61-64.

〔20〕儲繼紅，吳婷，許美娟，等.UPLC-MS-MS法同時測定蒲地藍消炎口服液中3種核苷[J].中成藥，2017，39（11）：2406-2408.

〔21〕吳婷，儲繼紅，許美娟，等.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法測定蒲地藍消炎口服液中六種成分的含量[J].中國藥物與臨床，2017，17（09）：1257-1261.

〔22〕張學(xué)東，張宜欣，劉永紅，等.反相高效液相色譜法測定蒲地藍消炎口服液中綠原酸和咖啡酸的含量[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2016，26（5）：668-669.

〔23〕張曉鳳.HPLC法測定蒲地藍膠囊中黃芩苷的含量[J].北方藥學(xué)，2014，11（08）：21.

〔24〕吳襲.HPLC法測定蒲地藍消炎膠囊中綠原酸和咖啡酸的含量[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報，2008，14（09）：75-76.

〔25〕胡世強，張偉，張永耀.RRLC法同時測定蒲地藍消炎膠囊中綠原酸、野黃芩苷、黃芩苷和黃芩素的含量[J].中藥新藥與臨床藥理，2013，24（04）：400-403.

〔26〕韋娟.自身對照法測定蒲地藍消炎片的溶出度[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2011，5（09）：119-120.

〔27〕劉華，徐曉霞.用培養(yǎng)基稀釋法和離心薄膜過濾法檢查蒲地藍消炎顆粒微生物限度[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2008，24（16）：2425-2426.

〔28〕李桂水，王國榮，任博平，等.絮凝和超濾耦合用于蒲地藍中藥水提液的除雜研究[J].天津科技大學(xué)學(xué)報，2015，30（03）：62-66+71.

〔29〕程麗君，任博平，王國榮，等.殼聚糖絮凝處理蒲地藍三味水提液效果及機理[J].天津科技大學(xué)學(xué)報，2016，31（01）：46-50.

〔30〕邢玉娟，王建國，潘康鎖，等，陳玉庫.蒲地藍消炎顆粒的抗菌、解熱、抗炎作用研究[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2018，39（03）：58-62.