基于生理生化指標(biāo)選擇紅錐二代優(yōu)良家系

譚長(zhǎng)強(qiáng) 申文輝 劉秀 曹艷云 黃志玲 郝海坤

摘?要：通過(guò)對(duì)29個(gè)紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系苗光合碳氮同化過(guò)程關(guān)鍵物（葉綠素、硝酸還原酶活性、谷氨酰胺合成酶活性、總ATP酶含量、PEP羧化酶含量和RUBP羧化酶含量）進(jìn)行測(cè)定，運(yùn)用主成分分析及隸屬函數(shù)法進(jìn)行優(yōu)良家系的篩選和評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：9個(gè)生理指標(biāo)29個(gè)家系間均存在顯著差異。葉綠素a含量為0.13～0.72 mg·g-1FW，葉綠素b含量為0.01～0.27 mg·g-1FW，葉綠素a+b含量為0.18～0.98 mg·g-1FW，類(lèi)胡蘿卜素含量為0.03～0.32 mg·g-1FW，硝酸還原酶活性為1.16～10.26 μg·g-1·h-1，谷氨酰胺合成酶活性為0.30～1.24 A·mg-1protein·h-1，總ATP酶含量為0.37～3.55 U·mg-1 prot，PEP羧化酶含量為8.42～21.24 IU·L-1，RUBP羧化酶含量為2.09～9.12 ng·mL-1。其中，總ATP酶含量變異最大，其次為硝酸還原酶活性，變異最小的為RUBP羧化酶含量。采用主成分分析及隸屬函數(shù)法分別篩選出10個(gè)紅錐優(yōu)樹(shù)二代優(yōu)良家系，重復(fù)率達(dá)到90%，分別為B2、B5、P5、A6、P3、P6、R3、D2、R4家系。這說(shuō)明主成分分析法和隸屬函數(shù)法均可用于評(píng)價(jià)紅錐二代優(yōu)良家系。

關(guān)鍵詞： 轉(zhuǎn)化酶， 隸屬函數(shù)法， 苗期變異， 主成分分析法， 苗期選擇

Seedling selection of the second superior families of Castanopsis hystrix based on the analysis of physiological indices

TAN Zhangqiang， SHEN Wenhui*， LIU Xiu， CAO Yanyun， HUANG Zhiling， HAO Haikun

（ Guangxi Academy of Forestry， Guangxi Zhuang Autonomous Region， Nanning 530002， China ）

Abstract：By using 29 families of Castanopsis hystrix seedlings as experimental material， we measured key substances in the process of photosynthetic carbon and nitrogen assimilation of Chlorophyll， nitrate reductase and glutamine synthetase activity， total contents of ATP enzyme， PEP carboxylase and RUBP carboxylase content， and their superiorities were evaluated with principal component analysis and membership function method. The results were as follows： There were significant differences of all indexes among the 29 families. Chlorophyll a content varied from 0.13 to 0.72 mg·g-1FW， chlorophyll b content varied from 0.01 to 0.27 mg·g-1FW， chlorophyll （a+b） content varied from 0.18 to 0.98 mg·g-1FW， carotenoid content varied from 0.03 to 0.32 mg·g-1FW，nitrate reductase （NR） activity varied from 1.16 to 10.26 μg·g-1·h-1， glutamine synthetase （GS） activity varied from 0.30 to 1.24 A·mg-1protein·h-1， total contents of ATPase varied from 0.37 to 3.55 U·mg-1 prot， PEP Case content varied from 8.42 to 21.24 IU·L-1 and RUBP case content varied from 2.09 to 9.12 ng·mL-1. Among indexes， the total contents of ATP enzyme varied most， followed by the nitrate reductase activity， and the RUBP carboxylase content varied minimum. The ten families was selected respectively by principal component analysis and the method of subordinate function respectively and repetition rate reached 90%. Repeat the families were B2， B5， P5， A6， P3， P6， R3， D2 and R4 families. This instructed that principal component analysis and subordinate function method are good for the evaluation of the second generation family of Castanopsis hystrix.

Key words： invertase， membership function method， seedling stage variation， principal component analysis， seedling selection

早期選擇是林木未達(dá)到經(jīng)濟(jì)成熟前所進(jìn)行的選擇（楊秀艷等，2004）。前人研究指出，對(duì)林木苗期個(gè)體及優(yōu)良家系的選擇，不僅能縮短育種周期，而且還能降低測(cè)定林的試驗(yàn)規(guī)模，更好地提高林木遺傳增益，降低試驗(yàn)成本（杜克兵等，2009;劉代億等，2009;王軍輝等，2000）。葉綠素具有吸收和傳遞光能的作用，為植物光合作用提供最原始的能量來(lái)源，其含量的高低在一定層度上可以反映植物生產(chǎn)能力（高紅霞等，2016;陳隆升，2009）。硝酸還原酶、谷氨酰胺合成酶、總ATP酶、PEP羧化酶和RUBP羧化酶等轉(zhuǎn)化酶是衡量植物同化及轉(zhuǎn)化利用能力，以及植物細(xì)胞代謝及生長(zhǎng)強(qiáng)度的指標(biāo)（高紅霞等，2016;陳隆升，2009;蔡瑞國(guó)等，2008;楊亮等，2007;郝乃斌等，1991;潘瑞熾，2010;吳正鋒等，2014;趙蓉等，2013; Liu et al.， 2015;周竹青等，2009;陳穎等，2015）。因此，通過(guò)研究紅錐苗期生理及轉(zhuǎn)化酶指標(biāo)，進(jìn)行紅錐優(yōu)良家系的苗期篩選具有現(xiàn)實(shí)的可行性。

紅錐（Castanopsis hystrix）為殼斗科錐屬（Castanopsis）的常綠喬木，是優(yōu)質(zhì)珍貴用材樹(shù)種，適應(yīng)性強(qiáng)，生長(zhǎng)快（朱積余等，2014）。目前，僅廣西紅錐造林面積在15 000 hm2以上，隨著國(guó)家鄉(xiāng)土珍貴樹(shù)種木材儲(chǔ)備計(jì)劃的實(shí)施、市場(chǎng)對(duì)高檔珍貴用材需求的增長(zhǎng)及天然林的禁伐，紅錐人工造林的區(qū)域?qū)⑦M(jìn)一步擴(kuò)大。而對(duì)紅錐的遺傳改良研究相對(duì)滯后，難以滿足生產(chǎn)對(duì)其的需要。當(dāng)前對(duì)紅錐遺傳改良研究多集中在紅錐優(yōu)樹(shù)一代家系生長(zhǎng)性狀、光合能力等方面（朱積余等，2014;蔣燚等，2013），有關(guān)利用紅錐光合碳氮同化過(guò)程中關(guān)鍵物質(zhì)的紅錐二代優(yōu)良家系早期選擇尚未見(jiàn)有報(bào)道，本研究將為紅錐進(jìn)一步的選育提供科學(xué)依據(jù)。

1?材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)設(shè)置在廣西南寧廣西林科院珍貴樹(shù)種苗圃（108°20′ E，22°55′ N），屬濕潤(rùn)的亞熱帶季風(fēng)氣候，海拔約80 m，7—8月平均氣溫28.2 ℃，1月平均氣溫12.80 ℃，極端最高氣溫39.4 ℃，極端最低氣溫-1.5 ℃，年均氣溫21.7 ℃。日照時(shí)數(shù)在1 550 h以上，10 ℃積溫為7 200 ℃，全年幾乎無(wú)霜;年均降雨量1 300 mm，干濕季節(jié)明顯，主要集中在4—9月。土壤為赤紅壤，pH值為5.6，肥力中等，土壤經(jīng)風(fēng)干、粉碎、過(guò)篩備用。

1.2 材料及來(lái)源

種子于2016年11—12月采集于廣西憑祥的紅錐優(yōu)樹(shù)子代林，共計(jì)29個(gè)家系。漚曬去殼后，先篩選健壯飽滿種子，然后將所有種子撒于沙床中催芽，待60%～70%的種子胚芽出土?xí)r即可開(kāi)始移植，選取長(zhǎng)出胚芽或葉子的小苗進(jìn)行移植至規(guī)格為18 cm × 18 cm的育苗袋中，基質(zhì)為黃心土。育苗采取相同的水肥、殺蟲(chóng)等管理措施。

1.3 生理指標(biāo)測(cè)定

2018年1月，選擇每個(gè)家系苗高、地徑平均值附近的5株進(jìn)行生理指標(biāo)的測(cè)定，每株選取3片無(wú)病蟲(chóng)害、剛成熟而未老化的葉片，每個(gè)指標(biāo)3次重復(fù)。各指標(biāo)測(cè)定方法如下，葉綠素a、葉綠素b、類(lèi)胡蘿卜素含量采用丙酮-乙醇混合提取法（鄒琦，2000），硝酸還原酶活性采用活體法（鄒琦，2000），谷氨酰胺合成酶參照蔡紅梅等（2010）的測(cè)定方法，總ATP酶采用南京建成的超微量ATP酶測(cè)試盒測(cè)定，PEP羧化酶、RUBP羧化酶采用酶聯(lián)免疫法的ELISA試劑盒測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)

利用WPS、DPS7.05和SPSS19.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理及統(tǒng)計(jì)分析。不同紅錐家系綜合評(píng)價(jià)用隸屬函數(shù)法，其公式為u（xij）=（xij-xjmin）/（xjmax-xjmin）（1）

式中，u（xij）為紅錐i家系j指標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)化值，xij為紅錐i家系j指標(biāo)值，xjmax為各家系j指標(biāo)的最大值。確定不同指標(biāo)的權(quán)重，權(quán)重確定采用標(biāo)準(zhǔn)差系數(shù)法。計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差系數(shù)vj，再求各指標(biāo)的權(quán)重wj。

vj=（∑ni=1（xij-xj）2）/xj（2）

wj=vj/∑nj=1vj（3）

求不同家系各指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià)值，來(lái)衡量不同紅錐優(yōu)樹(shù)二代苗木的優(yōu)劣狀況。

D=∑nj=1[u（xj）×wj]（4）

2?結(jié)果與分析

2.1 29個(gè)紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系苗生理指標(biāo)

從表1可以看出，29個(gè)家系的葉片葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a+b、類(lèi)胡蘿卜素、硝酸還原酶、谷氨酰胺合成酶、總ATP酶、PEP羧化酶、RUBP羧化酶在29個(gè)紅錐二代家系間差異顯著（P<0.05）。這表明紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系間存在豐富變異，開(kāi)展紅錐優(yōu)樹(shù)二代優(yōu)良家系的苗期選擇是可行的。其中，葉綠素a含量為0.13～0.72 mg·g-1FW，平均值為0.38 mg·g-1FW，P5家系含量最高，比平均值高155.8%;葉綠素b含量為0.01～0.27 mg·g-1FW，平均值為0.12 mg·g-1FW，P5家系含量最高，比平均值高209.3%;葉綠素a+b含量為0.18～0.98 mg·g-1FW，平均值為0.50 mg·g-1FW，P5家系含量最高，比平均值高160.2%;類(lèi)胡蘿卜素含量為0.03～0.32 mg·g-1FW，平均值為0.13 mg·g-1FW，R2家系含量最高，比平均值高222.1%;硝酸還原酶活性為1.16～10.26 μg·g-1·h-1，平均值為5.00 μg·g-1·h-1，B5家系含量最高，比平均值高182.1%;谷氨酰胺合成酶活性為0.30～1.24 A·mg-1protein·h-1，平均值為0.54 A·mg-1protein·h-1，P4家系含量最高，比平均值高172.8%;總ATP酶含量為0.37～3.55 U·mg-1 prot，平均值為1.36 U·mg-1 prot，A9家系含量最高，比平均值高233.8%;PEP羧化酶含量為8.42～21.24 IU·L-1，平均值為13.57 IU·L-1，B5家系含量最高，比平均值高94.5%;RUBP羧化酶含量為2.09～9.12 ng·mL-1，平均值為6.92 ng·mL-1，B2家系含量最高，比平均值高101.5%。

2.2 單個(gè)指標(biāo)選擇的潛力

通過(guò)對(duì)單個(gè)指標(biāo)的選擇（表2）可以了解紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系內(nèi)各指標(biāo)遺傳改良的最大潛力，每個(gè)指標(biāo)下排名前10的優(yōu)良家系相互交叉但不完全相同。排名前10的家系平均值高出總體平均值，最大的指標(biāo)為總ATP酶含量;其次為硝酸還原酶活性;最小的為RUBP羧化酶含量。

2.3紅錐二代優(yōu)良家系的苗期選擇

2.3.1 主成分分析法?從表3可以看出，根據(jù)累計(jì)貢獻(xiàn)率>80%的原則選取前4個(gè)主成分進(jìn)行分析，它們的累計(jì)貢獻(xiàn)率為80.6%，表明前4個(gè)主成分能代表所有抗旱指標(biāo)進(jìn)行不同家系間抗旱性評(píng)價(jià)。第一主成分主要有葉綠素a、葉綠素b、葉綠素（a+b）、類(lèi)胡蘿卜素，其特征值為3.56，貢獻(xiàn)率為39.6%;第二主成分主要有硝酸還原酶、總ATP酶、PEP羧化酶，其特征值為1.47，貢獻(xiàn)率為16.3%;第三主成分主要有谷氨酰胺合成酶、PEP羧化酶， 其特征值為1.20， 貢獻(xiàn)率為13.3%; 第四主成分主要有谷氨酰胺合成酶、總ATP酶、RUBP羧化酶，其特征值為1.03，貢獻(xiàn)率為11.4%。運(yùn)用主成分分析法對(duì)29個(gè)紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系進(jìn)行優(yōu)選排序，排序前10的家系（表4）分別為B2>B5>P5>A6>P3>P6>R3>D2>P7>R4。

2.3.2 隸屬函數(shù)法?運(yùn)用隸屬函數(shù)法排序后， 排在前10的家系（表5）分別為B2>B5>A6>D2>A9>P3>P5>R4>P6>R3。

2.3.3 優(yōu)良家系綜合選擇?利用主成分分析法和隸屬函數(shù)法兩種評(píng)價(jià)方法得到的結(jié)果不完全相同，但總體趨勢(shì)一致（表4，表5）。以?xún)煞N方法中共有的家系為入選家系，選出B2、B5、P5、A6、P3、P6、R3、D2、R4。

3?討論與結(jié)論

植物生理代謝過(guò)程是環(huán)境及基因調(diào)控共同作用的結(jié)果。在控制環(huán)境下，如果某一植物在某種性狀上基因型存在差異，那么該種差異將會(huì)體現(xiàn)在與之對(duì)應(yīng)的生理生物標(biāo)記上 （蔡紅梅等，2010;姜磊等，2005）。本研究中，葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a+b、類(lèi)胡蘿卜素、硝酸還原酶、谷氨酰胺合成酶、總ATP酶、PEP羧化酶、RUBP羧化酶在29個(gè)紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系間具有顯著性差異，反映出紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系間存在豐富的遺傳多樣性，這為開(kāi)展紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系的苗期選擇提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。同樣，趙蓉等（2013）對(duì)栓皮櫟優(yōu)樹(shù)子代硝酸還原酶等生理生化特性進(jìn)行了研究，也認(rèn)為栓皮櫟子代家系之間存在顯著差異，可以初步作為栓皮櫟速生性狀早期選擇的指標(biāo)。

從單個(gè)指標(biāo)進(jìn)行選擇紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系，各指標(biāo)入選的家系存在一定的重復(fù)和差異。一方面說(shuō)明各光合碳氮同化生理指標(biāo)之間存在一定相關(guān)性，各指標(biāo)所反映的信息存在重疊性;另一方面說(shuō)明單個(gè)指標(biāo)在紅錐生長(zhǎng)過(guò)程中作用不同，對(duì)紅錐優(yōu)良家系進(jìn)行篩選準(zhǔn)確性存在偏差。因此，通過(guò)多指標(biāo)的方法進(jìn)行評(píng)價(jià)和篩選才能更好地達(dá)到預(yù)期的目的。目前，多指標(biāo)的綜合篩選與評(píng)價(jià)主要有隸屬函數(shù)法、主成分分析法和聚類(lèi)分析法（楊升等，2013）。姜順邦等（2016）運(yùn)用隸屬函數(shù)法對(duì)閩楠優(yōu)樹(shù)子代苗期進(jìn)行了優(yōu)選。高紅霞等（2016）同時(shí)采用隸屬函數(shù)法和主成分分析法對(duì)紅砂家系進(jìn)行評(píng)價(jià)，最終兩種方法篩選出的優(yōu)良家系重合率達(dá)到80%。本研究得出了類(lèi)似的結(jié)果，兩種方法綜合評(píng)價(jià)篩選出的排名前10的家系，重復(fù)率達(dá)到90%，分別為B2、B5、P5、A6、P3、P6、R3、D2、R4家系。這表明主成分分析法和隸屬函數(shù)法均可用于評(píng)價(jià)紅錐二代優(yōu)良家系。對(duì)比本研究前期對(duì)生長(zhǎng)研究結(jié)果苗高（B2、A7、B5、A8、P3、B4、A6、R4、D2和R3）、地徑（B2、A7、B5、P3、P2、A3、R4、D2、A6和A2）排名前10位的家系可以看出，生理指標(biāo)與苗高、地徑排名前10的家系重復(fù)率均達(dá)到60%以上。說(shuō)明利用光合碳氮同化過(guò)程中關(guān)鍵物分析紅錐優(yōu)良家系的苗期選擇具有一定的可行性。

本研究采用9個(gè)光合碳氮同化過(guò)程中關(guān)鍵生理生化指標(biāo)，對(duì)紅錐優(yōu)樹(shù)二代家系進(jìn)行苗期選擇，其結(jié)果與后期家系生長(zhǎng)表現(xiàn)是否密切相關(guān)，還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。在未來(lái)研究中，將持續(xù)觀測(cè)其他生長(zhǎng)及生理生化指標(biāo)（如樹(shù)高、胸徑、材積、光合等），進(jìn)一步優(yōu)化評(píng)價(jià)體系，以便更好地探討紅錐苗期選擇的可靠性。

參考文獻(xiàn)：

CAI HM， XIAO JH， ZHANG QF， et al.， 2010. Co-suppressed glutamine synthetasegene modifies nitrogen metabolism and plant growth in rice [J]. Chin Sci Bull， 55（10）： 871-882.[蔡紅梅， 肖景華， 張啟發(fā)， 等， 2010. 抑制表達(dá)谷氨酰胺合成酶基因?qū)λ镜x和生長(zhǎng)發(fā)育的影響 [J]. 科學(xué)通報(bào)， 55（10）：871-882.]

CAI RG， ZHANG M， YIN YP， et al.， 2008.Photosynthetic characteristics and antioxidative metabolism of flag leaves in responses to nitrogen application in wheat during grain filling [J]. Sci Agric Sin ， 41（1）：53-62.[蔡瑞國(guó)， 張敏， 尹燕枰， 等， 2008. 小麥灌漿過(guò)程中旗葉光合及抗氧化代謝與氮素營(yíng)養(yǎng)關(guān)系研究 [J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， 41（1）：53-62.]

CHEN LS，2009. There searches on seed quality and seedling growth characteristics of Pistacia chinensis bunge from different provenances [D]. Nanjing： Nanjing Forestry University.[陳隆升， 2009. 不同種源黃連木種子品質(zhì)與苗期生長(zhǎng)特性研究 [D]. 南京： 南京林業(yè)大學(xué).]

CHEN Y， LIU SL， YANG RJ， et al.， 2015. Effects of cadmium on growth， plasma membrane ATPase activity， and absorption of N， P and K in Solanum nigrum L. seedlings [J]. Chin J Appl Environ Biol， 21（1）： 121-128.[陳穎， 劉柿良， 楊容孑， 等， 2015. 鎘脅迫對(duì)龍葵生長(zhǎng)、質(zhì)膜ATP酶活性及氮磷鉀吸收的影響 [J]. 應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)， 21（1）：121-128.]

DU KB， XU L， SHEN BX， et al.， 2009. Genetic analysis and seedling selection of the Poplar progenies of aigeiros section [J]. J Huazhong Agric Univ， 28（5）： 624-630.[杜克兵， 許林， 沈?qū)毾桑?等， 2009. 黑楊派楊樹(shù)雜交子代的遺傳分析及苗期選擇 [J]. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 28（5）：624-630.]

GAO HX， SU SP， LI Y， et al.， 2016.Early selection of drought-resistant superior families of Reaumuria soongorica based on analysis of osmoregulation substances and chlorophyll [J]. Chin J Appl Ecol， 27（1）： 40-48.[高紅霞， 蘇世平， 李毅， 等， 2016. 基于滲透調(diào)解物質(zhì)及葉綠素分析紅砂抗旱優(yōu)良家系的早期選擇 [J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)， 27（1）：40-48.]

HAO NB， DU WG， 1991. A comparative study of PEPC activity of green organs in C3 plant [J]. Acta Bot Sin， （9）： 692-697.[郝乃斌， 杜維廣， 1991. C3植物綠色器官PEP羧化酶活性的比較研究 [J]. 植物學(xué)報(bào)， （9）：692-697.]

JIANG Y， LI ZH， ZHU JY， et al.， 2013. Diurnal variations of photosynthetic characteristics of different provenances Castanopsis hystrix A. DC. young plantations [J]. J Centr S Univ ForTechnol， 33（6）： 43-47.[蔣燚， 李志輝， 朱積余， 等， 2013. 不同紅錐種源幼林光合特性日變化測(cè)定與分析 [J]. 中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報(bào)， 33（6）：43-47.]

JIANG L， YANG XY， 2005. Applications of physiological and biochemical indexes in tree genetics and breeding [J]. Hebei J For Orch Res， （1）： 76-79.[姜磊， 楊秀艷， 2005. 生理生化指標(biāo)在林木遺傳育種中的應(yīng)用 [J]. 河北林果研究， （1）： 76-79.]

JIANG SB， ZHANG Y， WEI XL， et al.， 2016. Growth and photosynthetic physiology for two groups of Phoebe bournei plus tree seedlings [J]. J Zhejiang A & F Univ， 33（1）： 51-59.[姜順邦， 張怡， 韋小麗， 等， 2016. 不同閩楠優(yōu)樹(shù)子代苗期生長(zhǎng)及光合生理特性比較 [J]. 浙江農(nóng)林大學(xué)學(xué)報(bào)， 33（1）：51-59.]

LIU DY， LI GQ， LI LF， et al.， 2009. Seedling selection of superior families and excellent-individuals selection of Pinus yunnanensis [J]. J NW For Univ， 24（4）： 67-72.[劉代億， 李根前， 李蓮芳， 等， 2009. 云南松優(yōu)良家系及優(yōu)良個(gè)體苗期選擇研究 [J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào)， 24（4）：67-72.]

LIU SL， YANG RJ， MA MD， et al.， 2015. Effects of exogenous NO on the growth， mineral nutrient content， antioxidant system， and ATPase activities of Trifolium repens L. plants under cadmium stress[J]. Acta Physiol Plant， 37（1）： e1721

PAN RZ， 2010. Plant physiology [M]. Beijing： Higher Education Press.[潘瑞熾， 2010. 植物生理學(xué)（第6版） [M]. 北京： 高等教育出版社.]

WANG JH， GU WC， LI B， et al.， 2000.Study on selection of Alnus cremastogyne provenance/family — analysis of growth adaptation and genetic stability [J]. Sci Silv Sin， （3）： 59-66.[王軍輝， 顧萬(wàn)春， 李斌， 等， 2000. 榿木優(yōu)良種源/家系的選擇研究——生長(zhǎng)的適應(yīng)性和遺傳穩(wěn)定性分析 [J]. 林業(yè)科學(xué)， （3）：59-66.]

WU ZF， SUN XW， WANG CB， et al.， 2014. Effects of low light stress on rubisco activity and the ultrastructure of chloroplast in functional leaves of peanut [J]. Chin J Plant Ecol， 38（7）： 740-748.[吳正鋒， 孫學(xué)武， 王才斌， 等， 2014. 弱光脅迫對(duì)花生功能葉片RuBP羧化酶活性及葉綠體超微結(jié)構(gòu)的影響 [J]. 植物生態(tài)學(xué)報(bào)， 38（7）：740-748.]

YANG L， ZHAO HW， LIU JH，2007. Effects of different nitrogen application on GS activity and yield in different quality spring maize varieties [J]. J NE Agric Univ， 38（3）：320-324.[楊亮， 趙宏偉， 劉錦紅， 2007. 氮素用量對(duì)春玉米功能葉片谷氨酰胺合成酶活性及產(chǎn)量的影響 [J]. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)， 38（3）：320-324.]

YANG S， LIU ZX， ZHANG HX， et al.， 2013. Comprehensive evaluation of salt tolerance and screening identification indexes for three tree species [J]. Sci Silv Sin， 49（1）： 91-98.[楊升， 劉正祥， 張華新， 等， 2013. 3個(gè)樹(shù)種苗期耐鹽性綜合評(píng)價(jià)及指標(biāo)篩選 [J]. 林業(yè)科學(xué)， 49（1）：91-98.]

YANG XY， JI KZ， 2004. Early selection in forest tree improvement [J]. World For Res， （2）： 6-8.[楊秀艷， 季孔庶， 2004. 林木育種中的早期選擇 [J]. 世界林業(yè)研究， （2）：6-8.]

ZHAO R， ZHANG CX， ZHANG WH， 2013. Physiological and biochemical characteristics of Quercus variabilis in plus tree progeny [J]. J NW For Univ， 28（1）： 86-89.[趙蓉， 張存旭， 張文輝， 2013. 栓皮櫟優(yōu)樹(shù)子代生理生化特性的研究 [J]. 西北林學(xué)院學(xué)報(bào)， 28（1）：86-89.]

ZHU JY， SHEN WH， JIANG Y， et al.， 2014. Genetic variation and superior family selection of Castanopsis hystrix families [J]. J Trop Subtr Bot， 22（3）： 270-280.[朱積余， 申文輝， 蔣燚， 等， 2014. 紅錐家系遺傳變異與優(yōu)良家系選擇 [J]. 熱帶亞熱帶植物學(xué)報(bào)， 22（3）：270-280.]

ZOU Q， 2000. Plant physiology experiment instruction [M]. Beijing： China Agriculture Press： 163-165.[鄒琦， 2000. 植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) [M]. 北京： 中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社：163-165.]

ZHOU ZQ， LI JW， DENG XY， et al.， 2009. The ATPase acti-vity in phloem cells and its relation to the accumulation of photo-assimilates in developing caryopsis during eheat grain filling [J]. Sci Agric Sin，（42）： 2314-2325.[周竹青， 李繼偉， 鄧詳宜， 等， 2009. 小麥穎果韌皮部細(xì)胞ATPase活性及其與籽粒光合同化物積累關(guān)系 [J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)， （42）：2314-2325.]