土壤水分含量和接種摩西斗管囊霉（Funneliformismosseae）對(duì)伯樂(lè)樹幼苗生長(zhǎng)的影響

王丹丹 魏蓉 張薇 林明琛 陳紅鋒

摘 要： 該研究測(cè)定了伯樂(lè)樹在不同水分處理（40%、60%、80%、100%）和時(shí)間節(jié)點(diǎn)下的菌根侵染率，不同水分處理前后接種組和對(duì)照組幼苗株高、地徑、葉片數(shù)等形態(tài)指標(biāo)以及葉片丙二醛含量、幼苗成活率指標(biāo)。結(jié)果表明：（1）相對(duì)含水量60%條件下，菌絲、叢枝和總的侵染率最高，40%低水分含量和80%以上高水分含量都不利于菌根真菌對(duì)幼苗的侵染。（2）在40%和60%低水分量含量條件下，接種幼苗的丙二醛含量顯著低于對(duì)照，接種摩西斗管囊霉可提高幼苗對(duì)干旱脅迫的抗耐性，但80%和100%高水分含量條件下接種對(duì)幼苗的作用不明顯。（3）幼苗在自然和接種條件下適宜生長(zhǎng)的土壤相對(duì)含水量為80%和60%。（4）相同水分條件下，接種幼苗成活率高于對(duì)照，其中相對(duì)含水量60%下接種幼苗的成活率最高（90%），在40%低水分含量或100%飽和水分含量下，幼苗的成活率都相對(duì)較低。

關(guān)鍵詞： 摩西斗管囊霉， 水分脅迫， 伯樂(lè)樹， 成活率

中圖分類號(hào)： Q943.1 ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A ?文章編號(hào)： 1000-3142（2019）07-0976-10

Abstract： In this paper， the mycorrhizal infection rates of Bretschneidera sinensis under different water treatments （40%， 60%， 80%， 100%） and time points were determined. Quantified morphological characteristics of the seedlings such as height， ground diameter， and number of leaves， together with malonaldehyde content and survival rate in the inoculation group and the control group before and after different water treatments were also determined. The results were as follows： （1） Under the condition of relative soil moisture content of 60%， the infection rates of mycelium， arbuscula and the total were the highest， low moisture content （40%） and high moisture content （≥80%） were not conducive to mycorrhizal fungi on the seedlings infestation. （2） The content of malondialdehyde in the inoculated seedlings was significantly lower than that of the control at 40% and 60% treatments， which suggested that inoculation with Funneliformis mosseae could increase seedling resistance to drought stress， but with no obvious effect on treatments of 80% and 100% high moisture content. （3） The relative water content of soil suitable for seedling growth under natural and inoculated conditions was 80% and 60%， respectively. （4） Under the same water conditions， the survival rate of inoculated seedlings was higher than that of the control， with the highest （90%） under 60% treatment， while the survival rate of seedlings was relatively low at 40% low moisture content and 100% saturated moisture content.

Key words： Funneliformis mosseae， water stress， Bretschneidera sinensis， survival rate

伯樂(lè)樹（Bretschneidera sinensis）又名鐘萼木、山桃花，是以我國(guó)為分布中心的單種科植物，是第三紀(jì)古熱帶植物區(qū)系的孑遺種，在研究被子植物的系統(tǒng)發(fā)育、古地理和古氣候等方面具有重要科學(xué)價(jià)值（Chen，1984;Wu，1991）。該種零星分布在我國(guó)長(zhǎng)江以南部分省區(qū)的山林地帶，長(zhǎng)期以來(lái)因其生境破壞嚴(yán)重，現(xiàn)有母樹資源稀少、幼苗成活率低、天然更新困難，已處于珍稀瀕危的境地，于1999年被列為國(guó)家一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物，并在《中國(guó)物種紅色名錄》中被評(píng)估為瀕危等級(jí)（于永福，1999;汪松和解焱，2004）。

伯樂(lè)樹生長(zhǎng)過(guò)程存在兩個(gè)瓶頸期，分別為由種子到幼苗和由幼苗到成熟植株這兩個(gè)時(shí)期。目前通過(guò)物理機(jī)械等方法已實(shí)現(xiàn)了種子到幼苗的過(guò)渡 （伍銘凱等，2006;張季等，2011），但從幼苗到成熟植株過(guò)渡的技術(shù)問(wèn)題仍未解決，其根本原因在于尚未明確限制幼苗生長(zhǎng)的關(guān)鍵生態(tài)因子及其作用機(jī)制。伯樂(lè)樹莖的生態(tài)解剖學(xué)特征表明，其導(dǎo)管直徑較小，水分運(yùn)輸效率不高，相對(duì)于成熟植株來(lái)說(shuō)，幼苗對(duì)水分運(yùn)輸?shù)囊髣t更高（費(fèi)松林等，1999）。加之，伯樂(lè)樹根尖表面少見(jiàn)根毛分化，也限制了其對(duì)水分和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的吸收。因此，夏季高溫干旱成為了導(dǎo)致伯樂(lè)樹1年生幼苗高死亡率的主要原因（喬琦等，2010，2011）。

叢枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）是植物體內(nèi)常見(jiàn)的一種專性營(yíng)養(yǎng)共生內(nèi)生菌根，在地球上有80%的陸生植物的根系可與AMF共生形成叢枝菌根共生體（Smith & Read，2008;Wang & Qiu，2006）。許多研究表明，叢枝菌根真菌有助于提高植物的抗旱性（Brachmann & Parniske，2006;陳婕等，2014;黃化剛等，2017;許平輝等，2017;張菲等，2017;賈振宇等，2017）。摩西斗管囊霉（Funneliformis mosseae，原名摩西球囊霉）是伯樂(lè)樹原生境土壤中常見(jiàn)的一種AM真菌（喬琦等，2015）。黃久香和莊雪影（2000）報(bào)道在伯樂(lè)樹根際土壤中存在球囊霉屬和無(wú)梗囊霉屬孢子，并在其菌根中發(fā)現(xiàn)叢枝和泡囊結(jié)構(gòu)。趙永平等（2018）通過(guò)對(duì)萬(wàn)壽菊幼苗接種摩西球囊霉等叢植菌根真菌，發(fā)現(xiàn)AMF能夠減輕脅迫對(duì)幼苗的危害，增強(qiáng)植物體的抗逆性。王敏強(qiáng)等（2018）研究發(fā)現(xiàn)甜菊接種摩西斗管囊霉后能夠提高其耐鹽性。喬琦等（2015）在摩西斗管囊霉與伯樂(lè)樹共生效應(yīng)的研究中發(fā)現(xiàn)摩西斗管囊霉能增強(qiáng)伯樂(lè)樹幼苗超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性，促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)。但目前關(guān)于不同土壤水分含量和接種摩西斗管囊霉對(duì)伯樂(lè)樹幼苗生長(zhǎng)的影響方面的研究未見(jiàn)報(bào)道。

本研究選取伯樂(lè)樹生境土壤中常見(jiàn)的摩西斗管囊霉作為供試叢枝菌根真菌，通過(guò)測(cè)定不同水分處理和時(shí)間節(jié)點(diǎn)的菌根侵染率，水分處理前后幼苗株高、地徑、葉片數(shù)等形態(tài)指標(biāo)，葉片中丙二醛含量以及幼苗成活率等，探討不同水分處理和接種摩西斗管囊霉對(duì)伯樂(lè)樹幼苗生長(zhǎng)和存活能力的影響，為摸清限制伯樂(lè)樹幼苗生長(zhǎng)的關(guān)鍵生態(tài)因子及其作用機(jī)制研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料和處理

1.1.1 供試植物 伯樂(lè)樹的成熟種子于2016年11月采集自廣東南昆山國(guó)家級(jí)森林公園（113°53′ E，23°38′ N）。種子千粒重為1 786.0 g。將除去橘紅色假種皮后的種子置于育苗盤中用濕沙積存，于2017年1月起陸續(xù)萌發(fā)，4月初，待苗高20 cm時(shí)移至滅菌基質(zhì)中。

1.1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)與供試基質(zhì) 試驗(yàn)實(shí)施地位于廣州華南植物園實(shí)驗(yàn)基地（113°21′ E，23°10′ N），試驗(yàn)在半控制狀態(tài)下的溫室大棚中進(jìn)行（僅遮雨，一層遮陰網(wǎng)）。供試基質(zhì)為泥炭∶椰糠∶河沙比例為1∶1∶2，混合均勻后裝入無(wú)紡布袋置于高壓蒸汽滅菌鍋0.15 MPa、溫度約120 ℃滅菌2 h。晾曬一周后裝盆，花盆底徑約16 cm。基質(zhì)干重為每盆1 470.0 g，最大持水量為0.76。

1.1.3 供試菌種 試驗(yàn)所用的叢枝菌根真菌菌種為摩西斗管囊霉，由北京市農(nóng)林科學(xué)院植物營(yíng)養(yǎng)與資源研究所“叢枝菌根真菌種質(zhì)資源庫(kù)（BGC）”提供。菌種接種劑由真菌孢子、菌絲、侵染根段等繁殖體以及混合基質(zhì)組成。將摩西斗管囊霉菌土混合均勻，采用三點(diǎn)接種法每盆接種菌土14.0 g，共接種80盆植株。

1.1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法 試驗(yàn)設(shè)一個(gè)接種摩西斗管囊霉菌土處理（A組）和一個(gè)空白對(duì)照CK（B組）。每盆定植1株幼苗，A組每盆接種14.0 g菌劑。接種后2個(gè)月正常進(jìn)行澆水養(yǎng)護(hù)，每?jī)芍苁┮淮螠p磷配方Hoagland營(yíng)養(yǎng)液（王幼珊等，2012）。空白對(duì)照B組未接種菌劑，與A組水肥養(yǎng)護(hù)條件相同。A、B兩組于2017年7月1日開始進(jìn)行水分處理，7月31日結(jié)束，土壤相對(duì)含水量設(shè)置4個(gè)梯度，分別維持在40%、60%、80%和100%水平。每盆土壤干重均為（1 470.0±5）g，水分處理后各組重量分別為（2 000.0±5） g、（2 200.0±5）g、（2 400.0±5） g、（2 600.0±5） g（土壤相對(duì)含水量=土壤含水量/田間持水量×100%）。共計(jì)4×2組處理，每組處理16次重復(fù)（各16盆）。供試容器是口徑、高度、底徑分別為180 mm、180 mm、140 mm的塑料育苗盆。水分處理結(jié)束后恢復(fù)澆水，30 d后（2017年8月30日）觀察記錄各組處理成活株數(shù)、計(jì)算成活率。定期測(cè)定株高、基徑、葉片數(shù)、小葉數(shù)。在進(jìn)行水分處理之前（接種后45 d）、水分處理開始時(shí)（接種后60 d）、水分處理中期（接種后75 d）、水分處理結(jié)束時(shí)（接種后90 d），測(cè)定各處理菌根侵染率。在水分處理期間，每10 d測(cè)量一次葉片丙二醛（malonaldehyde，MDA）含量。

1.2 指標(biāo)測(cè)定

1.2.1 形態(tài)指標(biāo) 每個(gè)處理選取9株幼苗于水分處理開始和結(jié)束時(shí)，分別使用直尺、電子游標(biāo)卡尺測(cè)定株高、基徑。水分處理開始后每15 d觀察記錄一次葉片數(shù)、小葉數(shù)。水分處理30 d時(shí)結(jié)束，植株恢復(fù)正常養(yǎng)護(hù)。

1.2.2 菌根侵染率 在進(jìn)行水分處理之前（接種后45 d）、水分處理開始時(shí)（接種后60 d）、水分處理中期（接種后75 d）、水分處理結(jié)束時(shí)（接種后90 d），對(duì)接種組（A組）的植株和對(duì)照組（B組）進(jìn)行采樣測(cè)定。每個(gè)處理選取3株幼苗取鮮根系，切成1 cm左右的根段，清水沖洗干凈后，用FAA固定液固定。將根段用Trypanblue染色法，選取40條根段制片，在光學(xué)顯微鏡下（Leica DM2000）用40倍物鏡觀察菌絲、叢枝和泡囊結(jié)構(gòu)，每個(gè)視野出現(xiàn)菌絲、叢枝或泡囊中的任何一種形態(tài)，即為相應(yīng)形態(tài)計(jì)數(shù)加1，同時(shí)為總侵染率加1;若每個(gè)視野中出現(xiàn)2種或以上結(jié)構(gòu)，則每種結(jié)構(gòu)計(jì)數(shù)分別加1，同時(shí)總侵染率計(jì)數(shù)加1。每個(gè)樣品共觀察200個(gè)視野。

叢枝菌根侵染率計(jì)算公式：總侵染率（TC）=總侵染計(jì)數(shù)/200×100%;菌絲侵染率（HC）=菌絲侵染計(jì)數(shù)/200×100%;叢枝侵染率（AC）=叢枝侵染計(jì)數(shù)/200×100%;泡囊侵染率（VC）=泡囊侵染計(jì)數(shù)/200×100%。

1.2.3 丙二醛（MDA） 采用硫代巴比妥酸法（李合生，2000），每個(gè)處理選取3株幼苗取相同位置的小葉0.3 g，洗凈擦干后放入預(yù)冷的研缽中，加少許石英砂和2.0 mL 10%TCA，冰浴研磨成勻漿，將其轉(zhuǎn)移到離心管中，再用3.0 mL TCA沖洗研缽和研棒數(shù)次并轉(zhuǎn)移至離心管，所得勻漿在3 000 r·min-1下離心10 min，將上清液轉(zhuǎn)入帶塞試管中并用10%TCA溶液定容至5.0 mL（V0）。取上清液2.0 mL于帶塞試管中，加入0.5%TBA2.0 mL，混合后（Vm）沸水浴20 min，迅速冷卻后再離心，上清液分別于532、600、450 nm處測(cè)OD值。實(shí)驗(yàn)所用儀器：上海舜宇恒平FA2004電子分析天平、北京永光明XMTD-4000電熱恒溫水浴鍋、湘儀H-2050R臺(tái)式高速冰凍離心機(jī)、上海佑科UV759CTR紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。

式中，A450、A532、A600分別代表450、532、600 nm波長(zhǎng)下的吸光度值。V0代表樣品提取液的總體積（mL）;Vs代表顯色反應(yīng)中樣品液的提取體積（mL）;W代表植物葉片鮮重（g）。

1.2.4 成活率 恢復(fù)正常養(yǎng)護(hù)后30 d觀察記錄各處理成活株數(shù)，計(jì)算成活率。成活率=每組處理成活植株數(shù)/每組處理植株總數(shù)×100%。

1.3 數(shù)據(jù)分析

所得數(shù)據(jù)用Microsoft Excel軟件進(jìn)行整理并作圖，用SPSS 22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，用LSD 法多重比較平均數(shù)間的差異顯著程度（平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)偏差，P<0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 侵染率變化

由圖1可知，不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)和水分條件下，各個(gè)結(jié)構(gòu)的侵染率及總侵染率均有所差異。接種45～60 d，菌絲、叢枝、泡囊及總的侵染率均明顯增加，菌絲的侵染率從（1.17±0.25）%提高至（5.00±0.45）%，在總侵染率中的占比最大;叢枝的侵染率由（0.33±0.25）%提高至（1.83±0.25）%，增長(zhǎng)速率最快;泡囊的侵染率由（0.67±0.49）%提高至（2.17±0.25）%;總侵染率由（1.83±0.25）%提高至（7.17±0.25）%。

水分處理開始后，各水分處理間侵染率的差異逐漸顯現(xiàn)。在75 d時(shí)，相對(duì)含水量60%下，菌絲、叢枝和總侵染率均最高，分別為（15.67±1.15）%、（5.17±0.76）%、（22.33±1.53）%，而在相對(duì)含水量80%和100%下，三者的侵染率均有所降低。在90 d時(shí)也出現(xiàn)了類似的結(jié)果，且菌絲、叢枝和總侵染率均高于60 d時(shí)，分別為（19.33±1.53）%、（5.67±0.58）%、（23.00±1.00）%，可能是隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，在60%以下低水分含量下有利于菌絲、叢枝增殖并對(duì)根系持續(xù)侵染，而在80%以上高水分含量不利于菌絲、叢枝增殖和侵染。泡囊表現(xiàn)出在80%以上高水分含量下的侵染率要高于60%以下低水分含量下的侵染率，70 d時(shí)，相對(duì)含水量100%下，泡囊的侵染率最高，為（11.50±1.32）%;而90 d時(shí)，相對(duì)含水量80%下，泡囊的侵染率最高，為（12.67±0.58）%。Pearson相關(guān)性分析得出，水分與泡囊侵染率呈顯著正相關(guān)（P=0.001），表明水分含量大，菌根真菌更易形成泡囊結(jié)構(gòu)。

摩西斗管囊霉在水分處理前對(duì)植株的侵染率較低，幼苗根部皮層組織內(nèi)只可見(jiàn)少量菌絲、泡囊和叢枝結(jié)構(gòu)（圖2），水分處理后的各個(gè)總侵染率[（7.67±0.76）%～（23.00±1.00）%]高于處理前[（1.83±0.25）%～（7.17±0.25）%]，其原因可能是由于隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，根系不斷增長(zhǎng)，同時(shí)菌根真菌各種結(jié)構(gòu)不斷增殖，二者的接觸幾率增大，總侵染率提高。

2.2 不同水分處理下葉片丙二醛（MDA）含量的變化

丙二醛是植物在受脅迫時(shí)產(chǎn)生的一種物質(zhì)，在一定程度上可反映植物受環(huán)境脅迫的情況（趙永平等，2018）。由圖3和圖4可知，接種組和對(duì)照組葉片中丙二醛含量的變化趨勢(shì)大體相同：隨著水分處理的進(jìn)行，含水量為40%組別的丙二醛含量先上升后下降，接種組為（36.12±0.13）、（53.01±1.53）、（111.47±1.08）、（65.84±0.10） nmol·g-1FW，對(duì)照組為（41.92±0.40）、（63.76±1.68）、（138.35±2.39）、（85.55±0.38） nmol·g-1FW，二組均在20 d時(shí)達(dá)最高，且接種組丙二醛含量低于對(duì)照組含量;60%含水量處理組先上升后下降，接種組為（36.12±0.13）、（50.27±1.32）、（44.0±1.93）、（42.17±1.45） nmol·g-1FW，對(duì)照組為（41.92±0.40）、（47.04±0.38）、（124.15±1.33）、（42.25±0.32） nmol·g-1FW;80%含水量處理組丙二醛含量持續(xù)緩慢下降;100%含水量組別先升高而后下降，接種組為（36.12±0.13）、（39.45±0.59）、（56.58±0.10）、（45.39±1.72） nmol·g-1FW，對(duì)照組為（41.92±0.40）、（42.38±0.84）、（37.01±2.30）、（35.62±0.91） nmol·g-1FW。通過(guò)丙二醛含量的升降變化情況推斷，當(dāng)土壤相對(duì)含水量低于60%時(shí)，伯樂(lè)樹幼苗受到一定程度的干旱脅迫，而土壤相對(duì)含水量超過(guò)80%時(shí)，會(huì)對(duì)幼苗產(chǎn)生一定的濕害。接種摩西斗管囊霉降低了幼苗中丙二醛含量，有利于增強(qiáng)幼苗對(duì)干旱脅迫的抗耐性。

2.3 幼苗形態(tài)指標(biāo)變化

表1結(jié)果表明，水分處理前（接種60 d），接種組與對(duì)照組之間株高、基徑、復(fù)葉數(shù)、小葉數(shù)等指標(biāo)均無(wú)顯著差異（P>0.05）。由表2可知，對(duì)于接種組來(lái)說(shuō)，水分處理后第30天，株高沒(méi)有顯著差異，相對(duì)含水量60%下的株高增長(zhǎng)量[（3.03±0.91） cm]、基徑增長(zhǎng)量[（1.76±0.33） mm]顯著高于其他處理。在未接種組中，相對(duì)含水量80%下，株高增長(zhǎng)量[（2.02±0.20） cm]、基徑增長(zhǎng)量[（1.84±0.16） mm]均高于其他處理。從表3結(jié)果來(lái)看，兩組復(fù)葉數(shù)、小葉數(shù)均呈下降趨勢(shì)，水分處理開始第15天，各組差異不顯著。第30天時(shí)，接種組60%相對(duì)含水量狀態(tài)下的復(fù)葉數(shù)、小葉數(shù)多于其他組;在對(duì)照組中，80%相對(duì)含水量狀態(tài)下的復(fù)葉數(shù)、小葉數(shù)優(yōu)于其他組。綜上所述，相對(duì)含水量60%下，接種幼苗的生長(zhǎng)情況較優(yōu)，幼苗在無(wú)接種的自然狀態(tài)下，適宜生長(zhǎng)的土壤相對(duì)水分含量為80%左右。但在低含水量（40%和60%）條件下，接種組株高增長(zhǎng)量和基徑增長(zhǎng)量均高于未接種組，而在高含水量（80%和100%）時(shí)出現(xiàn)了相反的情況。

2.4 幼苗成活率

由表4可知，恢復(fù)正常養(yǎng)護(hù)30 d后各組成活率，相同水分條件下，接種組（A組）的成活率均高于對(duì)照組（B組）， 表明接種摩西斗管囊霉對(duì)提高伯樂(lè)樹一年生幼苗的成活率有一定作用。接種組在相對(duì)含水量60%下成活率最高（90%），未接種組幼苗在相對(duì)含水量80%下的成活率最高（85%）。在40%低水分含量或100%飽和水分含量下，幼苗的成活率都相對(duì)較低，不利于幼苗生長(zhǎng)，特別在相對(duì)水分含量40%條件下尤為明顯，表明干旱對(duì)幼苗的成活率影響較大。

3 討論

3.1 不同水分含量對(duì)摩西斗管囊霉侵染率的影響

García et al.（2008）對(duì)細(xì)葉百脈根（Lotus tenuis）AM真菌研究發(fā)現(xiàn)在水分過(guò)多或虧損時(shí)，叢枝、菌絲結(jié)構(gòu)的形成會(huì)減少，而水分過(guò)多時(shí)抗性結(jié)構(gòu)泡囊的形成率提高256%，水分虧損對(duì)其影響不大。本研究得出，不同水分條件影響摩西斗管囊霉菌絲、泡囊和叢枝結(jié)構(gòu)及總的侵染率。在土壤相對(duì)含水量60%時(shí)，菌絲、叢枝對(duì)幼苗的侵染率達(dá)到最大，當(dāng)相對(duì)含水量為100%時(shí)，菌絲和叢枝的侵染率顯著低于相對(duì)含水量80%和60%處理。

3.2 接種摩西斗管囊霉對(duì)幼苗水分脅迫生理的影響

接種AMF能增強(qiáng)植物的抗性。莫言玲等（2016）研究干旱脅迫下接種地表球囊霉對(duì)西瓜生長(zhǎng)影響，發(fā)現(xiàn)接種AMF可以提高幼苗的葉片相對(duì)含水量和葉綠素含量， 促進(jìn)植株的生長(zhǎng)，特別是促進(jìn)根系的生長(zhǎng)。接種AMF處理緩解了干旱對(duì)葉綠體的傷害效應(yīng)。吳強(qiáng)盛等（2006）研究發(fā)現(xiàn)，接種叢枝菌根真菌降低了柑橘葉片和根系的MDA、H2O2和O2- · 含量，提高各種抗氧化酶（如SOD、POD、CAT、GR和APX）活性和各種抗氧化劑（ASC、GSH）含量，從而減輕水分脅迫產(chǎn)生的氧化破壞，使菌根化柑橘在水分脅迫下處于更有利的地位。喬琦等（2015）研究發(fā)現(xiàn)摩西斗管囊霉可增強(qiáng)伯樂(lè)樹幼苗超氧化物歧化酶活性，明顯增加可溶性糖含量、葉綠素含量與水分含量，促進(jìn)幼苗生長(zhǎng)和提高成活率。而通過(guò)丙二醛含量變化分析接種AMF對(duì)伯樂(lè)樹的抗性影響方面還需進(jìn)一步研究。

當(dāng)植物受到脅迫時(shí)，植物體內(nèi)活性氧的產(chǎn)生與清除這個(gè)平衡將可能被破壞，隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)和脅迫程度的加重，由超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、抗壞血酸過(guò)氧化物酶（AsAPOD）及非酶類抗氧劑如抗壞血酸（ASC）、谷胱甘肽（GSH）等組成的活性氧清除系統(tǒng)的功能逐漸降低，活性氧積累得越來(lái)越多，最終使細(xì)胞膜發(fā)生膜質(zhì)過(guò)氧化并發(fā)生自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，形成丙二醛（MDA），使細(xì)胞膜流動(dòng)性下降，膜功能受到傷害。MDA 的積累可能對(duì)膜和細(xì)胞造成一定的傷害，它在一定程度上也反映植物受環(huán)境逆境脅迫的情況，并在逆境脅迫下植物的抗性與MDA 含量呈負(fù)相關(guān)（趙永平等，2018）。本研究中，接種組和對(duì)照組丙二醛含量在60%以下低含水量（干旱脅迫）情況下表現(xiàn)先升后降趨勢(shì)，且接種組丙二醛含量顯著低于未接種組，在這種脅迫條件下，丙二醛含量顯著降低可能是由于接種后，AMF刺激了抗氧化酶系統(tǒng)，抗氧化酶系統(tǒng)去除了活性氧，膜脂受到的過(guò)氧化作用減弱，從而產(chǎn)生的丙二醛量下降。丙二醛含量降低，說(shuō)明膜功能損害程度小，反映出接種摩西斗管囊霉在一定程度上提高了幼苗對(duì)水分脅迫的抗耐性。100%含水量（濕害）處理組丙二醛含量出現(xiàn)先升后降，表明幼苗受到一定的濕害，接種組的丙二醛含量高于對(duì)照組，可能由于高水分條件下摩西斗管囊霉總侵染率下降，且不利于菌絲、叢枝等結(jié)構(gòu)的形成，摩西斗管囊霉發(fā)揮的作用并不明顯。

3.3 不同水分含量對(duì)幼苗生長(zhǎng)和存活的影響

叢枝菌根的侵染會(huì)促進(jìn)或改善植物根系對(duì)水分和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的吸收，提高根系含水量（李曉林和曹一平，1993;Smith， 2001;Aroca et al.，2007），改善根際微環(huán)境（Harrison，1999;Shenoy & Kalagudi， 2005;馬俊卿等，2018），從而促進(jìn)植物的生長(zhǎng)。本研究結(jié)果顯示，在接種條件下伯樂(lè)樹幼苗在相對(duì)含水量60%下生長(zhǎng)得最好且成活率最高。由于相對(duì)含水量60%下菌絲、叢枝和總侵染率均最高，說(shuō)明相對(duì)含水量60%是既利于幼苗生長(zhǎng)又利于摩西斗管囊霉侵染的適宜條件，接種摩西斗管囊霉有利于提高幼苗在干旱脅迫下生長(zhǎng)的能力。但在高含水量（80%和100%）時(shí)接種組株高增長(zhǎng)量和基徑增長(zhǎng)量均低于未接種組，出現(xiàn)了與在低含水量（40%和60%）條件下相反的情況，前者后者可能由于幼苗對(duì)短期的水分脅迫有一定的耐受力。在不接種的條件下，伯樂(lè)樹幼苗在相對(duì)含水量80%下生長(zhǎng)較好，表明土壤水分含量跟AMF之間存在交互作用，即接種摩西斗管囊霉能夠使伯樂(lè)樹幼苗在更低的水分條件下生長(zhǎng)和存活。在相同的相對(duì)含水量條件下接種組成活率均高于未接種組，可能由于菌根菌侵染與植物形成共生關(guān)系，增強(qiáng)了植物抵抗水分脅迫的能力，提高了成活率。100%高含水量狀態(tài)下幼苗成活率顯著高于40%低含水量狀態(tài)下的，可能由于伯樂(lè)樹幼苗對(duì)短期的水分脅迫具有一定的耐受力，而對(duì)干旱脅迫則更為敏感。

4 結(jié)論

本研究通過(guò)對(duì)接種摩西斗管囊霉和不同水分處理前后的侵染率、形態(tài)和生理指標(biāo)及成活率分析，得出不同水分條件影響摩西斗管囊霉菌絲、泡囊和叢枝結(jié)構(gòu)及總的侵染率，在土壤相對(duì)含水量60%條件下適宜菌根真菌的侵染。40%低水分含量和80%以上高水分含量都不利于菌根真菌對(duì)幼苗的侵染。在40%和60%低水分量含量條件下，接種幼苗的丙二醛含量顯著低于對(duì)照，表明接種摩西斗管囊霉可提高幼苗對(duì)干旱脅迫的抗耐性，但80%和100%高水分含量條件下接種對(duì)幼苗的作用不明顯;在不同水分含量對(duì)幼苗生長(zhǎng)和存活的影響方面，相對(duì)含水量60%是既利于幼苗生長(zhǎng)又利于摩西斗管囊霉侵染的適宜水分條件，接種摩西斗管囊霉有利于提高幼苗在干旱脅迫下生長(zhǎng)的能力。伯樂(lè)樹幼苗對(duì)短期的水分脅迫具有一定的耐受力，而對(duì)干旱脅迫則更為敏感。幼苗在自然條件下適宜生長(zhǎng)的土壤相對(duì)含水量為80%;相同水分條件下，接種幼苗成活率高于對(duì)照，接種摩西斗管囊霉有利于提高幼苗的成活率，其中相對(duì)含水量60%下接種幼苗的成活率最高，在40%低水分含量或100%飽和水分含量下，幼苗的成活率都相對(duì)較低。本研究為解決伯樂(lè)樹繁育關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題，推進(jìn)解瀕和保育工作提供了參考。

致謝 中國(guó)科學(xué)院華南植物園唐旭利研究員、葉文副研究員、劉海林助研對(duì)本研究工作和論文撰寫提出了很好的意見(jiàn)和建議，在此表示感謝！

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