電針“委中”對(duì)大鼠腰多裂肌損傷后LIF、IL-17表達(dá)的影響

鄒德輝 盧宗孝 晏珺 陳玉佩 劉通 陳冬荔 張佳怡 許玥 白玉琢 張莉 霍則軍

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電針“委中”對(duì)大鼠腰多裂肌損傷后LIF、IL-17表達(dá)的影響

鄒德輝 盧宗孝 晏珺 陳玉佩 劉通 陳冬荔 張佳怡 許玥 白玉琢 張莉 霍則軍

目的 觀察電針“委中”對(duì)大鼠腰多裂肌損傷后組織形態(tài)學(xué)變化以及對(duì)骨骼肌肌肉因子白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor，LIF)、骨骼肌損傷前炎癥因子白介素17(interleukin，IL-17)表達(dá)含量的影響。 方法 將90只雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、模型對(duì)照組、電針委中組、電針腎俞組，每組18只。每組再隨機(jī)分為1天、3天、7天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)。麻醉后于雙側(cè)L4-5多裂肌注射0.5%布比卡因溶液復(fù)制多裂肌損傷模型，通過(guò)光鏡觀察分析造模后多裂肌形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。通過(guò)ELISA和免疫組化觀察1天、3天、7天多裂肌LIF、IL-17表達(dá)含量的動(dòng)態(tài)時(shí)相變化。 結(jié)果 造模后，與空白組比較，模型組不同時(shí)間點(diǎn)的LIF及IL-17表達(dá)含量均明顯增加(P<0.01)；與模型組比較，電針委中和電針腎俞組的IL-17表達(dá)含量有所降低(P<0.01)，而LIF的表達(dá)含量有所增加(P<0.01)；與電針腎俞組比較，電針委中組在1天后下調(diào)IL-17的表達(dá)含量更明顯(P<0.05)，在3天、7天后上調(diào)LIF的作用更顯著(P<0.05)。結(jié)論 電針委中可促進(jìn)IL-17的表達(dá)下調(diào)，減輕炎癥反應(yīng)的程度，同時(shí)可增加LIF的表達(dá)含量，促進(jìn)骨骼肌中葡萄糖的攝取，利于骨骼肌修復(fù)。

多裂?。?損傷修復(fù)； 炎癥因子； 白血病抑制因子； 白介素17

多裂肌是位于脊柱最內(nèi)側(cè)且附著面積最大的椎旁肌，腰骶段的多裂肌對(duì)腰椎的動(dòng)力性穩(wěn)定起到80%以上的重要作用[1]。一旦腰多裂肌發(fā)生損傷、萎縮及功能紊亂，就可能導(dǎo)致腰椎失穩(wěn)引發(fā)腰痛。骨骼肌損傷后需經(jīng)歷炎癥(壞死)、修復(fù)與再生等3個(gè)病理階段[2]。早期的炎癥反應(yīng)過(guò)程與骨骼肌的修復(fù)和再生密切相關(guān)。骨骼肌損傷后肌細(xì)胞能夠分泌上百種分泌蛋白，包括幾十種生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子和金屬肽酶等，這些蛋白質(zhì)能有效調(diào)節(jié)骨骼肌細(xì)胞及其他組織和細(xì)胞的功能[3-4]。 Pedersen等[5]將這些由骨骼肌細(xì)胞產(chǎn)生、分泌到細(xì)胞外并具有內(nèi)分泌功能的細(xì)胞因子、肽等稱為肌肉因子。已往的研究發(fā)現(xiàn)一些肌肉因子與骨骼肌自身的損傷修復(fù)和再生有關(guān)，如胰島素樣生長(zhǎng)因子1、機(jī)械生長(zhǎng)因子、肌肉抑制素、白介素6等都參與了骨骼肌的損傷修復(fù)和再生[6-9]。白血病抑制因子(leukaemia inhibi-tory factor，LIF)也是一種肌肉因子[10-11]，在骨骼肌的損傷修復(fù)和再生中發(fā)揮著重要的作用[12-13]。因此，本實(shí)驗(yàn)擬從骨骼肌損傷后的前炎癥因子白介素17(interleukin，IL-17)和骨骼肌肌肉因子LIF表達(dá)含量變化的角度進(jìn)一步探討電針“委中”穴對(duì)多裂肌的損傷修復(fù)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組

清潔級(jí)健康成年雄性SD大鼠90只，體質(zhì)量280～320 g，由維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK(京)2012-0001。所有大鼠按體質(zhì)量分層，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組、模型組、模型對(duì)照組、電針委中組、電針腎俞組，每組18只。每組大鼠再隨機(jī)分為1天、3天、7天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)6只大鼠。

1.2 主要儀器和試劑

半自動(dòng)化石蠟切片機(jī)(RM2245，德國(guó)萊卡儀器有限公司)；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(SKP-02.600，黃石市恒豐醫(yī)療器械有限公司)；正置智能型顯微鏡及采集系統(tǒng)(BX53，奧林巴斯，中國(guó)有限公司)；韓式電針儀(HANS-200A，北京思盛達(dá)醫(yī)療器械中心)。

布比卡因(美國(guó)Sigma，生產(chǎn)批號(hào)：B5274-1G)；10%水合氯醛(北京歐北生物科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：OB12365)；40%多聚甲醛溶液(北京蘭博利德，生產(chǎn)批號(hào)：P4500)；大鼠白血病抑制因子酶聯(lián)免疫試劑盒、大鼠白介素17酶聯(lián)免疫試劑盒(北京鼎國(guó)生物科技有限責(zé)任公司，生產(chǎn)批號(hào)：CSB-E07432r、CSB-EL011601RA)；大鼠白血病抑制因子抗體、白介素17抗體(美國(guó)Santa，生產(chǎn)批號(hào)：N-18、E-19)。

1.3 動(dòng)物模型制備

模型組大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，10%水合氯醛(350 mg/kg)腹腔注射麻醉，選擇脊柱L4、L5水平兩旁的4個(gè)點(diǎn)，使用一次性4號(hào)針頭注射器抽取0.5 %布比卡因肌肉注射400 μL(100 μL×4)，針頭緊貼棘突旁進(jìn)入肌肉，直到接觸關(guān)節(jié)突和乳突所在的骨面回抽套管1 mm無(wú)血，表明針頭已到達(dá)多裂肌，各點(diǎn)分別注射布比卡因100 μL，時(shí)間不得小于3秒，以利于藥物的吸收。單次注射完成造模。模型對(duì)照組采用同樣方法注射生理鹽水，空白組不做任何處理。

1.4 干預(yù)方法

空白組不做任何處理。模型對(duì)照組、模型組：與電針組同步抓取、固定，不進(jìn)行針刺干預(yù)。參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[14]常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物穴位圖譜，電針委中組：選取雙側(cè)“委中”(膝關(guān)節(jié)背面正中)；電針腎俞組：選取雙側(cè)“腎俞”(第2腰椎旁開(kāi)7 mm)。將大鼠固定后，暴露后肢。采用華佗牌0.30×15 mm一次性針灸針，直刺進(jìn)針后連接韓式電針儀，選用疏密波，頻率2/10 Hz，電流強(qiáng)度 1～2 mA，持續(xù)20分鐘，每天1次，3個(gè)亞組分別治療1天、3天、7天。

1.5 取材方法

各組分別在造模后的第1天、3天、7天同步取材6只。10 %水合氯醛(350 mg/kg)腹腔注射麻醉后，剔除背部皮毛、筋膜，充分暴露腰部肌肉，剝離最長(zhǎng)肌和髂肋肌，銳性切取L4和L5水平多裂肌組織，左側(cè)多裂肌置于40 g/L多聚甲醛溶液固定，取右側(cè)約1 mm×1 mm×1 mm多裂肌迅速置于液氮固定，操作過(guò)程保證無(wú)菌。

1.6 樣本處理

1.6.1 HE染色 左側(cè)多裂肌經(jīng)40 g/L多聚甲醛溶液固定滿意之后，常規(guī)梯度乙醇脫水，石蠟包埋，連續(xù)切片，然后對(duì)切片進(jìn)行二甲苯脫蠟，梯度乙醇水洗；蘇木精染色5分鐘，自來(lái)水沖洗；鹽酸乙醇分化10秒，自來(lái)水沖洗10分鐘，置于伊紅液2分鐘，經(jīng)蘇木精-伊紅染色后，再脫水、透明，封固。光鏡下觀察組織結(jié)構(gòu)變化。

1.6.2 免疫組化法及酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)大鼠多裂肌LIF、IL-17的表達(dá) 免疫組化：60℃烤片6小時(shí)，常規(guī)二甲苯脫蠟、梯度乙醇脫水，熱修復(fù)抗原，PBS沖洗，過(guò)氧化氫封閉10分鐘，滴加一抗，4℃孵育16小時(shí)，加二抗，DAB顯色，顯微鏡下觀察，出現(xiàn)棕黃色后即把切片放入自來(lái)水沖洗終止反應(yīng)，復(fù)染，脫水透明，中性樹(shù)膠封片。顯微鏡下觀察、采集圖像，采用Imageprofessional Plus 6.0軟件進(jìn)行圖像分析。LIF、IL-17的結(jié)果判讀方法：LIF、IL-17的陽(yáng)性染色模式為胞漿著色，呈現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒；染色判斷標(biāo)準(zhǔn)：陰性胞漿未見(jiàn)著色，弱陽(yáng)性胞漿內(nèi)顆粒較細(xì)，呈淡黃色，顯色高于背景，強(qiáng)陽(yáng)性胞漿內(nèi)陽(yáng)性顆粒粗而多，呈棕黃色甚至棕褐色，顯色明顯高于背景。光鏡下，全視野無(wú)偏采樣方法，每張切片選取5個(gè)視野，進(jìn)行圖像分析，測(cè)量每個(gè)視野中LIF、IL-17陽(yáng)性表達(dá)區(qū)域的平均光密度值(mean optical density，MOD)，取平均值為該樣本MOD值。酶聯(lián)免疫吸附法：多裂肌上清液采用雙抗體夾心ELISA方法，參照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 組織形態(tài)學(xué)變化

空白組：縱切面可見(jiàn)排列緊密、規(guī)律的縱向肌纖維，肌纖維粗細(xì)均勻，肌間隙大小基本一致，可見(jiàn)有若干個(gè)胞核分布于每個(gè)肌纖維膜下。橫切面可見(jiàn)肌細(xì)胞呈較為規(guī)則的多邊形，大小均勻，排列整齊，肌間隙大小一致，一個(gè)或數(shù)個(gè)胞核位于細(xì)胞的邊緣。見(jiàn)圖1AB。

模型對(duì)照組：縱切面和橫切面觀察均與空白組類似，偶見(jiàn)細(xì)胞間質(zhì)輕微水腫，肌纖維排列仍整齊，形態(tài)未見(jiàn)明顯異常。見(jiàn)圖1CD。

模型組：縱切面可見(jiàn)肌纖維有斷裂，排列不齊，肌細(xì)胞出現(xiàn)少量損傷壞死，肌間隙有炎細(xì)胞浸潤(rùn)。橫切面可見(jiàn)肌細(xì)胞大小不一，形態(tài)各異，有明顯的壞死，肌間隙有大量的炎細(xì)胞分布。見(jiàn)圖1EF。

注： A.空白組(縱切面)；B.空白組(橫切面)； C.模型對(duì)照組(縱切面)；D.模型對(duì)照組(橫切面)； E.模型組(縱切面)；F.模型組(橫切面)

圖1 各組大鼠腰多裂肌1天HE染色(×100)

2.2 免疫組化法檢測(cè)大鼠多裂肌IL-17及LIF的表達(dá)

結(jié)果如表1所示，針刺1天：與模型組比較，委中組、腎俞組IL-17表達(dá)含量減少(P<0.01)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；針刺3天：與模型組比較，委中組、腎俞組 IL-17表達(dá)含量減少(P<0.01，P<0.05)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；針刺7天：與模型組比較，模型對(duì)照、委中、腎俞組IL-17表達(dá)含量減少(P<0.01)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。各組大鼠不同時(shí)段腰多裂肌IL-17表達(dá)免疫組化染色結(jié)果見(jiàn)圖2。

注：A.空白組;B.模型對(duì)照組;C.模型組1天;D.電針委中組1天;E.電針腎俞組1天;F.模型組3天;G.電針委中組3天; H.電針腎俞組3天;I.模型組7天;J.電針委中組7天; K.電針腎俞組7天

圖2 各組大鼠不同時(shí)段腰多裂肌IL-17表達(dá)免疫組化染色(×100)

表1 各組大鼠不同時(shí)段多裂肌IL-17表達(dá)MOD值比較

注： 與空白組比較，aP<0.01；與模型組比較，bP<0.01,cP<0.05；與電針腎俞組比較，dP<0.05。

結(jié)果如表2顯示，針刺1天：與空白組比較，模型組、委中組、腎俞組LIF表達(dá)含量迅速增加(P<0.01)，模型對(duì)照組表達(dá)含量有所升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與模型組比較，委中組、腎俞組LIF表達(dá)含量增加(P<0.01)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；針刺3天：與空白組比較，模型組、委中組、腎俞組LIF表達(dá)含量增加(P<0.01)，模型對(duì)照組表達(dá)含量增加，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與模型組比較，委中組LIF表達(dá)含量升高(P<0.01)，腎俞組表達(dá)含量降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量升高(P<0.01)；針刺7天：與空白組比較，對(duì)照、模型、委中、腎俞組LIF表達(dá)含量增加(P<0.01)；與模型組比較，委中組LIF表達(dá)含量增加(P<0.01)，腎俞組表達(dá)含量降低，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。各組大鼠不同時(shí)段腰多裂肌LIF表達(dá)免疫組化染色結(jié)果見(jiàn)圖3。

表2 各組大鼠不同時(shí)段多裂肌LIF表達(dá)MOD值比較

注： 與空白組比較，aP<0.01；與模型組比較，bP<0.01,cP<0.05；與電針腎俞組比較，dP<0.05。

2.3 酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)大鼠多裂肌IL-17和LIF的表達(dá)

注：A.空白組;B.模型對(duì)照組;C.模型組1天;D.電針委中組1天;E.電針腎俞組1天;F.模型組3天;G.電針委中組3天; H.電針腎俞組3天;I.模型組7天;J.電針委中組7天; K.電針腎俞組7天

圖3 各組大鼠不同時(shí)段腰多裂肌LIF表達(dá)免疫組化染色(×100)

結(jié)果如表3所示，針刺1天：與空白組比較，模型組、腎俞組IL-17表達(dá)含量增加(P<0.01)；與模型組比較，模型對(duì)照組、委中組IL-17表達(dá)含量減少(P<0.01)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量減少(P<0.05)；針刺3天：與空白組比較，模型對(duì)照組、模型組、腎俞組IL-17表達(dá)含量增加(P<0.01)；委中組IL-17(P<0.05)；與模型組比較，委中組IL-17表達(dá)含量減少(P<0.01)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量減少，但差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；針刺7天：與空白組比較，模型對(duì)照、模型、委中、腎俞組IL-17表達(dá)含量增加(P<0.01)；與模型組比較，模型對(duì)照、委中、腎俞組IL-17表達(dá)含量減少(P<0.01)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表3 各組大鼠不同時(shí)段多裂肌IL-17表達(dá)量比較

注： 與空白組比較，aP<0.01,bP<0.05；與模型組比較，cP<0.05；與電針腎俞組比較，dP<0.05。

結(jié)果如表4所示，針刺1天：與空白組比較，模型組、委中組、腎俞組LIF表達(dá)含量迅速升高(P<0.01)，模型對(duì)照組表達(dá)含量有所升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與模型組比較，委中組、腎俞組LIF表達(dá)含量升高(P<0.01、P<0.05)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；針刺3天：與空白組比較，模型組、委中組、腎俞組LIF表達(dá)含量增加(P<0.01)，模型對(duì)照組表達(dá)含量增加，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與模型組比較，委中組LIF表達(dá)含量升高(P<0.01)，腎俞組表達(dá)含量降低(P>0.05)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量升高(P<0.01)；針刺7天：與空白組比較，對(duì)照、模型、委中、腎俞組LIF表達(dá)含量增加(P<0.01)；與模型組比較，委中組LIF表達(dá)含量增加(P<0.01)，腎俞組表達(dá)含量降低(P>0.05)；與電針腎俞組比較，委中組表達(dá)含量升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

表4 各組大鼠不同時(shí)段多裂肌LIF表達(dá)量比較

注： 與空白組比較，aP<0.01；與模型組比較，bP<0.01,cP<0.05；與電針腎俞組比較，dP<0.01,eP<0.05。

3 討論

骨骼肌損傷后，炎性壞死組織的降解和吸收以及肌纖維的修復(fù)和再生是“祛邪”“生新”的過(guò)程，針刺能疏通經(jīng)絡(luò)、行氣活血、祛瘀生新，促進(jìn)組織的修復(fù)和再生。電針是臨床上治療骨骼肌損傷的重要手段，在輔助針刺鎮(zhèn)痛和促進(jìn)骨骼肌損傷修復(fù)中療效較佳。委中和腎俞是臨床治療腰痛使用頻率最高的前兩位效穴[15]?！把澄星蟆笔恰端目傃ǜ琛穼?duì)委中治療腰痛特異性療效的經(jīng)典總結(jié)。作為膀胱經(jīng)的下合穴，委中穴在臨床上多用來(lái)治療急性腰扭傷、脊柱強(qiáng)直、坐骨神經(jīng)痛、腰椎間盤突出癥等急性腰背痛；而腎俞穴是治療腰痛的局部取穴，也是腎的背俞穴，多用來(lái)治療慢性腰肌勞損，腎虛腰痛、慢性疲勞綜合征等慢性病癥。

骨骼肌損傷后，首先在損傷的局部出現(xiàn)肌纖維結(jié)構(gòu)的破壞、變性和壞死，之后炎癥細(xì)胞和致炎因子浸潤(rùn)至損傷部位。IL-17是由TH17細(xì)胞分泌的一種強(qiáng)有力的前炎癥細(xì)胞因子，具有強(qiáng)大的募集中性粒細(xì)胞及促進(jìn)多種炎性細(xì)胞因子釋放的作用，可以激活以及刺激巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生多種致炎因子，包括白介素-1、白介素-6、腫瘤壞死因子α、化學(xué)增活素、金屬蛋酶和誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶等[16]，從而導(dǎo)致炎癥的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示多裂肌損傷后模型組IL-17大量表達(dá)，且呈現(xiàn)不同時(shí)相的遞增趨勢(shì)，電針組可明顯降低IL-17含量的表達(dá)，且電針委中組降幅最大，這說(shuō)明電針委中組在骨骼肌損傷早期可能通過(guò)下調(diào)前炎癥因子IL-17的過(guò)度表達(dá)，降低炎癥反應(yīng)的劇烈程度，縮短肌細(xì)胞壞死的進(jìn)程，從而發(fā)揮“祛邪”“生新”的作用，促進(jìn)骨骼肌修復(fù)。

骨骼肌是人體最大的內(nèi)分泌器官，骨骼肌損傷后，其分泌的肌肉因子可通過(guò)自分泌或旁分泌的形式作用于骨骼肌或者其他的組織和器官[8-9]。目前發(fā)現(xiàn)的肌肉因子包括白介素-6、白介素-15、肌肉素、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子等[7,16]。作為白介素-6家族的重要成員，LIF在促進(jìn)骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖[18]、促進(jìn)骨骼肌中葡萄糖的攝取[19-20]，以及促進(jìn)骨骼肌損傷修復(fù)[11]和加速骨骼肌再生[17]方面有重要作用。

在完整未損傷的小鼠[21]和人類[22]骨骼肌中LIF mRNA的表達(dá)量非常低，在創(chuàng)傷和肌營(yíng)養(yǎng)不良的肌肉中其表達(dá)量顯著升高[23-24]。Srikuea等[25]發(fā)現(xiàn)wistar大鼠腓腸肌挫傷后3小時(shí)，LIF mRNA是非損傷對(duì)照組的7倍，LIF mRNA在腓腸肌挫傷后6 小時(shí)的表達(dá)量是非挫傷對(duì)照組的9倍，之后它的表達(dá)量緩慢下調(diào)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：造模1、3、7天后，空白組LIF表達(dá)含量較低，而模型對(duì)照組、模型組、電針委中組、電針腎俞組的LIF表達(dá)含量出現(xiàn)先增高后緩慢下調(diào)的趨勢(shì)與Srikuea的研究一致，其中電針組的LIF表達(dá)含量高于模型組，電針委中組高于電針腎俞組，說(shuō)明電針委中和電針腎俞均可促進(jìn)LIF含量的表達(dá)，參與肌肉的損傷修復(fù)，但電針委中組作用更佳。

綜上，電針干預(yù)治療可下調(diào)IL-17的過(guò)度表達(dá)，減輕炎癥反應(yīng)的劇烈程度，縮短骨骼肌壞死進(jìn)程；電針干預(yù)可促進(jìn)LIF的適度表達(dá)，促進(jìn)骨骼肌中葡萄糖的攝取；電針委中在骨骼肌損傷早期可減輕肌纖維壞死程度，促進(jìn)肌纖維的有序排列，加速損傷肌纖維的再生，這為骨骼肌損傷早期針刺遠(yuǎn)端取穴療效優(yōu)于局部取穴提供重要依據(jù)。

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(本文編輯： 韓虹娟)

Effects of electroacupuncture “Weizhong” (BL 40) on the expression of LIF and IL-17 in rats with multifidus muscle injury

ZOUDehui，LUZongxiao，YANJun，etal.

Acupuncture-MoxibustionandTuina，BeijingUniversityofTraditionalChineseMedicine，Beijing100029，China

ZHANGLi，E-mail:zhangli1572@sina.com

Objective To observe the effect of electroacupuncture (EA) stimulate at “Weizhong”(BL 40) on the expression of leukaemia inhibi-tory factor(LIF)and interleukin-17(IL-17)in rats with multifidus muscle injury.Methods A total of 90 rats were randomly divided into blank group, model control group, model group, EA “Weizhong”(BL 40) group and a EA “Shenshu”(BL 23) group, 18 rats in each group. Each group was randomly divided into a 1-day subgroup, a 3-day subgroup and a 7-day subgroup again, 6 rats in each subgroup. Both sides of multifidus muscle (L4 and L5) were injected with 0.5% bupivacaine. The morphological and ultrastructural changes of multifidus muscle were observed and analyzed with light microscope at 1st, 3rd, 7th day after model establishment. The expression of leukaemia inhibi-tory factor(LIF)and interleukin-17(IL-17)was measured by immunohistochemical method and elisa method.Results After modeling, compared with the blank group, the expression of LIF and IL-17 in multifidus muscle of model group was significantly increased(P<0.01); Compared with the model group, the expression of the LIF were significantly increased(P<0.01) and the expression of IL-17 in multifidus muscle was significantly decreased(P<0.01) in the EA “Weizhong” group and EA “Shenshu” group. Compared with EA “Shenshu” group, the expression of the IL-17 in multifidus muscle was significantly decreased at 1th day; the expression of LIF was significantly increased at 3th day and 7th day. Conclusion EA “Weizhong”(BL 40) can increase the expression of LIF and decrease the expression of IL-17, and can reduce inflammatory reaction and promote skeletal muscle glucose uptake, so as to be beneficial to skeletal muscle repair.

Multifidus muscle; Damage respair; Inflammatory factor; Leukaemia inhibitory factor; Interleukin-17

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81574052)

100029 北京中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院[鄒德輝(碩士研究生)、盧宗孝(碩士研究生)、晏珺(碩士研究生)、陳冬荔(碩士研究生)、張佳怡(碩士研究生)、許玥(碩士研究生)、陳玉佩(博士研究生)、白玉琢(博士研究生)、張莉]；廣東省第二中醫(yī)醫(yī)院(劉通)；北京大學(xué)第三醫(yī)院中醫(yī)科(霍則軍)

鄒德輝(1989- )，2014級(jí)在讀碩士研究生。研究方向：針灸臨床作用機(jī)制研究。E-mail:1198916301@qq.com

張莉(1958- )，女，博士，教授。研究方向：針灸臨床作用機(jī)制研究。E-mail:zhangli1572@sina.com

R245

A

10.3969/j.issn.1674-1749.2017.04.012

2016-10-19)