‘東紅’獼猴桃高效再生體系的建立

呂海燕 李大衛(wèi) 鐘彩虹

摘 要：為有力推動獼猴桃產(chǎn)業(yè)化種苗生產(chǎn)及推廣，快速高效地繁育獼猴桃新種質(zhì)資源，同時為獼猴桃多倍體育種、轉(zhuǎn)基因育種等新興育種技術創(chuàng)造新種質(zhì)資源奠定基礎，該研究以‘東紅’獼猴桃葉片、葉柄為外植體，探討了不同植物生長調(diào)節(jié)劑種類及質(zhì)量濃度組合對不定芽誘導過程中不定芽形成的影響，并研究了不同植物生長調(diào)節(jié)劑對‘東紅’組培苗不定根誘導的影響。結(jié)果表明：‘東紅’再生最佳外植體為葉柄，葉柄不定芽再生最佳培養(yǎng)基為MS + 0.5 μg·mL-1 6-BA + 0.2 μg·mL-1 NAA，不定芽平均再生率為91.2%;不定芽經(jīng)過壯苗培養(yǎng)（MS + 0.2 μg·mL-1 6-BA + 0.05 μg·mL-1 NAA），取2～3 cm高幼苗進行生根誘導，不定根再生率為93%，平均根數(shù)為6條;生根后，種苗移栽成活率在80%以上。初步建立了‘東紅’葉柄高效再生體系，為獼猴桃快速的產(chǎn)業(yè)化種苗生產(chǎn)及推廣提供了有力保證，也為后期獼猴桃育種研究提供理論依據(jù)。

關鍵詞：獼猴桃， ‘東紅’， 再生體系， 葉柄， 移栽

中圖分類號：Q943.1， Q945

文獻標識碼：A

文章編號：1000-3142（2019）04-0464-08

Abstract：In order to promote the massive seedling industrialization and popularization of Actinidia chinensis， and multiply the new seedling resources fast and effectively， and lay foundation for the genetic transformation of kiwifruit，? the petioles and leaves of A. chinensis ‘Donghong’ were chosen as explants， and the effects ofdifferent plant growth regulators on frequencies of callus formation and adventitious bud regeneration were investigated by culturing on the induction medium. Moreover， the influence ofdifferent types of plant growth regulators on the induction of adventitious roots was also analyzed. The results showed that the combination ofdifferent concentrations of 6-BA and NAA had strong effect on the bud regeneration rate， and the optimum combination （MS + 0.5 μg·mL-1 6-BA + 0.2 μg·mL-1 NAA） were obtained， in which the frequency of bud regeneration from leaves and petioles reached 63.4% and 91.2% after 35d culture， respectively. The adventitious bud regeneration rate of petiole explant of A. chinensis ‘Donghong’ was significantly higher than that of leaf explant. The frequency of adventitious bud regeneration from petioles was up to 91.2% and the average amount of regenerated buds for each petiole explant was 9-12. The result suggested that IBA was much more effective than NAA for rooting. The best cencentration of IBA was 0.5 μg·mL-1， and the rate of adventitious root regeneration and the average number of roots per shoot were 93% and 6， respectively. More than 80% of plantlets survived after transplanting. This fast anddirectdiffe-rentiation simplified the process of adventitious bud formationdifferentiated from callus， which shortened the culture process and provided a powerful guarantee for the rapid industrialization of seedling production.

Key words：kiwifruit， Actinidia chinensis ‘Donghong’， regeneration system， petiole， transplanting

獼猴桃資源收集、品種選育始于20世紀初，經(jīng)過一百多年的生產(chǎn)、推廣、發(fā)展已在全球形成近24.5萬hm2的種植規(guī)模，年產(chǎn)值已在百億以上。中國獼猴桃的大規(guī)模種植、生產(chǎn)始于20世紀70年代末，目前中國獼猴桃的種植面積和產(chǎn)量均躍居世界第一（張計育等，2014）。紅肉獼猴桃因其甜濃的風味及豐富的營養(yǎng)，在國內(nèi)外消費市場上頗受消費者的喜愛。從全球不同果肉顏色的獼猴桃種植面積來看，紅肉獼猴桃的種植面積還有進一步的發(fā)展空間（齊秀娟等，2015）。中國科學院武漢植物園從‘紅陽’開放式授粉種子實生后代中，經(jīng)過15 a的種質(zhì)篩選培育獲得一個獼猴桃新品種——‘東紅’獼猴桃，該新品種于2012年12月通過品種審定（國S-SV-AC-031-2012）?！畺|紅’獼猴桃在風味口感、可溶性固形物、維生素含量及耐儲性上都更優(yōu)于‘紅陽’，集早熟、耐儲、優(yōu)質(zhì)為一體的紅肉獼猴桃新品種（黃宏文等，2000;黃宏文，2013）。

隨著中國獼猴桃新品種選育速度的加快，為了更快速地推廣新品種和保留新品種優(yōu)良品質(zhì)，采用獼猴桃的組織培養(yǎng)技術進行繁殖是最快速有效的方法之一。利用組織培養(yǎng)快速高效的繁育大量優(yōu)質(zhì)獼猴桃種苗，將為加速獼猴桃優(yōu)良品種的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)及推廣做出貢獻（隆前進，2010）。近年來，有關獼猴桃組織培養(yǎng)技術的研究已獲得了重要進展。獼猴桃花藥培養(yǎng)、離體胚培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)、葉片、莖段、根、葉柄等器官培養(yǎng)、原生質(zhì)體培養(yǎng)及融合以及新興的生物技術育種都取得了很大的成效（劉錚等，2013;秦永華等，2004）。

基于對‘東紅’獼猴桃優(yōu)良性狀的保存及產(chǎn)業(yè)化種苗生產(chǎn)模式的探討，本研究以‘東紅’獼猴桃的葉片、葉柄為外植體，通過不定芽誘導和生根誘導試驗，建立其快繁再生體系，為‘東紅’獼猴桃快速的產(chǎn)業(yè)化種苗生產(chǎn)及推廣提供有力保證，也為后期獼猴桃倍性育種及遺傳轉(zhuǎn)化育種研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

2015年3月25日從中國科學院武漢植物園獼猴桃國家資源圃采集‘東紅’獼猴桃未木質(zhì)化的嫩枝。用自來水沖洗1 h，在超凈工作臺上用75%酒精浸泡45 s，0.1%升汞10 min，無菌水沖洗4～5次，然后切成1～2個腋芽的莖段，形態(tài)學下端插入MS + 1.0 μg·mL-1 6-BA + 0.2 μg·mL-1 NAA上，置于光培養(yǎng)室光下培養(yǎng)，12 h·d-1，（25 ± 2）℃，21～28d后調(diào)查腋芽萌發(fā)率，并以獲得的無菌試管苗為外植體來源進行再生試驗。

1.2 方法

1.2.1 不定芽的再生 切取試管苗完全展開幼嫩葉片，0.5 cm × 0.5 cm，葉柄及主脈靠葉柄端單獨取出，切成0.5 cm小段，置于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基，附加不同質(zhì)量濃度的6-BA，NAA，以不加任何激素的MS為對照，6-BA質(zhì)量濃度2.0、1.0、0.5 μg·mL-1，NAA質(zhì)量濃度0.1、0.2、0.4 μg·mL-1，隨機設置9個處理，加上對照共10個，每處理3次重復，每個重復15個外植體。接種后置于光照條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)28d后統(tǒng)計不定芽和愈傷再生率，不定芽在最佳不定芽再生培養(yǎng)基上繼代一次后，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)。

1.2.2 不定芽的生根 將生長狀態(tài)相對一致的高 2～3 cm，具3～4片葉的不定芽切下，分別接種到附加有不同質(zhì)量濃度的NAA、IBA的1/2 MS培養(yǎng)基上進行生根培養(yǎng)，以1/2MS為對照，每處理重復3次，每個重復15個不定芽，培養(yǎng)21d后，統(tǒng)計生根率和平均生根數(shù)量。本研究的光培養(yǎng)條件為12 h·d-1光照，光照強度2 500 lx，溫度（25 ± 2） ℃，MS基本培養(yǎng)基添加蔗糖質(zhì)量濃度3×104 μg·mL-1，瓊脂質(zhì)量濃度7.5×103 μg·mL-1，pH 6.0。

1.2.3 種苗的馴化移栽 當組培苗根長1～2 cm時，將瓶苗取出至移栽溫室進行馴化，2～3d后松瓶蓋，一周后取出生根苗，清水洗凈根部培養(yǎng)基，移栽至裝有滅菌基質(zhì)（泥炭土∶草炭土∶珍珠巖=2∶1∶1）的穴盤中。移栽后一到兩周保證環(huán)境溫度20～30 ℃，空氣濕度70%～85%，夏季移栽適當遮陰，兩周后可適當過渡到常規(guī)管理。一個月后統(tǒng)計種苗移栽成活率及生長狀況。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 采用SPSS數(shù)據(jù)分析軟件處理數(shù)據(jù)，進行方差分析。

愈傷再生率=再生愈傷葉片數(shù)（葉柄數(shù)）/接種外植體總數(shù)×100%;不定芽再生率=再生芽葉片數(shù)（葉柄數(shù)）/接種外植體總數(shù)×100%;不定芽生根率=生根芽數(shù)/接種不定芽數(shù)量×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同質(zhì)量濃度組合的植物生長調(diào)節(jié)劑對不定芽形成的影響

外植體接入各處理培養(yǎng)基9～10d后，葉片和葉柄切口處都開始膨大， 部分切口邊緣生成少量愈傷組織并隨之出現(xiàn)增殖生長， 部分切口處直接再生出單個或芽叢狀不定芽。在培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA和NAA，結(jié)果表明不同配比的植物生長調(diào)節(jié)劑對離體葉片和葉柄不定芽再生的影響很大。使用6-BA 0.5 μg·mL-1和NAA 0.2 μg·mL-1濃度組合可以顯著提高葉片和葉柄不定芽再生率，不定芽直接再生率可分別達到63.4%和91.2%，顯著高于其他處理（表1，表2）。

2.2 不同外植體類型對不定芽誘導的比較

以‘東紅’組培苗的葉片、葉柄為外植體對其分化能力進行了比較，發(fā)現(xiàn)在相同植物生長調(diào)節(jié)劑的相同濃度誘導下葉柄的分化能力明顯好于葉片（圖1）。葉片愈傷組織分化率高，且形成的愈傷組織致密，不易分化，直接再生芽多為畸形芽，分化耗時長，大部分葉片外植體分化形成了愈傷組織，影響了直接再生不定芽的進程;葉柄直接再生不定芽多為叢芽， 分化快， 顏色亮綠色。因此，對‘東紅’來說葉柄是更好的分化材料， 所以考慮選擇葉柄為‘東紅’不定芽再生的最佳外植體。

2.3 不同質(zhì)量濃度植物生長調(diào)節(jié)劑對不定芽生根的影響

在‘東紅’再生培養(yǎng)最后的生根階段，為保證用于不定根誘導的不定芽狀態(tài)的相對一致，將再生芽接種至壯苗培養(yǎng)基培養(yǎng)35d后，選擇株高2～3 cm，葉片3～4片的不定芽進行生根誘導，接種到含不同質(zhì)量濃度的NAA和IBA的生根培養(yǎng)基7d后發(fā)現(xiàn)IBA 0.5 μg·mL-1最先產(chǎn)生不定根，隨后其他處理陸續(xù)有不定根產(chǎn)生，21d后統(tǒng)計不定根形成率。由表3可知，不同處理情況下不定芽生根率和平均根數(shù)存在顯著差異。1/2MS培養(yǎng)基附加IBA和NAA均可誘導生根。不同的是IBA誘導生根較早，第9天就能肉眼觀察到不定根，且不定根生長粗壯，數(shù)量多，直接都是從不定芽基部生根，沒有愈傷組織的產(chǎn)生。而NAA誘導生根于不定芽基部容易形成愈傷組織再分化出不定根，但生出的根細長，瘦弱。因此，1/2 MS + 0.5 μg·mL-1 IBA為‘東紅’最適生根培養(yǎng)基。

2.4 種苗移栽

組培種苗煉苗后移栽至滅菌后基質(zhì)中，20d后即有新葉長出，30d后統(tǒng)計成活率在80%以上。生長后期長勢良好，70～90d后即可出圃，此時苗高12.5 cm，含6～8個飽滿芽（圖版I：E、F）。

3 討論

植物生長調(diào)節(jié)劑的種類及濃度是植物組織培養(yǎng)條件摸索的最關鍵的環(huán)節(jié)。在獼猴桃組織培養(yǎng)過程中研究應用較多的的植物生長調(diào)節(jié)劑有細胞分裂素如6-BA、ZT、KT、CPPU等，生長素如NAA、2，4-D、IBA、IAA等（Muleo & Morini，1990;賈?；郏?010;劉小剛等，2013;朱學棟等，2012）。前人研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基中添加1.0～2.0 μg·mL-1的ZT對獼猴桃組培再生及后期瓶苗的生根都有很顯著的促進作用（謝志兵和魯旭東，2003;張遠記和錢迎倩，1996）。細胞分裂素和生長素適宜濃度組合的培養(yǎng)基配方對獼猴桃組織培養(yǎng)過程中愈傷的分化及芽的再生有很好的促進作用。研究發(fā)現(xiàn)，適宜濃度的6-BA和NAA組合能顯著促進獼猴桃愈傷組織形成和不定芽的分化（田娜等，2007）。另有研究表明，不同濃度的6-BA 和NAA的組合處理比6-BA 和2，4-D的組合處理更顯著促進獼猴桃莖段愈傷組織的分化（王大平，2007）。本研究以附加不同濃度的6-BA和NAA的MS培養(yǎng)基對‘東紅’葉柄和葉片進行不定芽的再生誘導，結(jié)果表明低濃度的6-BA 0.5 μg·mL-1和NAA 0.2 μg·mL-1的組合濃度處理對‘東紅’直接再生不定芽具有很好的效果，愈傷率低，器官分化直接進行不定芽的再生階段，不定芽直接再生率高達91.2%。植物組織培養(yǎng)過程中，低濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑促進生長，而高濃度的植物生長調(diào)節(jié)劑則抑制生長，該原理在獼猴桃組織培養(yǎng)中也不例外，多以低濃度為宜，尤其在不定芽伸長生長階段（劉永立等，2005;胡皓和張志東，2011;袁云香，2011）。

獼猴桃組培苗的生根研究表明，添加常規(guī)植物生長調(diào)節(jié)劑如IBA、NAA、IAA即可促進其生根（李桂君等，2010;王大平和楊玲，2008;謝志兵和魯旭東，2003）。本研究結(jié)果表明‘東紅’不定芽在接種于添加0.5 μg·mL-1 IBA的1/2 MS中，誘導生根率最高，單株生根數(shù)量達6條，效果最優(yōu)。

外植體的篩選作為植物組織培養(yǎng)的第一步，其重要性直接影響培養(yǎng)后期的細胞再生與分化以至于芽的形成（陳洪國和熊月明，2001;姜維梅和李鳳玉，2003;隆前進等，2010;周玲艷等，2007）。獼猴桃組織培養(yǎng)可供研究的外植體類型很多，帶腋芽的莖段、不定芽、葉柄、葉片、花瓣、花萼、花粉、胚乳、根、形成層和原生質(zhì)體均可成功誘導不定芽的再生（尚霄麗等，2010;劉長江等，2009;田新華等，2008;文國琴和何震，2004;Gonzalez et al.，1995;Adam，1995;畢靜華等，2005;蘭大偉等，2007）。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，葉片在誘導分化過程中容易形成致密的不易分化的愈傷組織，少量直接再生的不定芽畸形芽偏多，而葉柄不定芽直接再生率顯著高于葉片，分化速度快，直接簡化了從愈傷組織到不定芽分化的過程，縮短了育種進程，為產(chǎn)業(yè)化快速生產(chǎn)種苗提供了有力的保證。

參考文獻：

ADAM M， 1995. Callus induction and plant regeneration in vitro in Actinidia [J]. Acta Soc Bot Pol， 64（2）：131-138.

BI JH， LIU YL， SYED A， 2005. In vitro organogenesis and plant regeneration from leaf explants of Actinidia latifolia [J]. J Fruit Sci， 22（4）：405-408. [畢靜華，劉永立，ASGHAR SYED，2005. 闊葉獼猴桃葉片離體器官發(fā)生和植株再生（英文） [J]. 果樹學報，22（4）：405-408.]

CHEN HG， XIONG YM， 2001. Effects ofdifferent explants and growth regulators on the formation and regeneration of the callus of kiwifruit [J]. Fujian Fruit， （4）：3-4. [陳洪國，熊月明，2001.不同外植體和生長調(diào)節(jié)劑對獼猴桃愈傷組織形成與再分化的影響 [J].

福建果樹，（4）：3-4.]

GONZALEZ MV， REY M， RODRIGUEZ R， 1995. Plant regeneration from petioles of kiwifruit microshoots [J]. Hortic Sci， 30（6）：1302-1303.

HU H， ZHANG ZD， 2011. Study on micropropagation of Actinidia arguta ‘Kuilu’ [J] . Jilin Agric， （2）：71-72. [胡皓，張志東，2011. 軟棗獼猴桃“魁綠”品種組培微繁技術研究 [J]. 吉林農(nóng)業(yè)，（2）：71-72.]

HUANG HW， 2013. Actinidia germplasm resources in China [M]. Beijing：China Forestry Publishing House：115. [黃宏文，2013. 中國獼猴桃種質(zhì)資源 [M]. 北京：中國林業(yè)出版社：115.]

HUANG HW， GONG JJ， WANG SM， et al.， 2000. Geneticdiversity in the genus Actinidia [J]. Chin Biodivers， 8（1）：1-12. [黃宏文，龔俊杰，王圣梅， 等， 2000. 獼猴桃屬（Actinidia）植物的遺傳多樣性 [J]. 生物多樣性，8（1）：1-12.]

JIA HH， 2010. Callus induction and regeneration of Actinidia chinensis [J]. J Shandong For Sci Technol， （3）：41-42. [賈?；?，2010. 中華獼猴桃愈傷組織的誘導與分化 [J]. 山東林業(yè)科技，（3）：41-42.]

JIANG WM， LI FY， 2003. Establishment of plantlet regeneration system of Actinidia macrosperma [J]. J Zhejiang Univ （Agric Life Ed）， 29（3）：295-299. [姜維梅，李鳳玉，2003. 大籽獼猴桃（Actinidia macrosperma）離體再生系統(tǒng)的建立 [J]. 浙江大學學報（農(nóng)業(yè)與生命科學版），29（3）：295-299.]

LANdW， LIU YL， YUAN TL， 2007. Organogenesis， somatic embryogenesis and plantlet regeneration from leaf explants of Actinidia kolomikta cultured in vitro [J]. J Fruit Sci， 24（2）：218-222. [蘭大偉，劉永立，原田隆，2007. 狗棗獼猴桃葉片離體培養(yǎng)的器官、體細胞胚形成與植株再生（英文） [J]. 果樹學報，24（2）：218-222.]

LI GJ， SONG JL， WU J， 2010. Study on tissue culture in vitro of Actinidia polygama [J]. Chin New Technol Prod， （14）：216-217. [李桂君，宋嘉隆，吳捷，2010. 葛棗獼猴桃組培繁殖的研究 [J]. 中國新技術新產(chǎn)品，（14）：216-217.]

LIU CJ， LIU GC， ZHAOdY， et al.， 2009. Study on shoot tip culture of Actinidia arguta [J]. Chin Fruit， （2）：32-34. [劉長江，劉國成，趙德英，等，2009. 野生軟棗獼猴桃莖尖培養(yǎng)研究 [J]. 中國果樹，（2）：32-34.]

LIU XG， JIAO J， ZHAO Y， et al.， 2013. Efficiency plant regeneration and browning condiction of Actinidia arguta [J]. Chin Agric Sci Bull， 29（19）：113-119. [劉小剛，焦晉，趙宇，等，2013. 野生軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)及褐變處理 [J]. 中國農(nóng)學通報，29（19）：113-119.]

LIU YL， LANdW， BI JH， et al.， 2005. Organ formation and plant regeneration in vitro of Actinidia polygama [J]. J Fruit Sci， 22（3）：220-223. [劉永立，蘭大偉，畢靜華，等，2005. 葛棗獼猴桃組織培養(yǎng)中的器官形成與植株再生 [J]. 果樹學報，22（3）：220-223.]

LIU Z， ZHANG TK， ZHANG HY， 2013. Research status and prospect of? tissue culture of Actinidia chinensis [J]. J Fujian For Sci Technol， 40（4）：231-235. [劉錚，張?zhí)?，張漢堯，2013.獼猴桃組織培養(yǎng)研究現(xiàn)狀與展望 [J].福建林業(yè)科技，40（4）：231-235.]

LONG QJ， 2010. In vitro culture and rapid micro-propagation of kiwifruit （Actinidia eriantha ‘White’ and Actinidia chiensis ‘Hongyang’） [D]. Hangzhou：Zhejiang Normal University. [隆前進，2010. 獼猴桃組織培養(yǎng)和快繁技術研究 [D]. 杭州：浙江師范大學.]

LONG QJ， WU YJ， XIE M， 2010.? Tissue culture and rapid micropropagation from leaves and stems of kiwifruit （Actinidia chinensis cv. Hongyang） [J]. J Zhejiang Agric Sci， 22（4）：429-432. [隆前進，吳延軍，謝鳴，2010. ‘紅陽’獼猴桃葉片和帶芽莖段的組織培養(yǎng)快繁技術 [J]. 浙江農(nóng)業(yè)學報，22（4）：429-432.]

MULEO， R ， MORINI S， 1990. Effect of light quality on regeneration from callus of Actinidiadeliciosa [J]. Acta Hortic， （280）：155-158.

QI XJ，XU SK， LIN MM，et al.， 2015. Research advances on fruit coloring mechanism in red-fleshed kiwifruit [J]. J Fruit Sci， 32（6）：1232-1240. [齊秀娟，徐善坤，林苗苗，等，2015. 紅肉獼猴桃果實著色基質(zhì)研究進展 []J]. 果樹學報，32 （6）：1232-1240.]

QIN YH， ZHANG SL， ZHUdY， 2004. Advances of research in tissue culture and genetic transformation on kiwifruit [J]. J Cell Biol， 26（1）：57-61. [秦永華，張上隆，朱道玗，2004. 獼猴桃的組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化研究進展 [J]. 細胞生物學雜志，26（1）：57-61.]

SHANG XL， MA CH， FENG JC， et al.， 2010. Establishment of regeneration system from leaves of Actiniadia chinensis [J]. J Jiangxi Agric Sci， 22（4）：50-52. [尚霄麗，馬春華，馮建燦，等，2010. 中華獼猴桃葉片再生體系的建立 [J]. 江西農(nóng)業(yè)學報，22（4）：50-52.]

TIAN N， XU ZQ， HE JG， 2007. Establishment of high frequency anddirect regeneration system of kiwifruit（Actinidiadeliciosa Qinmei） [J]. J Microbiol， 25（1）：79-83. [田娜，徐子勤，何近剛，2007. 獼猴桃高頻直接再生體系的建立（英文） [J]. 武漢植物學研究，25（1）：79-83.]

TIAN XH， LU HY， WU J， 2008. Study on tissue culture in vitro of Actinidia arguta [J]. For Sci Technol， 33（6）：56-58. [田新華，盧慧穎，吳捷，2008. 軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)的研究 [J]. 林業(yè)科技，33（6）：56-58.]

WANGdP， 2007. The effect of hormone combination withdifferent concentrations on the callus induction and buddifferentiation of kiwifruit [J]. J Anhui Agric Sci， 35（36）：11761， 11821. [王大平，2007. 不同濃度的激素組合對獼猴桃愈傷組織誘導及芽分化的影響 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學，35（36）：11761，11821.]

WANGdP， YANG L， 2008. Study on rooting culture in tissue culture seedlings of Actinidiadeliciosa [J]. J Anhui Agric Sci， 36（21）：8930-8931. [王大平，楊玲，2008. 獼猴桃組培苗生根培養(yǎng)的研究 [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學，36（21）：8930-8931.]

WEN GQ， HE Z， 2004. Multiplication plant technique of Actinidia chinensis stem section callus [J]. J Fujian For Sci Technol， 3（4）：78-79. [文國琴，何震，2004. 紅陽獼猴桃莖段愈傷組織誘導成苗技術 [J]. 福建林業(yè)科技，3（4）：78-79.]

XIE ZB， LU XD， 2003. Effects ofdifferent concentrations of IBA on rooting of tissue cultured seedlings of kiwifruit [J].deciduous Fruit， （2）：9-10. [謝志兵，魯旭東，2003. 不同濃度的IBA 對獼猴桃組培苗生根的影響 [J]. 落葉果樹，（2）：9-10.]

XIE ZB， LU XD， 2003. Study on screening of appropriate hormone combinations in tissue culture of kiwifruit [J]. N Fruit， （3）：7-8. [謝志兵，魯旭東，2003. 獼猴桃組織培養(yǎng)中適宜激素組合的篩選 [J]. 北方果樹， （3）：7-8.]

YUAN YX， 2011. Study on regeneration system of high frequency genetic transformation kiwifruit（Qinmei） [J]. J Hubei Agric Coll， 50（14）：2993-2994. [袁云香，2011. 秦美獼猴桃高頻遺傳轉(zhuǎn)化再生體系的建立 [J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學，50（14）：2993-2994.]

ZHANG JY， MO ZH， HUANG SN， et al.， 2014.development of kiwifruit industry in the world and analysis of trade and international competitiveness in China entering 21st centry [J]. Chin Agric Sci Bull， 30（23）：48-55. [張計育，莫正海，黃勝男，等，2014. 21世紀以來世界獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展以及中國獼猴桃貿(mào)易與國際競爭力分析 [J]. 中國農(nóng)學通報，30（23）：48-55.]

ZHANG YJ， QIAN YQ，1996. Callus induction and plant regeneration from leaves and stem segments of in vitro shoots of Actinidia arguta [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin， （2）：137-141. [張遠記，錢迎倩，1996. 軟棗獼猴桃試管苗葉片和莖段的愈傷組織誘導及植株再生 [J]. 西北植物學報，（2）：137-141.]

ZHOU LY， QIN HM， LAI XY ，et al.， 2007. Establishment of the regeneration system from the seedlings of kiwifruit [J]. N Hortic， （5）：198-200. [周玲艷，秦華明，賴幸韻，等，2007. 獼猴桃實生苗再生體系的建立 [J]. 北方園藝，（5）：198-200.]

ZHU XD， LIU YQ ZHAO RL，et al.， 2012. Study on fast plant regeneration of Actinidia chinensis [J]. J Hubei Agric Coll， 51（11）：2369-2371. [朱學棟，劉奕清，趙榮隆，等，2012. 紅陽獼猴桃快速繁殖體系的建立 [J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學，51（11）：2369-2371.]