賴流慶 郭蕾 馬莉
【摘要】目的:探究膠體金免疫結(jié)合試驗在疾病預防控制領(lǐng)域檢驗中的臨床應(yīng)用。方法:分別在多種不同的病毒檢測中應(yīng)用膠體金免疫結(jié)合試驗,最后分析檢測結(jié)果。結(jié)果:膠體金免疫結(jié)合試驗在各類疾病的防控中均有準確檢測結(jié)果。結(jié)論::膠體金免疫結(jié)合試驗在疾病預防控制領(lǐng)域檢驗中的臨床應(yīng)用效果顯著,值得推廣應(yīng)用。
【關(guān)鍵詞】膠體金免疫結(jié)合試驗;疾病預防控制領(lǐng)域;檢驗;臨床應(yīng)用
【中圖分類號】R821.4+2 ? ? ?【文獻標識碼】A ? ? 【文章編號】2095-6851(2019)08-070-01
膠體金免疫結(jié)合試驗直接利用商品試劑便達到了檢測的目的,不需要應(yīng)用其他儀器,在數(shù)分鐘內(nèi)經(jīng)肉眼觀察到結(jié)果[1],為臨床提供可靠參考依據(jù),有著較高的應(yīng)用價值。本文從膠體金免疫技術(shù)概述、膠體金免疫結(jié)合試驗檢測原理和膠體金免疫結(jié)合試驗在疾病預防、控制、檢驗等方面的具體應(yīng)用展開分析,現(xiàn)報道如下。
1 膠體金免疫技術(shù)概述
在還原劑枸櫞酸鈉作用下和靜電作用下,膠體金是氯金酸(HAuCl4)分別可以聚合成一定形狀大小的金顆粒和一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),這是被稱為膠體金。根據(jù)資料文獻報道,在弱堿條件下膠體金會帶有負電荷,這時與帶正電荷的蛋白質(zhì)相互結(jié)合,發(fā)生了靜電結(jié)合反應(yīng),不會影響蛋白質(zhì)的生物特性。膠體金除了與蛋白質(zhì)結(jié)合,同樣能與諸多生物大分子如SPA等相結(jié)合。根據(jù)膠體金的物理性質(zhì)并和生物學特性,能夠廣泛用于組織學、病理學和細胞生物學等行業(yè)領(lǐng)域中。此外我們對結(jié)合試驗檢測原理進行分析。經(jīng)過載體微孔濾膜包可明確膠體金免疫結(jié)合試驗中是抗體或是抗原,在毛細管作用下待檢驗的標本,其濾膜上的抗體或抗原和標本中的抗原或抗體相結(jié)合,最終需要使用膠體金結(jié)合物輔助檢測。因此快速免疫金滲濾法和免疫層析法是現(xiàn)代臨床醫(yī)學檢驗的重要手段,前者應(yīng)用范圍最為廣泛,表現(xiàn)出了快速、簡便、準確和無污染等優(yōu)勢。
2 膠體金免疫結(jié)合試驗在疾病預防控制領(lǐng)域檢驗中的臨床應(yīng)用
2.1 細菌性疾病的檢驗中膠體金免疫結(jié)合試驗的應(yīng)用
首先檢測鼠疫耶爾森菌。快速免疫金滲濾法能夠快速準確檢測出結(jié)果,根據(jù)耶爾森菌不與小腸結(jié)腸耶菌發(fā)生交叉反應(yīng)這一特性,檢測靈敏度、特異性高,結(jié)果顯示2.4×105cfu/ml為檢出最低限。1.0×105cfu/ml為檢測試驗的靈敏度,使用F1抗體金探針得到F1的10ug/L為檢出最低限,開始檢驗面粉、奶粉、土壤、酵母粉等相關(guān)材料,結(jié)果一致。其次檢測金黃色葡萄球菌。金黃色葡萄球菌檢測結(jié)果顯示3.3×106cfu/ml~6.1×106cfu/ml為最低檢出限范圍。總計檢出12株大腸埃希菌、18株不產(chǎn)毒素金黃色葡萄球菌,并有1株發(fā)生交叉反應(yīng)。最后是檢測沙門菌。使用抗原吸附法檢測沙門菌,根據(jù)在封閉環(huán)境下抗沙門菌會和其他腸道桿菌發(fā)生交叉反應(yīng)[2],結(jié)果顯示免疫層析12.1×106cfu/ml為最終靈敏度。試驗中菌懸液為108~1011cfu/ml實施檢測未現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。
2.2 膠體金免疫結(jié)合試驗對病毒性疾病的檢驗應(yīng)用
首先檢測艾滋病抗體。通過膠體金免疫結(jié)合試驗來檢測申報注冊艾滋病抗體快速檢測試劑,并做出臨床評估,結(jié)果提示靈敏度高達100.00%的樣本試劑均為強陽性,共檢測15家申報注冊艾滋病抗體,在健康獻血員樣品中的檢測特異性96.8%~100.0%,試劑檢測靈敏度在73.7%~94.8%范圍之間。其次檢測柯薩奇病毒。因為柯薩奇病毒和多種疾病的發(fā)生有關(guān)。例如手足口病,因此研制出層析診斷試紙條用于檢驗中。結(jié)果顯示靈敏度為96.4%,特異性為66.8%,與執(zhí)行標準RT-PCR檢測結(jié)果差距不大。最后檢測流行性出血熱抗體。使用膠體金免疫結(jié)合試驗對檢測的所有患者樣品血清均呈陽性,靈敏度為97.9%。對家貓血清、黑線姬鼠、兔免疫血清進行檢測,結(jié)果呈陰性。
2.3 膠體金免疫結(jié)合試驗對寄生蟲病的檢驗應(yīng)用
檢測血吸蟲抗體,使用快速免疫金滲濾法結(jié)果靈敏度為96.8%,對急性血吸蟲患者檢測血清標本靈敏度為99.9%,對慢性患者檢測血清標本靈敏度為97.9%,對晚期患者檢測血清標本靈敏度為92.8%。
2.4 膠體金免疫結(jié)合試驗對其他微生物疾病的檢驗應(yīng)用
檢測梅毒。膠體金免疫結(jié)合試驗可檢驗梅毒,國外檢測梅毒經(jīng)常使用的試劑為梅毒螺旋體和TPPA 試劑,相比之下我國的膠體金試劑盒檢測靈敏度均遠超出[3]。在孕婦血清、紅斑狼瘡患者和正常體檢者中應(yīng)用膠體金免疫結(jié)合試驗檢測,均取得理想效果。
3 結(jié)語
綜上所述,當前臨床采用的膠體金免疫結(jié)合試驗是在酶免疫結(jié)合試驗基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型固相標記免疫測定技術(shù),具有單份測定、簡單方便、快速操作等優(yōu)勢,已經(jīng)廣泛用于臨床檢驗中,受到了廣大醫(yī)學工作者的認可和肯定。
參考文獻:
[1] 張峰, 李建新, 戰(zhàn)祥彩, et al. 膠體金免疫結(jié)合試驗在疾病預防控制領(lǐng)域檢驗中的應(yīng)用分析[J]. 中外醫(yī)療, 2012, 31(34):11-11.
[2] 趙春. 疾病預防控制領(lǐng)域檢驗中膠體金免疫結(jié)合試驗的應(yīng)用探析[J]. 中國實用醫(yī)藥, 2015(19).
[3] 章小雨, 戴曉愛. 免疫膠體金技術(shù)在醫(yī)學檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用與進展[J]. 實驗與檢驗醫(yī)學, 2014(3):279-281.