Notch1與核轉(zhuǎn)錄因子-κB在腹主動脈瘤血漿中的表達(dá)

時明濤

作者單位：南陽市中心醫(yī)院血管外科，河南 南陽 473000

腹主動脈瘤（AAA）是指腹主動脈某一段的異?；蚓窒扌耘蛎洠罱K使得管壁無法承受血流的沖擊而出現(xiàn)破裂的一種高危疾??；調(diào)查顯示，我國AAA發(fā)病率高達(dá)2%～8.9%，且呈明顯上升趨勢［1］。以往研究結(jié)果顯示，炎癥與AAA發(fā)生有關(guān)［2］。Notch信號通路可通過調(diào)節(jié)多種炎性細(xì)胞因子加重機(jī)體炎性反應(yīng)，參與AAA病理進(jìn)程［3］；核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）是一種細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子，在調(diào)節(jié)炎癥、細(xì)胞免疫方面起重要作用，可能參與AAA發(fā)生、發(fā)展［4］。本研究主要觀察AAA病人血漿Notch1、NF-κB濃度變化，并分析兩者聯(lián)合診斷的敏感性、特異性，探討Notch1、NF-κB在診斷AAA中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2012年1月至2018年1月南陽市中心醫(yī)院收治的84例AAA病人作為AAA組，所有病人均經(jīng)CT檢查診斷為AAA，選取同期入院的性別、年齡相匹配的非AAA病人50例作為對照組。所有研究對象均為無嚴(yán)重感染、惡性腫瘤或其他惡性疾病。兩組病人性別、年齡及吸煙史、糖尿病、高血壓比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。病人或其近親屬知情同意。

表1 84例AAA病人與50例非AAA病人一般資料比較

1.2方法采用CT檢測所有入組對象腎下腹主動脈最大直徑，并根據(jù)腎下腹主動脈直徑分為3組，腎下腹主動脈直徑＜50 mm作為AAA1組，腎下腹主動脈直徑為50～70 mm作為AAA2組，腎下腹主動脈直徑＞70 mm作為AAA3組。所有病人均行空腹靜脈采血2 mL，置于EDTA抗凝試管中，3 000 r/min離心15 min，離心半徑為10 cm，分離血漿，-80℃低溫下保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血漿Notch1、NF-κB水平，試劑盒分別購自武漢華美生物工程有限公司、上海酶聯(lián)生物科技公司。

1.3觀察指標(biāo)①觀察兩組病人腎下腹主動脈最大徑；②比較兩組血漿Notch1、NF-κB水平；③比較不同腎下腹主動脈直徑的AAA病人血漿Notch1、NF-κB水平；④繪制受試者工作特征曲線（ROC）分析，血漿Notch1、NF-κB及其聯(lián)合診斷AAA效能分析；Notch1、NF-κB聯(lián)合診斷時，Notch1、NF-κB任一一項超過臨界值，則診斷為陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗，靈敏度和特異度比較采用多組計數(shù)資料χ2檢驗，兩組間比較采用χ2分割檢驗，檢驗水準(zhǔn)調(diào)整為0.016 7；計量資料采用±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)性分析。P＜0.05提示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。采用繪制受試者工作特征曲線（ROC）評估血漿Notch1、NF-κB診斷AAA的效能，曲線下面積（AUC）比較采用Z檢驗，計算公式為Z＝|AUC1-AUC2|/sqrt（SE12+SE22），SE1、SE2分別為AUC1、AUC2對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果

2.1兩組腎下腹主動脈最大徑比較AAA組腎下腹主動脈最大徑為32～87（59.67±5.92）mm，對照組為18～25（22.16±3.64）mm，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2兩組血漿Notch1、NF-κB水平比較AAA組血漿Notch1、NF-κB濃度顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 AAA組和對照組血漿Notch1、NF-κB水平比較/xˉ± s

2.3不同腎下腹主動脈直徑的AAA病人血漿Notch1、NF-κB水平比較AAA1、AAA2、AAA3三組病人血漿Notch1、NF-κB比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 不同腎下腹主動脈直徑的AAA病人血漿Notch1、NF-κB水平比較/xˉ± s

2.4AAA組血漿Notch1、NF-κB水平的相關(guān)性分析Pearson相關(guān)分析顯示，血漿Notch1、NF-κB與AAA病人腎下腹主動脈直徑無明顯相關(guān)性（r＝0.164，P＝0.671），血漿Notch1與血漿NF-κB水平呈正相關(guān)關(guān)系（r＝0.561，P＝0.039）。

2.5血漿Notch1、NF-κB及其聯(lián)合診斷AAA的價值分別繪制血漿Notch1、NF-κB及其聯(lián)合診斷AAA的ROC曲線，并確定最佳界值，血漿Notch1診斷AAA的最佳截點為119 ng/mL，曲線下面積（AUC）為 0.751（95%CI：0.714～0.850），血漿 NF-κB診斷AAA的最佳截點為98 ng/L，AUC為0.723（95%CI：0.671～0.768），血漿Notch1聯(lián)合NF-κB診斷AAA的AUC為0.786（95%CI：0.729～0.859），兩者聯(lián)合診斷的AUC與血漿Notch1、血漿NF-κB單獨診斷的AUC比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Z＝1.094、1.432，P＝0.296、0.231），血漿NF-κB與Notch1單獨診斷的AUC比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Z＝1.061，P＝0.303），見圖1。血漿Notch1聯(lián)合NF-κB診斷特異性高于單獨血漿Notch1和血漿NF-κB診斷（P＜0.05），血漿Notch1和NF-κB診斷特異性比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），三組敏感性比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表4。

圖1 AAA組血漿Notch1、NF-κB及其聯(lián)合診斷AAA的ROC曲線

表4 AAA組血漿Notch1、NF-κB及其聯(lián)合診斷AAA的價值比較/%

3 討論

AAA指老年人常見病，一旦破裂，可引起大出血，病死率高達(dá)60%～80%［5］。目前，AAA發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，可能與炎癥、氧化應(yīng)激、基質(zhì)金屬蛋白酶等有關(guān)，其中巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤所介導(dǎo)的炎性反應(yīng)是AAA發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，另外，炎癥細(xì)胞大量活化還可促進(jìn)動脈壁血管新生，導(dǎo)致動脈瘤破裂［6］。

Notch信號傳導(dǎo)途徑是在進(jìn)化上高度保守的一類通路，主要包括Notch1-4，在器官、組織、細(xì)胞的發(fā)育分化中起重要參與作用。Notch1最早在人類T細(xì)胞母細(xì)胞白血病中鑒定出來，隨后研究認(rèn)為Notch1信號通路與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)［7-8］。近年來，隨著國內(nèi)外對Notch1受體信號的通路的深入研究，發(fā)現(xiàn)Notch1信號通路可參與調(diào)節(jié)機(jī)體炎性反應(yīng)，機(jī)制可能包括以下方面：調(diào)控DC細(xì)胞因子和化學(xué)因子的分泌調(diào)控Th分化；促使局勢細(xì)胞向MI分化；與巨噬細(xì)胞表面TLR相互協(xié)調(diào)，促使細(xì)胞分化，參與炎癥進(jìn)展［9］。Koenig等［10］指出，Notch1在AAA發(fā)生及進(jìn)展中其重要參與作用；樊曉靜等［11］指出，Notch1信號通路可通過參與免疫調(diào)節(jié)參與胃腸道間質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展。

NF-κB是1986年Sen等首先從B淋巴細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的核轉(zhuǎn)錄因子，廣泛存在于細(xì)胞內(nèi)，具有多項調(diào)節(jié)功能，可參與感染、炎癥、免疫調(diào)節(jié)、應(yīng)激反應(yīng)等［12］。研究報道，NF-κB是促炎癥基因表達(dá)的樞紐之一，可調(diào)控下游靶基因促炎性因子及基質(zhì)金屬蛋白酶-9等表達(dá)，促使細(xì)胞活化、增殖、浸潤等［13］。動物研究指出，AAA形成過程中，NF-κB大量激活［14］。王國強(qiáng)等［15］認(rèn)為NF-κB活化是AAA發(fā)生和發(fā)展的始動機(jī)制。

本研究中，AAA組病人血漿Notch1、NF-κB濃度顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），說明AAA病人會伴隨血漿Notch1、NF-κB升高。聶斌等［16］指出，人主動脈瘤組織中NF-κB呈高表達(dá)。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)，Notch1與NF-κB兩個信號通路可相互調(diào)節(jié)，Notch1型號通路的共激活分子MAML1可能參與調(diào)節(jié)NF-κB型號通路的活化［17］；還有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，Notch1活化可延長NF-κB介導(dǎo)的炎癥基因表達(dá)時間，進(jìn)一步加重機(jī)體炎癥反應(yīng)［18］。本研究發(fā)現(xiàn)，AAA病人血漿Notch1與NF-κB濃度基本同步，且Pearson相關(guān)分析顯示，AAA病人血漿Notch1與NF-κB呈正相關(guān)關(guān)系。本研究還就血漿Notch1、NF-κB診斷AAA效能進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)兩者聯(lián)合診斷AAA的AUC大于血漿Notch1、NF-κB單獨診斷，特異性高于血漿Notch1、NF-κB單獨診斷，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但敏感性差異比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

綜上所述，與非AAA病人相比，AAA病人伴隨血漿Notch1、NF-κB濃度升高，且兩者呈正相關(guān)關(guān)系，但AAA病人不同腎下腹主動脈直徑與血漿Notch1、NF-κB無關(guān)；另外，血漿Notch1、NF-κB診斷AAA具有較高和特異性。