壞損外擔菌培養(yǎng)液對烤煙幼苗生長及主要生理特性的影響

李春黎　彭麗娟　李繼業(yè)　潘明錦　劉國琴

摘? 要：為探明壞損外擔菌培養(yǎng)液對烤煙幼苗生長和生理特性的影響，研究了壞損外擔菌培養(yǎng)液不同濃度（原液、1/10原液、1/50原液和1/100原液）對烤煙幼苗葉片、莖和根系生長及葉片葉綠體色素、NR活性和根系活力等的影響。結(jié)果表明，處理5 d時，1/50原液最大葉長和根系鮮質(zhì)量最大，與原液達到顯著差異，1/50原液莖高、地上部鮮質(zhì)量和葉綠素b最大，顯著高于其他處理和對照。處理10 d時，1/50原液最大葉長、最大葉寬、葉面積、莖高、莖圍、葉綠素a和類胡蘿卜素含量最高，且顯著高于原液、1/100原液和對照，1/50原液NR活性和根系活力最高，且與原液和對照達到顯著水平。處理15 d時，1/50原液最大葉長、最大葉寬、葉面積、莖高、地上部鮮質(zhì)量、NR活性和根系活力最大，顯著大于其他各處理和對照，而莖圍、根鮮質(zhì)量和葉綠素a含量顯著大于原液、1/100原液和對照。壞損外擔菌培養(yǎng)液不同濃度對烤煙幼苗生長和生理代謝影響不同，1/50原液煙苗生長最好。

關(guān)鍵詞：壞損外擔菌;烤煙幼苗;生長;生理特性

中圖分類號：S572.06?? ???????文章編號：1007-5119（2019）03-0024-07????? DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2019.03.004

To investigate the effects of liquid culture on the growth and physiological characteristics of tobacco seedlings， experiments were carried out to study the effects of different concentrations [the original solution， 1/10 original solution， 1/50 original solution，1/100 original solution]of liquid culture on growth of leaves， stems and roots， chloroplast pigment， nitrate reductase （NR） activity and root activity of tobacco seedlings. On the 5th day， the maximum leaf length and root fresh mass of the 1/50 original solution were significantly different from that of the original solution， and the stem height， shoot fresh mass and content of Chl b were significantly higher than those of other treatments and the control. On the 10th day， the maximum leaf length and width， leaf area， stem height， stem circumference， chlorophyll a and carotenoid content of 1/50 original solution were the highest with significant difference from the original solution， 1/100 original solution and the control. The NR activity and root activity of 1/50 original solution were the highest and significantly higher than the original solution and the control. On the 15th day， the maximum leaf length and width， leaf area， stem height， shoot fresh mass， NR activity and root activity of 1/50 original solution were the highest with significant difference from the other treatments and the control. But the stem circumference， root fresh mass and chlorophyll a content of 1/50 original solution were significantly higher than that of the original solution， 1/100 original solution and control. The effects of different concentrations of liquid culture were different on the growth and physiological characteristics of tobacco seedlings. The growth of tobacco seedlings was the best in 1/50 original solution.

; tobacco seedlings; growth; physiological characteristics

微生物提取液對植物生長發(fā)育有一定的調(diào)控作用。已有研究表明，在辣椒、番茄、菠菜、玉米和煙草等作物上用一定濃度的有效微生物群稀釋液浸種、作基肥或苗期噴施等能明顯促進種子發(fā)芽和苗期生長。

生物菌劑對烤煙幼苗生長也具有一定影響。喻會平等研究發(fā)現(xiàn)木霉菌（ sp.）提高烤煙株高、鮮質(zhì)量、根長和莖粗，葉片葉綠素含量和脯氨酸含量顯著增加。楊軍偉等研究發(fā)現(xiàn)苗床添加EM菌和膠質(zhì)芽孢桿菌（）可不同程度提高烤煙發(fā)芽率并促進幼苗生長。研究者進一步探討了微生物菌劑影響植物生長發(fā)育和生理代謝的機制，認為可能是微生物代謝產(chǎn)物影響了植物的生長和生理反應。李海碧研究發(fā)現(xiàn)接種假單胞菌（）能顯著提高甘蔗的株高和鮮質(zhì)量，可能與影響甘蔗葉片的IAA含量有關(guān)。

劉愛英等與郭春秋等研究表明，外擔菌屬（）真菌培養(yǎng)液能刺激蘿卜和水稻種子萌發(fā)和根生長。本課題組從茶葉葉片上分離壞損外擔菌（），發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)液中含有玉米素、赤霉素和3-吲哚丁酸等植物生長物質(zhì)。培育壯苗是烤煙生產(chǎn)的重要環(huán)節(jié)，迄今，還未有外擔菌對煙草調(diào)控作用的研究報道。為此，本研究以烤煙品種K326為試驗材料，研究壞損外擔菌不同濃度培養(yǎng)液對烤煙幼苗生長及主要生理特性的影響，以期為烤煙壯苗生產(chǎn)及壞損外擔菌劑的開發(fā)提供依據(jù)。

1? 材料與方法

1.1? 試驗材料

供試烤煙品種為K326。壞損外擔菌（）培養(yǎng)液制備用馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基。置于25 ℃，130 r/min的恒溫搖床內(nèi)培養(yǎng)5～7 d后，5000 r/min離心5 min，上清液即為試驗用壞損外擔菌培養(yǎng)原液。

1.2? 試驗設(shè)計

試驗在貴州大學園藝實驗室進行。2018年1月13日播種于12孔育苗盒（單孔長72 mm、寬49 mm、高62 mm），每個育苗盒加入0.84 L水，1孔1苗。煙苗長至大十字期時，于4月6日開始對葉面噴施壞損外擔菌培養(yǎng)液，此后每隔5 d（即4月11日和4月16日）噴施1次，總共噴施3次，每次噴施25 mL。4月6日（0 d）、4月11日（5 d）、4月16日（10 d）和4月21（15 d）測定相關(guān)農(nóng)藝性狀及生理指標。壞損外擔菌培養(yǎng)液處理為原液、1/10原液、1/50原液和1/100原液，以噴施蒸餾水為對照（CK）。每處理重復5次，每重復1盒。

1.3? 測定內(nèi)容及方法

1.3.1? 農(nóng)藝性狀的測定? 參照YC/T142—2010 煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查測量方法執(zhí)行。

1.3.2 ?生理代謝指標的測定 ?按文獻[11]測定葉綠體色素含量、可溶性蛋白含量和硝酸還原酶（NR）活性。根系活力測定用TTC法。

1.3.3? 數(shù)據(jù)處理方法? 所有數(shù)據(jù)均采用Excel 2013整理，采用DPS 7.05軟件進行LSD分析。

2? 結(jié)? 果

2.1? 壞損外擔菌培養(yǎng)液對烤煙幼苗素質(zhì)的影響

2.1.1? 對烤煙幼苗葉片生長的影響? 由表1可以看出，處理第5天，各處理葉片最大葉寬和葉面積無顯著差異，1/50原液與原液葉片最大葉長達到顯著差異。處理第10天，各處理烤煙幼苗的最大葉長、最大葉寬和葉面積有明顯的差異。處理第15天，1/10原液、1/50原液和1/100原液最大葉長和葉面積顯著高于原液和對照，其中以1/50原液增長最高，最大葉長和葉面積分別比對照增加了53.62%和95.49%，其次為1/10原液，最后是1/100原液，1/50原液最大葉寬增加最快，比對照提高了26.96%，其次是1/10原液和1/100原液。

2.1.2 ?對烤煙幼苗莖生長的影響 ?表2可見，處理第5天，1/50原液莖高最大，顯著高于其他各處理。處理第10天，1/50原液莖高和莖圍最大，其次是1/10原液，都顯著大于對照，原液莖高和莖圍與對照無顯著差異。處理第15 天，1/50原液莖高增長最高，分別比對照增加了82.47%和17.42%，1/10原液次之，分別比對照增加了74.20%和10.97%，1/100原液莖高顯著低于1/10原液和1/50原液。

2.1.3? 對烤煙幼苗根系和地上部生物量的影響? 處理后第5天（表3），1/50原液的根系鮮質(zhì)量和地上部鮮質(zhì)量最大，1/50原液根系鮮質(zhì)量顯著大于原液，地上部鮮質(zhì)量顯著大于其他處理和對照。處理后第10天，1/50原液的根系鮮質(zhì)量顯著高于其他各處理和對照，地上部鮮質(zhì)量顯著高于原液和對照，與1/10原液和1/100原液的地上部鮮質(zhì)量沒有顯著差異。第15天時，1/50原液的根鮮質(zhì)量顯著比原液、1/100原液和對照高，比對照提高了48.94%;1/50原液的地上部鮮質(zhì)量顯著高于其他各處理和對照，1/10原液和1/100原液的地上部鮮質(zhì)量之間沒有顯著差異，但顯著高于原液和對照。處理后第15天，1/10原液的根冠比顯著高于原液和對照。

2.2? 壞損外擔菌培養(yǎng)液對烤煙幼苗生理代謝的影響

2.2.1? 對烤煙幼苗葉片葉綠體色素的影響? 由表4可見，處理后第5天，1/50原液的葉綠素b含量顯著高于原液、1/10原液和1/100原液，原液和1/10原液類胡蘿卜素含量顯著比對照高。處理后第10天，1/50原液的葉綠素a含量、葉綠素b含量和類胡蘿卜素含量都顯著高于其他3個處理和對照。處理后第15天，1/50原液的葉綠素a含量、葉綠素b含量和類胡蘿卜素含量最高，且葉綠素a含量和類

胡蘿卜素含量顯著高于原液、1/100原液和對照。

2.2.2? 對烤煙幼苗葉片可溶性蛋白含量的影響? 由表5可知，處理5 d時各處理可溶性蛋白含量差異都未達顯著水平。處理第10天，1/10原液可溶性蛋白顯著高于原液，與其他各處理和對照差異未達到顯著水平。15 d時，1/10原液可溶性蛋白顯著高于其他各處理和對照。

2.2.3? 對烤煙幼苗葉片NR活性的影響? 圖1可見，處理5 d，1/10原液和1/50原液的NR活性顯著高于其他處理和對照。處理10 d，1/50原液NR活性最高，且與原液和對照達到顯著差異。處理15 d，1/50原液NR活性顯著高于其他各處理和對照，1/10原液和1/100原液之間無顯著差異，但都顯著高于原液。

2.2.4? 對烤煙幼苗根系活力的影響? 由圖2可知，處理第5天時各處理烤煙幼苗根系活力無顯著差異。處理第10天時，1/50原液的根系活力最高，依次為1/100原液、1/10原液、對照和原液，1/50原液的根系活力顯著高于1/10原液、對照和原液。處理第15天時，根系活力與處理10 d時呈現(xiàn)相同的變化趨勢，不同的是1/50原液顯著高于其他處理和對 照。

3? 討? 論

3.1? 壞損外擔菌培養(yǎng)液對烤煙幼苗生長的影響

有些微生物能產(chǎn)生調(diào)控植物生長的物質(zhì)，如GA最初就是從水稻惡苗病菌（）培養(yǎng)液中發(fā)現(xiàn)并分離提取出來，能夠促進植物莖節(jié)的伸長生長。壞損外擔菌培養(yǎng)液對烤煙幼苗生長有調(diào)控作用，且濃度不同作用效果不同。1/100原液、1/50原液和1/10原液壞損外擔菌培養(yǎng)液對葉片都有促進作用，且對葉長促進作用比葉寬大，原液對葉片生長沒有表現(xiàn)明顯的促進作用。黃瑞君研究發(fā)現(xiàn)油茶幼葉受到細麗外擔菌（）的感染后，促進了油茶幼葉細胞分裂和細胞體積膨大。闕生全發(fā)現(xiàn)細麗外擔菌發(fā)酵液中含有IAA，可能是由于IAA進一步調(diào)控了植物生長。壞損外擔菌培養(yǎng)液促進葉片增大，也可能與壞損外擔菌代謝產(chǎn)物產(chǎn)生了促進細胞分裂和細胞膨大的植物生長物質(zhì)IAA、GA和CTK等有關(guān)。

本研究中1/10原液、1/50原液和1/100原液壞損外擔菌培養(yǎng)液促進莖的生長，且莖高的增長率都大于莖圍，說明壞損外擔菌培養(yǎng)液對莖的伸長生長比加粗生長影響大。處理5 d時原液莖高顯著比對照低，在一定程度上抑制莖的伸長生長，這與尹顯 慧等、喻會平等和楊軍偉等在番茄和煙草上研究不同，可能與壞損外擔菌培養(yǎng)液中IAA濃度高有關(guān)。魏林^[19]認為哈茨木霉（）發(fā)酵液對豇豆幼苗的葉片、株高、根系和地上部鮮質(zhì)量都有促進作用，可能是多肽類物質(zhì)起著主要的作用。此外，該研究還發(fā)現(xiàn)壞損外擔菌培養(yǎng)液對根冠比調(diào)控有一個滯后效應，可能是使用葉面噴施的方法有關(guān)。王輝等研究發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌（）和膠凍樣類芽孢桿菌（ ）微生物菌劑處理后，進行蘸根加葉面噴施的處理顯著比單獨一種方法好。

3.2? 壞損外擔菌培養(yǎng)液對烤煙幼苗生理特性的影響

根系活力的強弱不僅反映根系新陳代謝的能力，還影響著地上部的生理代謝。本研究發(fā)現(xiàn)壞損外擔菌培養(yǎng)液能提高煙苗根系活力，這與許多研究結(jié)果相類似，如劉先良等認為接種5% AM真菌的育苗基質(zhì)能顯著調(diào)高煙苗的根系活力，可能與AM真菌可誘導植物根系產(chǎn)生多胺有關(guān)。馮莉等用熒光假單胞菌（）進行灌根處理，煙草根系活力顯著提高。魏林研究認為在移栽時對豇豆幼苗進行哈茨木霉發(fā)酵液蘸根，可明顯增強后期根系活力，并能保持較高的根系活力至生長后期。

壞損外擔菌培養(yǎng)液處理后第10天和第15天，1/50原液的烤煙幼苗葉片葉綠素a含量、葉綠素b含量和類胡蘿卜素含量最高。很多研究發(fā)現(xiàn)微生物菌劑對植物的葉綠體色素代謝產(chǎn)生影響。王輝等發(fā)現(xiàn)枯草芽孢桿菌和膠凍樣類芽孢桿菌菌劑處理能夠減緩圓頂期煙株葉片中葉綠素a、葉綠素b的降解，對類胡蘿卜素含量影響較小。王其傳等認為芽孢桿菌（sp.）顯著提高辣椒葉片的葉綠素a和總?cè)~綠素含量。可見，這些微生物在一定程度上影響根系活力強弱和光合色素代謝，且不同微生物及其處理方法和濃度的影響效果是不一樣的。

4 ?結(jié)? 論

1/10原液、1/50原液和1/100原液壞損外擔菌培養(yǎng)液濃度處理5、10和15 d，對烤煙幼苗葉片、莖、根系生長和生理代謝都有一定促進作用，1/50原液促進作用最強，其次是1/10原液，最后是1/100原液，3種濃度下，隨處理時間和次數(shù)的增加促進作用逐漸增強。原液對幼苗葉片、莖、根系生長沒有表現(xiàn)促進作用，處理5 d時莖高在一定程度上還出現(xiàn)負增長的變化，表現(xiàn)出一定的抑制作用。

參考文獻

王其傳，孫錦，束勝，等. 微生物菌劑對日光溫室辣椒生長和光合特性的影響[J]. 南京農(nóng)業(yè)大學學報，2012，35（6）：7-12.

WANG Q C， SUN J， SHU S， et al. Effects of microbial agents on growth and photosynthesis of pepper in solar greenhouse[J]. Journal of Nanjing Agricultural University， 2012， 35（6）： 7-12.

尹顯慧，田雪蓮，龍友華，等. 微生物菌劑對番茄生長發(fā)育及產(chǎn)量的影響[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學，2016，55（6）：1466-1469.

YIN X H， TIAN X L， LONG Y H， et al. Effect of different concentrations of microbial agents on the growth and yield of tomato[J]. Hubei Agricultural Sciences， 2016， 55（6）： 1466-1469.

雷先德，李金文，徐秀玲，等. 微生物菌劑對菠菜生長特性及土壤微生物多樣性的影響[J]. 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學報，2012，20（4）：488-494.

LEI X D， LI J W， XU X L， et al. Effect of microbial inoculants on spinach growth characteristics and soil microbial diversity[J]. Chinese Journal of Eco-Agriculture， 2012， 20（4）： 488-494.

千淋兆，龔明波，顧金剛，等. 溶磷微生物菌劑對土壤營養(yǎng)元素及玉米生長的影響[J]. 農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境學報，2014，31（5）：425-431.

QIAN L Z， GONG M B， GU J G， et al. Effects of phosphate-solubilizing microbial inoculums on soil nutrients and corn growth[J]. Journal of Agricultural Resources and Environment， 2014， 31 （5）： 425-431.

喻會平，龍友華，安啟菲，等. 生物菌劑對煙草種子萌發(fā)及幼苗生長的影響[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學，2016，44（3）：47-52.

YU H P， LONG Y H， AN Q F， et al. Effects of biological agents on seed germination and seedling growth of tobacco[J]. Guizhou Agricultural Sciences， 2016， 44（3）： 47-52.

楊軍偉，張宇羽，蔡艷，等. 苗床添加微生物菌肥對2種煙草種子發(fā)芽率和幼苗生長的影響[J]. 農(nóng)學學報，2017，7（4）：39-45.

YANG J W， ZHANG Y Y， CAI Y， et al. Effect of microbial fertilizer on fermination rate and seedling growth of tobacco in seedbed[J]. Journal of Agriculture， 2017， 7（4）： 39-45.

李海碧. 甘蔗根際假單胞菌的分離鑒定及其對甘蔗的促生作用[D]. 南寧：廣西大學，2017.

LI H B. species from sugarcane rhizopheric soil and their influence on the growth of sugarcane[D]. Nanning： Guangxi University， 2017.

劉愛英，梁宗琦，康冀川，等. 茶餅病菌分生孢子階段分離培養(yǎng)極其發(fā)酵液對植物的刺激作用[J]. 菌物系統(tǒng)，2002，21（3）：437-439.

LIU A Y， LIANG Z Q， KANG J C， et al. Isolation and culture of the conidial stage of and stimulation of the fungal fermented liquid to plant[J]. Mycosystema， 2002， 21（3）： 437-439.

郭春秋，王文龍，吳娜. 茶餅病菌的分離培養(yǎng)及其刺激作用[J]. 吉首大學學報（自然科學版），2005，26（4）：103-107.

GUO C Q， WANG W L， WU N. Culture of （Shirai） Syd and its stimulating effects[J]. Journal of Jishou University （Natural Science Edition）， 2005， 26（4）： 103-107.

趙晨心，何珺，彭麗娟. 壞損外擔菌（）植物生長物質(zhì)種類及含量研究[J]. 貴州大學學報（自然科學版），2018，35（5）：16-20.

ZHAO C X， HE J， PENG L J. Research on the species and content of plant growth substances in [J]. Journal of Guizhou University （Natural Sciences）， 2018， 35（5）： 16-20.

鄒琦. 植物生理生化實驗指導[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1995.

ZOU Q. Guidance of plant physiology and biochemistry experiment[M]. Beijing： China Agriculture Press， 1995.

鄭堅，陳秋夏，金川，等. 不同TTC法測定楓香等闊葉樹容器苗根系活力探討[J]. 浙江農(nóng)業(yè)科學，2008（1）：39-42.

ZHENG J， CHEN Q X， JING C， et al. Determination of root activity of container seedlings of maple and other broad-leaved trees by different TTC methods[J]. Zhejiang Agricultural Sciences， 2008（1）： 39-42.

陳曉亞，薛紅. 植物生理與分子生物學[M]. 第4版. 北京：高等教育出版社，2018：543-549.

CHEN X Y， XUE H. Plant physiology and molecular biology[M]. 4 Edition. Beijing： Higher Education Press， 2018： 543-549.

MORRONE D， CHAMBERS J， LOWRY L， et al. Gibberellin biosynthesis in bacteria： Separate ent-copalyl diphosphate and ent-kaurene synthases in [J]. FEBS Letters， 2009，

583（2）： 475-480.

SALAZAR-CEREZO S， MARTínez-MONTIEL N， GARCíA-SáNCHEZ J， et al. Gibberellin biosynthesis and metabolism： A convergent route for plants， fungi and bacteria[J]. Microbiological Research， 2018， 208（3）： 85-98.

TUDZYNSKI B， H?LTER K. Gibberellin biosynthetic pathway in ： evidence for a gene cluster[J]. Fungal Genet. Biol.， 1998， 25 （3）： 157-170.

黃瑞君. 細麗外擔菌感染油茶的形態(tài)特征和轉(zhuǎn)錄組學研究[D]. 咸陽：西北農(nóng)林科技大學，2017.

HUANG R J. Morphological characteristics and transcriptomics of infected with （Shirai） Syd[D]. Xianyang： Northwest A&F University， 2017.

闕生全. 油茶葉茶餅病病理學及其病原菌生物學特性的研究[D]. 南昌：南昌大學，2007.

QUE S Q. Studies on pathology of blister blight and biological characteristics of pathogen[D]. Nanchang： Nanchang University， 2007.

魏林. 哈茨木霉（）發(fā)酵液中對豇豆具有促生活性物質(zhì)的研究[D]. 長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學，2005.

WEI L. Study on the growth promoting substance of the fermented liquid of on cowpea[D]. Changsha： Hunan Agricultural University， 2005.

王輝，李小艷，云菲，等. 微生物菌劑對烤煙光合特性及產(chǎn)質(zhì)量的影響[J]. 江西農(nóng)業(yè)學報，2018，30（6）：52-56.

WANG H， LI X Y， YUN F， et al. Effects of microbial agent on photosynthetic characteristics， yield and quality of flue-cured tobacco[J]. Acta Agricultural Jiangxi， 2018， 30（6）： 52-56.

劉小剛，張富倉，楊啟良，等. 玉米葉綠素、脯氨酸、根系活力對調(diào)虧灌溉和氮肥處理的響應[J]. 華北農(nóng)學報，2009，24（4）：106-111.

LIU X G， ZHANG F C， YANG Q L， et al. Response of chlorophyll， proline and root activity of maize to regulated deficit irrigation and N fertilization treatment[J]. Acta Agricultural Boreali-Sinica， 2009， 24（4）： 106-111.

魏道智，寧書菊，林文雄. 小麥根系活力變化與葉片衰老的研究[J]. 應用生態(tài)學報，2004，15（9）：1565-1569.

WEI D Z， NING S J， LIN W X. Relationship between wheat root activity and left senescence[J]. Chinese Journal of Applied Ecology， 2004， 15（9）： 1565-1569.

王飛飛，張善平，邵立杰，等. 夏玉米不同土層根系對花后植株生長及產(chǎn)量形成的影響[J]. 中國農(nóng)業(yè)科學，2013，46（4）：4007-4017.

WANG F F， ZHANG S P， SHAO L J， et al. Effect of root in different soil layers on plant growth and yield formation after an thesis in summer maize[J]. Scientia Agricultura Sinica， 2013， 46（4）： 4007-4017.

ZHOU Y， YANG X W， ZHOU S M， et al. Activities of key enzymes in root NADP-dehydrogenase system and their relationships with root vigor and grain yield formation in wheat[J]. Scientia Agricultura Sinica， 2018， 51（11）： 2060-2071.

劉先良，張春，鄧茂，等. 施用生物炭和AM真菌對烤煙根系形態(tài)、生理特性及化學成分的影響[J]. 煙草科技，2017，50（8）：30-36.

LIU X L， ZHANG C， DENG M， et al. Effects of biocarbon and AM fungi on root morphology， physiological characteristics and chemical constituents of flue-cured tobacco[J]. Tobacco Science & Technology， 2017， 50（8）： 30-36.

WU Q S，HE X H，ZOU Y N，et al. Arbuscular mycorrhizas alter root system architecture of through regulating metabolism of endogenous polyamines[J]. Plant Growth Regulation， 2012， 68（1）： 27-35.馮莉，張玲華，田興山. 熒光假單胞菌對煙草根際微生物種群數(shù)量及根系活力的影響[J]. 農(nóng)業(yè)環(huán)境科學學報，2007（S2）：537-539.

FENG L， ZHANG L H， TIAN X S. Effects of on rhizosphere microorganisms and root activity of tobacco[J]. Journal of Agro-Environment Science， 2007（S2）： 537-539.