秦楓
【摘要】目的:分析探討影響血細(xì)胞分析儀測定血小板的因素。方法:將本院300例患者血小板標(biāo)本作為研究對象,分別應(yīng)用血細(xì)胞分析儀和顯微鏡計(jì)數(shù)法對其進(jìn)行測定,對測定結(jié)果進(jìn)行評估。結(jié)果:當(dāng)紅細(xì)胞體積小于60fl時,血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)法所得血小板數(shù)明顯要高于顯微鏡計(jì)數(shù)法,差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);當(dāng)紅細(xì)胞體積大于60fl時,兩種技術(shù)方法沒有明顯差異,不具有可比性(P>0.05)。正常圖形中,血小板聚集例數(shù)、大血小板例數(shù)都要低于異常圖形,兩種方法計(jì)數(shù)結(jié)果都要高于異常圖形,對兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行對比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:血細(xì)胞分析儀測定血小板的影響因素有血小板凝集數(shù)、大血小板數(shù)、小紅細(xì)胞數(shù)等;針對血小板計(jì)數(shù)與直方圖結(jié)果不相符的標(biāo)本,應(yīng)該重新采血檢測或者應(yīng)用手工計(jì)數(shù)法進(jìn)行檢測,保證血小板計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析儀;血小板;影響因素
目前,臨床上將血小板計(jì)數(shù)作為止血與凝血障礙研究的主要指標(biāo),而且血小板計(jì)數(shù)是保證血小板參數(shù)準(zhǔn)確的基礎(chǔ),所以必須確保其檢測結(jié)果的可靠性。近些年,各大醫(yī)院開始普及血細(xì)胞分析儀,大幅度提升了其工作效率。然而其血小板計(jì)數(shù)結(jié)果通常處于不穩(wěn)定狀態(tài)。本次選取我院300例患者血小板標(biāo)本,作為探討血細(xì)胞分析儀測定血小板的影響因素的研究對象,其結(jié)果如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
本院將此次研究應(yīng)用的儀器為Sysmex XT4000i全自動血細(xì)胞分析儀,應(yīng)用的溶血劑是從日本Sysmex公司引進(jìn),稀釋液的生產(chǎn)廠家為濟(jì)南Sysmex醫(yī)用電子有限公司。
1.2 方法
利用血細(xì)胞分析儀對300例標(biāo)本進(jìn)行分析,同時應(yīng)用顯微鏡對血小板數(shù)量與直方圖不符病例進(jìn)行計(jì)數(shù)。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法
匯總臨床數(shù)據(jù)后,應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS16.0對其進(jìn)行處理,其中用x2檢驗(yàn)組間對比,用百分比(%)表示計(jì)數(shù)資料;若P>0.05,則差異不具備可比性,不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 兩種方法測定血小板的情況
由表1可以知道,紅細(xì)胞體積小于60fl時,兩種檢測方法差異比較明顯,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);當(dāng)紅細(xì)胞體積大于60fl時,兩組數(shù)據(jù)沒有明顯差異,不具有可比性(P>0.05)。
2.2 正常與異常血小板直方圖中血小板情況
由表2可以知道,正常圖形中血小板聚集例數(shù)、大血小板例數(shù)明顯少于異常圖形,血細(xì)胞儀計(jì)數(shù)和顯微鏡計(jì)數(shù)都要高于異常圖形,對兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行對比,差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3 討論
由于采血操作比較緩慢,可能將人體組織液混入其中,加上混勻不及時,促使血小板聚集,導(dǎo)致最終計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。由此可見,血小板聚集是導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)結(jié)果不穩(wěn)定的影響因素。針對這種現(xiàn)象,我院同時實(shí)施了顯微鏡測定,并將其與正常圖形進(jìn)行對比。本院此次試驗(yàn)結(jié)果顯示,正常圖形中,血小板聚集數(shù)為0例,而異常圖形中,血小板聚集數(shù)為18例,這提示血小板聚集是導(dǎo)致異常圖形出現(xiàn)的主要原因。
關(guān)于血小板和紅細(xì)胞的檢測,則是通過顆粒大小對其進(jìn)行鑒別,如果小紅細(xì)胞數(shù)量較多,就很有可能導(dǎo)致血小板上限區(qū)域發(fā)生改變。通常情況下,當(dāng)紅細(xì)胞體積大于70fl時,儀器沒有血小板上限區(qū)域,不會出現(xiàn)干擾報(bào)警的現(xiàn)象,儀器計(jì)數(shù)法和顯微鏡計(jì)數(shù)法沒有明顯差異。當(dāng)紅細(xì)胞體積小于70fl時,儀器就會提示上限區(qū)域有干擾。相關(guān)研究[1]表明,紅細(xì)胞體積值越小,那么小紅細(xì)胞數(shù)量就會越多,血小板計(jì)數(shù)值越高,兩種檢測方法差距也就越大。本院此次試驗(yàn)結(jié)果與上述結(jié)論完全吻合。
血細(xì)胞分析儀在正常情況下識別血細(xì)胞體積時,會存在體積界限,血小板體積范圍為2fl-30fl。參照Coulter原理[2],可以知道血細(xì)胞分析儀只能對顆粒大小進(jìn)行識別,不能對顆粒性質(zhì)進(jìn)行識別。如果血細(xì)胞體積異常超過儀器設(shè)定的閾值,那么就會出現(xiàn)檢測失誤的現(xiàn)象。結(jié)合本院此次研究結(jié)果,大血小板引起儀器計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。一般而言,血小板體積異常小的現(xiàn)象比較少見,所以不對其進(jìn)行討論。
試劑的質(zhì)量、抗凝劑的種類和比例、標(biāo)本放置時間以及反復(fù)混勻次數(shù)都會對計(jì)數(shù)結(jié)果造成影響。在測定血小板時,最好使用和儀器檢測原理互相匹配的試劑。在檢測時,切勿污染試劑,避免雜質(zhì)微粒增高本底,使檢測結(jié)果偏高。關(guān)于抗凝劑種類選擇,ICSH推薦使用二鉀抗凝,抗凝劑比例會對檢測質(zhì)量帶來嚴(yán)重影響。齊天蕊等[3]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),如果標(biāo)本房時間過長,那么就會產(chǎn)生巨大血小板,導(dǎo)致血小板最終計(jì)數(shù)值偏低,為了保證測量值的準(zhǔn)確性,需要不斷混勻全血標(biāo)本,而且測定必須在一個小時內(nèi)完成。
此外,在血小板體積分布圖中,如果2-3fl粒子過高,那么圖形就會向左移,甚至呈現(xiàn)“尖峰”圖樣。導(dǎo)致該現(xiàn)象發(fā)生的原因除了血小板體積過小外,紅細(xì)胞夾雜物、冷凝球蛋白、紅細(xì)胞碎片等大量存在也會出現(xiàn)此種情況。相關(guān)研究報(bào)道[4]提出,白血病細(xì)胞、標(biāo)本細(xì)菌污染、皮下脂肪低污染等,都會導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)值偏高。綜上所述,判斷血小板計(jì)數(shù)值是否可靠,應(yīng)該充分應(yīng)用直方圖對其進(jìn)行判定,如果有必要,還需要重新采血對其進(jìn)行測定或者應(yīng)用顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。
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