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    不同國別辣木抗氧化活性研究

    2019-09-10 07:22:44田先嬌楊新周
    現(xiàn)代鹽化工 2019年3期
    關鍵詞:辣木抗氧化

    田先嬌 楊新周

    摘? ?要:為了研究辣木提取物體外抗氧化活性,以乙醇、甲醇、丙酮為萃取溶劑,用超聲波提取制備提取物,考察了引種自泰國、緬甸、印度辣木提取物對DPPH自由基活性的清除能力,并將其與多種抗氧化劑進行對照比較。結果表明,引種自3個不同國家的辣木甲醇、乙醇、丙酮提取物與5種標準品的抗氧化能力從強到弱依次為:沒食子酸、咖啡酸、蘆丁、甲醇提取物、乙醇提取物、丙酮提取物,泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力均大于標準品香草酸、對香豆酸。乙醇、丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力均大于對香豆酸。

    關鍵詞:辣木;抗氧化;DPPH自由基

    辣木(Moringa oleifera,或drumstick tree,horseradish tree),為辣木科辣木屬多年生植物,是原產(chǎn)于印度北部喜馬拉雅山南麓的速生樹種,耐旱力強,喜生于砂壤土[1]。辣木的根、莖、葉、花、種子、枝和樹皮均含有豐富的營養(yǎng)和藥用成分,含有豐富的蛋白質(zhì)、維生素,含有大量人體必需的微量元素,具有降血壓、治療貧血、抑制病菌、控制糖尿病、克服失眠等作用[2]。目前,國內(nèi)外對辣木的應用主要集中在功能食品的開發(fā)、飼料、水的凈化、化妝品原料及植物生長促進劑和殺菌劑等方面。而對辣木葉的抗氧化活性研究較少,本文以引種自泰國、緬甸、印度的辣木為原料,對其辣木葉甲醇、乙醇、丙酮抗氧化能力進行測定,為辣木開發(fā)成天然抗氧化劑和辣木的綜合開發(fā)提供一定的理論基礎。

    1? ? 實驗部分

    1.1? 主要儀器和試劑

    V-1100型可見分光光度計(上海美譜達儀器有限公司),超聲波(SK2200H),電子天平(AR224CN),電熱真空干燥箱(ZK- 82J 型),旋轉蒸發(fā)儀(EYELA N—1100)。

    辣木(采于云南天佑公司),DPPH 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,純度大于99.0%(國藥集團化學試劑有限公司)。槲皮素、山奈酚、咖啡酸、蘆丁、沒食子酸、對香豆酸(購自國藥集團浙江華東醫(yī)藥有限公司,純度大于98%)。乙醇、甲醇、丙酮等試劑均為分析純,實驗用水為二次蒸餾水。

    1.2? ? 實驗內(nèi)容及方法

    1.2.1? DPPH儲備液的制備

    精確稱取DPPH 10 mg,用無水乙醇溶解定容至100 mL容量瓶中,得質(zhì)量濃度為DPPH 0.1 mg/mL的儲備溶液。用時稀釋成質(zhì)量濃度為0.024 mg/mL的標準溶液。

    1.2.2? 辣木提取物的制備

    乙醇提取物的制備:精確稱取2.000 0 g辣木樣品于100 mL的錐形瓶中,依次加入20 mL,20 mL,20mL的無水乙醇溶液,封口,超聲提取3次,每次45 min,合并3次濾液,經(jīng)旋轉蒸發(fā)儀濃縮,定容到25 mL,備用。

    同法制備辣木甲醇提取物、丙酮提取物。

    1.2.3? 清除DPPH自由基能力的測定

    準確移取4.5 mL DPPH標準溶液,依次加入一定體積的提取物溶液于10 mL比色管中,定容至5 mL,置于暗處30 min,在波長517 nm下測定空白DPPH的吸光度值記為A空白和加入提取物后DPPH的吸光度值為A樣品,按下式計算自由基清除率。

    清除能力=[A空白-A樣品]/A空白×100%

    2? ? 結果與討論

    2.1? 不同國家引種辣木甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力

    甲醇提取液清除DPPH活性如圖1所示。

    根據(jù)上述實驗方法,測定3個不同國家辣木甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力,實驗結果如圖1所示。根據(jù)實驗得出:泰國、緬甸、印度辣木甲醇提取物質(zhì)量濃度與清除率方程分別為:

    Y=249.22X+0.892 6,R=0.993 8,IC=0.197 0 mg/mL(1)

    Y=172.94X+2.643 9,R=0.996,IC=0.273 8 mg/mL(2)

    Y=164.66X-1.316 5,R=0.990 3,IC=0.311 6 mg/mL (3)

    依據(jù)IC50與清除DPPH自由基活性呈反比的關系,結合圖1及IC50可以得出,泰國、緬甸、印度辣木甲醇提取物清除DPPH自由基的由強到弱能力為:泰國、緬甸、印度。

    2.2? 不同國家引種辣木乙醇提取物清除DPPH自由基活性能力

    根據(jù)上述實驗方法,測定3個不同國家辣木甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力,實驗結果如圖2所示,根據(jù)實驗得出,泰國、緬甸、印度辣木甲醇提取物質(zhì)量濃度與清除率方程分別為:

    Y=51.827X+9.178 6,R=0.980 4,IC=0.787 6 mg/mL (4)

    Y=46.691X+10.600 0,R=0.959 4,IC=0.843 8 mg/mL(5)

    Y=48.342X+8.168 8,R=0.986 8,IC=0.865 3 mg/mL(6)

    結合圖2及IC50可以得出,泰國、緬甸、印度辣木乙醇提取物清除DPPH自由基的能力由強到弱為:泰國、緬甸、印度。

    2.3? 不同國家引種辣木丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力

    丙酮提取液清除DPPH活性如圖3所示。

    根據(jù)上述實驗方法,測定3個不同國家辣木丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力,實驗結果如圖3所示,根據(jù)實驗得出,泰國、緬甸、印度辣木丙酮提取物質(zhì)量濃度與清除率方程分別為:

    Y=23.043X+21.699 0,R=0.995 9,IC=1.228 1 mg/mL(7)

    Y=21.997X+9.726 5,R=0.998 8,IC=1.830 8 mg/mL(8)

    Y=19.032X+7.560 1,R=0.966 4,IC=2.229 9 mg/mL(9)

    結合圖3及IC50可以得出,泰國、緬甸、印度辣木丙酮提取物清除DPPH自由基的能力由強到弱為:泰國、緬甸、印度。

    2.4? 幾種對照品清除DPPH自由基活性的能力

    測定蘆丁、沒食子酸、香草酸、咖啡酸、對香豆酸溶液清除DPPH自由基的能力,通過實驗得出蘆丁、沒食子酸、咖啡酸、香草酸、對香豆酸溶液IC50分別為:0.004 3 mg/mL,0.000 9 mg/mL,0.003 3 mg/mL,0.547 1 mg/mL,2.270 0 mg/mL。通過實驗得出幾種標準品抗氧化能力由弱到強順序為:對香豆酸、香草酸、蘆丁、咖啡酸、沒食子酸。

    2.5? 不同地區(qū)辣木樣品不同提取物清除DPPH自由基活性比較

    從圖4可知,引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇、乙醇、丙酮的提取物清除DPPH自由基活性能力由強到弱為:甲醇提取物、乙醇提取物、丙酮提取物,說明引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇提取物抗氧化成分優(yōu)于乙醇提取物和丙酮提取物。

    3? ? 結語

    (1)利用超聲提取法制備了引種自緬甸、泰國、印度辣木的甲醇、乙醇、丙酮提取物,測定其清除DPPH自由基活性的能力。結果表明,引種自不同國家的辣木抗氧化能力存在一定差異,其中,引種自泰國的甲醇提取物抗氧化能力最強,引種自印度的丙酮提取物抗氧化能力最弱。

    (2)引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇、乙醇、丙酮的提取物清除DPPH自由基活性能力由強到弱為:甲醇提取物、乙醇提取物、丙酮提取物。如果要從辣木中分離抗氧化物質(zhì),建議首選甲醇提取物。

    (3)引種自泰國、緬甸、印度的辣木樣品甲醇提取物清除DPPH自由基活性能力均大于標準品香草酸、對香豆酸。乙醇、丙酮提取物清除DPPH自由基活性能力均大于對香豆酸。說明甲醇提取物抗氧化能力強,可能甲醇提取物抗氧化活性成分較豐富。

    [參考文獻]

    [1]劉鳳霞,王苗苗,趙有為,等.辣木中功能性成分提取及產(chǎn)品開發(fā)的研究進展[J].食品科學,2015(19):282-286.

    [2]楊新周,郝志云,董? ?毅,等.不同溶劑和提取方法對白花蛇舌草提取物抗氧化活性的影響[J].貴州農(nóng)業(yè)科學,2014(1):511-515.

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