影響獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果因素及對(duì)策

黃真

摘 要 為預(yù)防動(dòng)物疫病需要進(jìn)行建設(shè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，抗體檢測(cè)屬于獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室重要工作內(nèi)容。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果受多種因素影響，包括動(dòng)物自身因素、疫苗因素、實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)因素等均會(huì)導(dǎo)致抗體檢測(cè)結(jié)果失真。本文旨在分析獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室中影響抗體檢測(cè)結(jié)果的因素，提出相關(guān)的應(yīng)對(duì)策略。

關(guān)鍵詞 獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室；影響因素；抗原檢測(cè)結(jié)果

1 免疫因素

1.1 實(shí)驗(yàn)室物種因素

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室選擇實(shí)驗(yàn)物種之初，需要根據(jù)物種綜合情況決定是否將其選入實(shí)驗(yàn)對(duì)象，物種患有遺傳性疾病，物種存在長(zhǎng)時(shí)間營(yíng)養(yǎng)不良狀況，以及物種所接種的免疫抑制劑對(duì)其影響較大。當(dāng)有上述情況時(shí)，會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果失真，影響檢測(cè)結(jié)果。

1.2 實(shí)驗(yàn)室疫苗因素

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室用于抗體檢測(cè)所選用的疫苗質(zhì)量以及使用期限均對(duì)免疫應(yīng)答現(xiàn)象具有較大影響。為保障抗體檢測(cè)結(jié)果精密度，需要確?？贵w檢測(cè)實(shí)驗(yàn)所用疫苗質(zhì)量良好，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人需要從正規(guī)渠道購(gòu)入實(shí)驗(yàn)所用疫苗，確保選購(gòu)的疫苗經(jīng)過(guò)國(guó)家檢驗(yàn)審核[1]。

2 樣品因素

2.1 樣品采集時(shí)間

完成疫苗注射后一段時(shí)間，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行樣品收集，測(cè)量其抗原確定疫苗作用的最高閾值和最低閾值，計(jì)算平均閾值。需要注意樣品采集時(shí)間，務(wù)必在疫苗作用最高閾值點(diǎn)進(jìn)行樣品采集，對(duì)比不同類型疫苗接種后的最高閾值檢測(cè)結(jié)果。

2.2 樣品采集方法

向?qū)嶒?yàn)動(dòng)物注射注射疫苗后，需要采集接種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的血清樣本作為檢測(cè)樣品。死亡的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清成分會(huì)發(fā)生變化，故而必須要采集有生命特征的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清樣本進(jìn)行檢測(cè)。抽取動(dòng)物血液樣本后，需要使用離心機(jī)將其進(jìn)行離心處理獲得血清樣本。

2.3 樣品處理與保存

樣品保存溫度對(duì)其質(zhì)量影響較大，不作處理的實(shí)驗(yàn)物種血清樣品中存在的天然凝血因子會(huì)使得血清發(fā)生凝固，因此采集到血清樣本后需要添加特殊化學(xué)試劑，同時(shí)經(jīng)離心處理以保障其不會(huì)發(fā)生變質(zhì)現(xiàn)象[2]。

2.4 樣品分裝

樣品分裝過(guò)程中的交叉污染以及實(shí)驗(yàn)器械管理不當(dāng)均對(duì)樣品檢測(cè)質(zhì)量造成嚴(yán)重影響，無(wú)法保障檢測(cè)精密度。

3 實(shí)驗(yàn)室因素

3.1 實(shí)驗(yàn)器械質(zhì)量

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室研究工作必須依賴實(shí)驗(yàn)器械，實(shí)驗(yàn)器械質(zhì)量對(duì)于實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果影響較大，因此需要嚴(yán)格把控實(shí)驗(yàn)室器械質(zhì)量。

3.2 實(shí)驗(yàn)試劑檢測(cè)

抗體檢測(cè)所用的實(shí)驗(yàn)試劑對(duì)與實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果影響較大，雖然在購(gòu)買實(shí)驗(yàn)試劑時(shí)選用的廠家均是正規(guī)廠家，也是根據(jù)國(guó)家有關(guān)驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行驗(yàn)收的，但是不同廠家所生產(chǎn)的實(shí)驗(yàn)試劑所含有的成分元素在一定程度上存在一些差異，這些差異對(duì)于抗體實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果均存在一定影響。

3.3 實(shí)驗(yàn)室溫度

實(shí)驗(yàn)室溫度是抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中的重要影響因素，當(dāng)抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)間溫度波動(dòng)變化將會(huì)導(dǎo)致抗體檢測(cè)結(jié)果失真。當(dāng)實(shí)驗(yàn)室溫度過(guò)高時(shí)，會(huì)導(dǎo)致抗原抗體反應(yīng)速率偏高，而實(shí)驗(yàn)室溫度過(guò)低又會(huì)導(dǎo)致抗原抗體反應(yīng)速率偏低，因此實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度需要穩(wěn)定在固定范圍內(nèi)。實(shí)驗(yàn)室設(shè)定溫度值通常為25攝氏度，偏離2攝氏度以內(nèi)情況允許存在。

3.4 時(shí)間因素

實(shí)驗(yàn)時(shí)間也會(huì)影響到抗體檢測(cè)結(jié)果精確度，實(shí)驗(yàn)時(shí)間無(wú)法精確到秒引起實(shí)驗(yàn)誤差，實(shí)驗(yàn)順序不同將會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)生偏差。

4 針對(duì)影響獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果的有關(guān)對(duì)策

4.1 免疫因素干預(yù)對(duì)策

針對(duì)物種因素引發(fā)的不良影響，一次實(shí)驗(yàn)選擇同一物種，選擇物種后不宜立即開展實(shí)驗(yàn)研究，需要先經(jīng)過(guò)一段時(shí)間人工飼養(yǎng)，觀察物種行為舉止，無(wú)遺傳性疾病，營(yíng)養(yǎng)狀況良好后在開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，徹底排除因物種因素引發(fā)的實(shí)驗(yàn)途中非正常因素死亡，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)中途死亡是正常死亡，不會(huì)誤導(dǎo)研究方向。

鑒于目前市面上假冒偽類疫苗數(shù)量較多，以次充好的疫苗不再少數(shù)，因而需要從疫苗進(jìn)貨源頭端把控疫苗質(zhì)量，購(gòu)買實(shí)驗(yàn)疫苗需要到貨后需要開箱檢驗(yàn)，先小批量使用，待質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定后再加大投入使用量。此外，抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)需要遵循單一變量原則，進(jìn)行抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)只能在一段時(shí)間內(nèi)注入同一種疫苗，避免注入疫苗數(shù)量過(guò)多影響抗原檢測(cè)結(jié)果，無(wú)法得出正確判斷。

4.2 樣品因素干預(yù)對(duì)策

根據(jù)實(shí)驗(yàn)疫苗活性越高則實(shí)驗(yàn)物種體內(nèi)抗原產(chǎn)生速度越快的特點(diǎn)，需要注射活性較高的疫苗進(jìn)行樣品采集。疫苗一旦被滅活后，實(shí)驗(yàn)物種產(chǎn)生抗體的速度將會(huì)減弱，屆時(shí)樣品采集時(shí)間也勢(shì)必會(huì)延長(zhǎng)，極易發(fā)生測(cè)不準(zhǔn)的情況，為保障采集時(shí)間無(wú)誤，需要選用生物活性較高的疫苗。

檢驗(yàn)樣品采集中需要注意不能采集無(wú)生命特征的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清樣本作為檢測(cè)樣品，為保障血清樣本不受污染，順利得到血清檢測(cè)結(jié)果，工作人員在整個(gè)血清樣本獲取和檢測(cè)過(guò)程中嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作。

樣品處理對(duì)于后續(xù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采集影響較大，因此需要經(jīng)過(guò)特殊抗凝處理，不能直接添加抗凝劑，需要將抗凝劑稀釋后備用。血清樣品必須放置于高溫消毒過(guò)的離心試管中，必須要放置在2-4攝氏度環(huán)境下進(jìn)行低溫保存，部分血清樣本需要冷凍保存。低溫下樣品保存時(shí)間有一定期限，需要及時(shí)檢測(cè)。

為保障樣品分裝質(zhì)量，需要嚴(yán)格做好樣品分裝制度管理，在進(jìn)行分裝過(guò)程中，每一份實(shí)驗(yàn)所用血清樣本必須要配備單獨(dú)的試劑滴管，不同血清實(shí)驗(yàn)樣本嚴(yán)禁混用試劑滴管。結(jié)束一輪實(shí)驗(yàn)操作后，需要及時(shí)將使用過(guò)的實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行消毒處理，不能留作下一輪實(shí)驗(yàn)使用。

4.3 實(shí)驗(yàn)室因素干預(yù)策略

進(jìn)行抗體檢測(cè)前，需要檢查實(shí)驗(yàn)器械靈敏度，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)器械失靈后需要及時(shí)維修。實(shí)驗(yàn)室所用抗體檢測(cè)器械質(zhì)量對(duì)于抗體檢測(cè)結(jié)果影響較大，因此需要定期進(jìn)行檢修保養(yǎng)，使其正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

在投入新的實(shí)驗(yàn)試劑前，務(wù)必要先小批量檢測(cè)使用，待檢測(cè)結(jié)果無(wú)偏差后，再進(jìn)行大量使用，以滿足實(shí)驗(yàn)需求。

實(shí)驗(yàn)室需要設(shè)立溫度管理機(jī)制，安排工作人員間隔二小時(shí)檢測(cè)并記錄環(huán)境溫度，發(fā)現(xiàn)異常時(shí)需要及時(shí)使用空調(diào)設(shè)備調(diào)整環(huán)境溫度。維護(hù)實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度穩(wěn)定，可保障抗體檢測(cè)結(jié)果的實(shí)驗(yàn)嚴(yán)謹(jǐn)性，避免實(shí)驗(yàn)結(jié)果失真。

為降低實(shí)驗(yàn)時(shí)間對(duì)實(shí)驗(yàn)造成的干擾，可采取多組實(shí)驗(yàn)法，用以縮小實(shí)驗(yàn)誤差。

5 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果偏離正常范圍的影響因素非常多，可通過(guò)人為干預(yù)將影響因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果影響降低最低。為保障獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室抗體檢測(cè)結(jié)果正常，需要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理建設(shè)，制定完善的人員管理措施，確保獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)：

[1]唐春花.血凝試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量的影響因素及質(zhì)量改善對(duì)策分析[J].臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志，2018，5（40）：185+189.

[2]高曉波，黃東風(fēng)，姚學(xué)軍，邱海蓮，劉潔，王彬彬.溶血樣本對(duì)禽流感血凝抑制試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的影響[J].當(dāng)代畜牧，2017（27）：47-48.