氣質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定市售白酒中18種鄰苯二甲酸酯類塑化劑含量

王燕飛 ，顏林平 ，陳 莉 ，王國(guó)軍 ，顏玉華，方子涵

（1.臺(tái)州市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測(cè)研究院，浙江臺(tái)州 318000；2.浙江工商大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，浙江杭州 310018）

鄰苯二甲酸酯（Phthalates，簡(jiǎn)稱PAEs）是一類常見的塑化劑，水體、空氣、土壤和塑料制品等樣品中普遍存在[1-2]。具有胚胎毒性、致畸性、致突變、致癌作用，是一種環(huán)境激素類內(nèi)分泌干擾化合物，而食品是人類接觸PAEs 的最主要來(lái)源之一[3]。衛(wèi)生部將17 種鄰苯二甲酸酯類塑化劑列入可能用于食品的非食用物質(zhì)“黑名單”，塑化劑和三聚氰胺、蘇丹紅、敵敵畏等一樣將作為衛(wèi)生監(jiān)管部門今后的監(jiān)督管理重點(diǎn)之一。中國(guó)、美國(guó)、歐盟等國(guó)家都把其列為優(yōu)先監(jiān)測(cè)污染物，歐盟的2005/84/EC，2007/19/EC 等指令明確規(guī)定了PAEs 含量及遷移量的限量[4]。PAEs 類塑化劑目前已成為國(guó)際上廣泛關(guān)注的一類環(huán)境激素污染物[5-7]。塑化劑的檢測(cè)及污染研究在國(guó)內(nèi)外也已引起人們的重視[8-10]。

PAEs 類塑化劑廣泛存在于食品包裝中，但有調(diào)查發(fā)現(xiàn)，其在方便面餐盒中的遷移率低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[11]，在普通飲料中的遷移也很微量[12]，而白酒中的主要成分是乙醇，其在乙醇中遷移率較高，且釀造生產(chǎn)環(huán)節(jié)工序復(fù)雜，因此其在整個(gè)過(guò)程中被塑化劑污染的可能性比較大，存在一定的特定遷移。2016 年，北京市售80 件白酒樣品中有42 件樣品檢測(cè)出PAEs，總檢出率高達(dá)47.5%[13]。2015 年，對(duì)濟(jì)南市售白酒(品牌酒及散裝酒)進(jìn)行采樣，檢測(cè)的49份樣品中，DBP 超標(biāo)率最高達(dá)54.5 %，個(gè)別樣品含量高達(dá)6.58 mg/kg，超出標(biāo)準(zhǔn)限量21.9 倍[14]。究其來(lái)源是在生產(chǎn)過(guò)程中白酒接觸的塑料管道、塑料容器等遷移引入的，相關(guān)部門責(zé)令督促將塑料管道及容器更換為不銹鋼。如今時(shí)隔幾年，市售白酒，尤其是低端白酒仍有很多是塑料包裝的，其中的塑化劑污染情況有無(wú)改善，仍然需要我們后續(xù)的跟蹤研究，為相關(guān)的監(jiān)督監(jiān)管提供依據(jù)，更好的保障消費(fèi)者的食品安全。

總結(jié)國(guó)內(nèi)外相關(guān)學(xué)術(shù)報(bào)道和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，PAEs的測(cè)定方法主要有紫外分光光度法[15]、液相色譜法（LC）[16-17]、氣相色譜法（GC）[18-20]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）[21-22]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LCMS）[23]等。目前國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.271—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定》和GB 31604.30—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品接觸材料及制品鄰苯二甲酸酯的測(cè)定和遷移量的測(cè)定》均采用氣相色譜-質(zhì)聯(lián)用法。其中紫外分光光度法選擇性和靈敏度相對(duì)較差，只限于PAEs 總量的測(cè)定。目前，食品中PAEs 類塑化劑的測(cè)定方法主要是基于色譜方法，在所有分析方法中，氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）和串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）占33%，高效液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）和串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）占16 %[24]。G.Cinelli 等[25]利用氣相色譜-質(zhì)譜法快速分析了酒中DMP、DEP、DBP、DEHP 等6 種鄰苯二甲酸酯塑化劑，其r≥0.9719，回收率85%～100.5%，最低檢出限達(dá)到0.022 μ g/L。

1 材料與方法

1.1 樣品

采用分層整群隨機(jī)抽樣方式，采集某市各縣市區(qū)銷售的白酒樣品33 份，采樣地點(diǎn)包括商場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、小食雜店、超市、生產(chǎn)企業(yè)等，樣品為定性塑料桶裝，抽樣時(shí)間為2018年。

1.2 儀器與試劑

安捷倫7890B/5977A 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，美國(guó)Agilent 公司產(chǎn)品；CPA224S 電子天平，德國(guó)賽多利斯股份公司產(chǎn)品；HQ-60-II 渦旋混合器，北方同正；超聲波發(fā)生器；Advantage A10 純水機(jī)，Milli-Q；H-1850R 臺(tái)式冷凍離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司產(chǎn)品。

16種鄰苯二甲酸酯混標(biāo)溶液（1000 mg/L，1 mL,純度＞98 %）：美國(guó)o2si smart solutions 公司產(chǎn)品；鄰苯二甲酸二烯丙酯（DAP，純度99.0 %）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP，純度99.0%），德國(guó)Dr.Ehrenstorfer 公司產(chǎn)品；正己烷（HPLC），德國(guó)默克公司產(chǎn)品。

1.3 樣品前處理與儀器工作條件

1.3.1 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取試樣1.0 g 左右于25 mL 具塞磨口離心管中，加入3 mL 蒸餾水，渦旋混勻，再準(zhǔn)確加入10 mL 正己烷，渦旋1 min，劇烈振搖1 min，超聲提取30 min，1000 r/min 離心5 min，取上清液，供GCMS分析。

1.3.2 儀器工作條件

1.3.2.1 色譜條件

AgilentHP-5MS色譜柱（30m×0.25mm,0.25μm）；程序升溫：初始溫度60 ℃，保持1 min，以20 ℃/min升溫至220 ℃，保持1 min，以5 ℃/min 升溫至250 ℃，保持1 min，再以20 ℃/min 升溫至290 ℃，保持7.5 min；進(jìn)樣口溫度：260 ℃；進(jìn)樣量：1 μL；不分流進(jìn)樣；載氣：高純氦（純度＞99.999%），流速1.0 mL/min。

1.3.2.2 質(zhì)譜條件

電離方式：電子轟擊電離源（EI）；離子源溫度：230 ℃；四級(jí)桿溫度：150 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；電離能量：70 eV；溶劑延遲7.0 min；選擇離子掃描（SIM）監(jiān)測(cè)方式。18 種鄰苯二甲酸酯化合物標(biāo)準(zhǔn)品的總離子流色譜圖見圖1，相關(guān)指標(biāo)見表1。

圖1 18種鄰苯二甲酸酯化合物標(biāo)準(zhǔn)品的總離子流色譜圖

表1 18種PAEs信息、保留時(shí)間、定量離子和定性離子

續(xù)表1 18種PAEs信息、保留時(shí)間、定量離子和定性離子

2 結(jié)果與討論

2.1 方法的線性范圍

精密量取16 種鄰苯二甲酸酯混標(biāo)溶液和鄰苯二甲酸二烯丙酯（DAP）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）標(biāo)準(zhǔn)溶液配成混標(biāo)，分別用正己烷逐級(jí)稀釋，使其中DINP的濃度分別為25.6 μg/mL、12.8 μg/mL、6.4 μ g/mL、3.2 μ g/mL、1.6 μ g/mL 和0.8 μg/mL，其余17 種PAEs 的濃度分別為4.0 μg/mL、2.0 μg/mL、1.0 μg/mL、0.5 μg/mL、0.2 μg/mL和0.1 μg/mL，依次對(duì)系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)行分析，記錄離子流圖的峰面積，以溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。18種PAEs的線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍、檢出限列于表2。由表2 可見，18 種PAEs 濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r≥0.9916。

2.2 方法的精密度和回收率

采用在空白樣品中添加混標(biāo)的方法，分為低濃度和高濃度兩個(gè)加標(biāo)水平，連續(xù)6 次平行測(cè)樣，計(jì)算方法的精密度和加標(biāo)回收率，結(jié)果見表3，結(jié)果顯示，方法的精密度和加標(biāo)回收率結(jié)果令人滿意，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD 范圍為0.55%～4.25%，加標(biāo)回收率范圍為85.3%～110%。

2.3 白酒中PAEs的含量分析

表2 18種化合物的線性方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)和檢出限

表3 不同濃度水平的18種PAEs的RSD和回收率（n=6）

PAEs 存在廣泛，溶劑、器皿等極易污染，因此在測(cè)試過(guò)程中通過(guò)過(guò)程空白試驗(yàn)來(lái)排除干擾污染。本實(shí)驗(yàn)中所用的玻璃器皿洗凈后，用重蒸水淋洗3 次，丙酮浸泡1 h，在200 ℃烘烤2 h，冷卻至室溫后再使用。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中空白實(shí)驗(yàn)均未檢出，符合實(shí)驗(yàn)要求。

對(duì)市售的33 份白酒樣品進(jìn)行檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)，白酒中塑化劑的檢出率仍然較高，統(tǒng)計(jì)33 份白酒樣品生產(chǎn)日期為2015 年5 月至2017 年6 月，常溫貯存。查表4 可看出，33 份樣品中，DIBP、DBP、DPP、DEHP均有不同程度的檢出，其中DIBP檢出10份，檢出率30.3%，檢出值范圍1.02～3.69 mg/kg；DPP 檢出6 份，檢出率18.2%，檢出值范圍1.30～1.54 mg/kg；DBP 檢出28 份，檢出率84.8%，檢出值范圍1.26～5.56 mg/kg；DEHP 檢出15 份，檢出率45.4 %，檢出值范圍1.98～2.15 mg/kg；其余14 種PAEs 均未檢出。對(duì)檢出率較高的DBP 和DEHP 對(duì)應(yīng)的樣品數(shù)據(jù)如表5、表6。從表5 可看出，28 件白酒樣品中，DBP 的檢出含量都在1 mg/kg 以上，其中最大值5.60 mg/kg。從表6 可看出，15 件白酒中DEHP 的檢出含量均在2 mg/kg左右。

表4 33份白酒樣品中18種鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)的檢測(cè)結(jié)果

我國(guó)對(duì)于酒類樣品塑化劑的監(jiān)管市場(chǎng)仍然處于真空狀態(tài)，關(guān)于塑化劑限量的國(guó)標(biāo)并未出臺(tái)，相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)等比較空白。目前市場(chǎng)上關(guān)于鄰苯二甲酸酯類塑化劑的規(guī)定主要有3 個(gè)：一是衛(wèi)生部2011 年第16 號(hào)“關(guān)于公布食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單（第六批）的公告”中禁止17 種鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)添加到食品和食品添加劑。二是衛(wèi)辦監(jiān)督[2011]551號(hào)文件明確規(guī)定“鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)不是食品原料，也不是食品添加劑，嚴(yán)禁在食品、食品添加劑中人為添加”，但只規(guī)定了3 種食品及食品添加劑DEHP、DINP 和DBP 最大殘留量分別為1.5 mg/kg，9.0 mg/kg 和0.3 mg/kg。三是白酒塑化劑風(fēng)波之后，國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委2014 年6 月27 日發(fā)布了白酒產(chǎn)品中塑化劑風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，結(jié)果顯示，白酒中DEHP 和DBP 的含量分別在5.0 mg/kg 和1.0 mg/kg以下時(shí)，對(duì)消費(fèi)者的健康風(fēng)險(xiǎn)處于可接受水平。

表5 28件白酒中DBP的檢測(cè)結(jié)果 (mg/kg)

表6 15件白酒中DEHP的檢測(cè)結(jié)果 (mg/kg)

3 結(jié)論

白酒產(chǎn)品中的塑化劑一般屬于遷移引入，主要來(lái)源于白酒生產(chǎn)過(guò)程中塑料生產(chǎn)管道和塑料包裝盒中塑化劑的遷移，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)其遷移量增多。對(duì)市售隨機(jī)抽檢的33 份白酒樣品進(jìn)行鄰苯二甲酸酯類塑化劑的檢測(cè)，結(jié)果顯示，1—3 年塑料包裝市售白酒中塑化劑的檢出率還是比較高的，DIBP、DBP、DPP、DEHP 均有不同程度的檢出，檢出率范圍在18.2%～84.8%之間，其中DBP、DEHP的檢出率比較高，分別為84.8%、45.4%，DBP 檢出值范圍1.26～5.56 mg/kg，DEHP 檢出值范圍1.98～2.15 mg/kg。對(duì)比衛(wèi)辦監(jiān)督[2011]551 號(hào)文件和塑化劑的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果，可看出市售白酒中塑化劑仍舊存在一定的風(fēng)險(xiǎn)。此次氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)白酒中18 種PAEs 的監(jiān)測(cè)旨在為PAEs 的風(fēng)險(xiǎn)控制和市場(chǎng)監(jiān)控提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)，以期為我國(guó)白酒行業(yè)的有效監(jiān)管和健康發(fā)展提供參考。