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    沉降菌監(jiān)測碟暴露時間及沉降菌監(jiān)測數(shù)據(jù)報告問題

    2019-09-10 14:45:36張爽龐月
    醫(yī)學(xué)食療與健康 2019年6期

    張爽 龐月

    [摘要]針對潔凈區(qū)動態(tài)沉降菌監(jiān)測,A級區(qū)以平均值報告這個區(qū)域的監(jiān)測結(jié)果。但任何一個監(jiān)測碟中發(fā)現(xiàn)微生物都應(yīng)該調(diào)查原因;對90mm平皿TSA培養(yǎng)基,在標(biāo)準(zhǔn)條件下考察了暴露120min、240min的失水率,結(jié)果表明,在標(biāo)準(zhǔn)條件下,暴露120min的90mm平皿TSA培養(yǎng)基能保證各實驗菌種培養(yǎng)霉要。

    [關(guān)鍵詞]沉降菌;放置時間;失永率

    [中圖分類號]TQ460.8 [文獻標(biāo)識碼]A [文章編號]2096-5249(2019)06-0296-01

    《中國藥典》2015年版四部通則1100中要求無菌檢查的試驗環(huán)境必須達到無菌檢查的要求。日常檢驗需要對試驗環(huán)境沉降菌進行監(jiān)控?!吨袊幍洹?015年版指導(dǎo)原則9205藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導(dǎo)原則中表4注:各潔凈級別環(huán)境微生物監(jiān)測的動態(tài)標(biāo)準(zhǔn)的注解要求表中各數(shù)值均為平均值,根據(jù)EUGMP和FDA指南,A級潔凈區(qū)空氣氣流形式是層流,監(jiān)測碟的結(jié)果直接反映垂直上方的空氣質(zhì)量。所以A級區(qū)應(yīng)該在原始記錄體現(xiàn)每個監(jiān)控碟的原始結(jié)果,最后以平均值報告這個區(qū)域的監(jiān)測結(jié)果。但任何一個監(jiān)測碟中發(fā)現(xiàn)微生物都應(yīng)該調(diào)查原因。

    《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(2010年修訂版)》中規(guī)定動態(tài)沉降菌監(jiān)測時間為4h,但單個培養(yǎng)皿暴露時間可以小于4h。中國藥典2015年版指導(dǎo)原則9205藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導(dǎo)原則中也規(guī)定單個沉降碟的暴露時間可以少于4小時。培養(yǎng)基適用性試驗合格的沉降菌試驗用培養(yǎng)基在監(jiān)測時有三個關(guān)鍵點:培養(yǎng)基回收率、培養(yǎng)基含水量、培養(yǎng)基放置時間。我們知道一定條件下回收率和含水量呈正比關(guān)系,而含水量與培養(yǎng)基放置時間呈反比關(guān)系。

    1沉降菌監(jiān)測(培養(yǎng)基放置)時間確定原則

    1.1潔凈區(qū)環(huán)境(風(fēng)速、溫度及相對濕度)

    無菌檢查所在區(qū)域為A級潔凈區(qū),A級潔凈區(qū)風(fēng)速為0.36-0.54m/s,溫度一般控制在18-26℃,相對濕度在45%-65%。我們未挑戰(zhàn)極限條件,選擇標(biāo)準(zhǔn)條件:溫度24℃,相對濕度55%,風(fēng)速0.45.m/s。

    1.2培養(yǎng)基的選擇

    中國藥典2015年版規(guī)定:如果培養(yǎng)基不能終端滅菌,在使用前應(yīng)進行100%的預(yù)培養(yǎng)。所以我們沉降菌監(jiān)測時,使用的為用外購培養(yǎng)基干粉自制90mm平皿培養(yǎng)基,培養(yǎng)基為TSA,灌注量為20ml。市售培養(yǎng)基很多,我們選擇一個品牌培養(yǎng)基干粉,自制平皿培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)后進行試驗。

    2試驗材料

    2.1材料

    TSA培養(yǎng)基(批號:160322北京陸橋技術(shù)有限責(zé)任公司)、溫濕度記錄儀、萬分之一電子天平、刻度吸管等。

    2.2失水率測定方法

    在沉降菌監(jiān)測時,培養(yǎng)基暴露于空氣中,水分不斷蒸發(fā)流失。沉降菌監(jiān)測培養(yǎng)基必須維持足夠水分,培養(yǎng)基水分低于一定限度,回收率無法實現(xiàn)。為了考察暴露時間與失水率的關(guān)系,對暴露不同時間的沉降碟測量重量變化情況,以估計其失水率情況。

    在A級區(qū)域送風(fēng)風(fēng)速調(diào)節(jié)0.45.m/s,待風(fēng)速和溫濕度平衡。將90mm自制平皿培養(yǎng)基,共4塊,測定前用精確到0.01g的電子天平分別稱重,后均勻鋪設(shè)在層流下方操作臺表面,打開各個碟蓋,按沉降菌監(jiān)測方法操作,開始計時。分別在第120分鐘、240分鐘將沉降碟各取出2塊,加蓋,用精確到0.01g的電子天平稱重,后將各沉降碟培養(yǎng)基挖出,用精確到0.01g的電子天平稱重,計算不同暴露時間的沉降碟的失水率。

    3失水率測定結(jié)果

    試驗溫度24℃,相對濕度55%,暴露120min失水率達到9.76%,在暴露240min時失水率超過30%達到33.99%。

    4本試驗考察了沉降菌檢測試驗過程中。某品牌培養(yǎng)基自制平皿培養(yǎng)基失水率與暴露時間的關(guān)系。

    本試驗采用的環(huán)境為模擬標(biāo)準(zhǔn)條件,暴露120min培養(yǎng)基失水近10%,能夠滿足沉降菌培養(yǎng)的需要??紤]失水率還與培養(yǎng)基品牌,溫濕度,風(fēng)速等條件有關(guān),每2h以內(nèi)更換動態(tài)沉降菌監(jiān)測培養(yǎng)皿能夠滿足環(huán)境監(jiān)測需要。以平均值報告A級區(qū)域的監(jiān)測結(jié)果。但任何一個監(jiān)測碟中發(fā)現(xiàn)微生物都應(yīng)該調(diào)查原因。

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