血清新型細(xì)胞角蛋白聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在非小細(xì)胞肺癌診斷中的應(yīng)用

張宇

【摘要】 目的：探討血清新型細(xì)胞角蛋白標(biāo)志物Monototal聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物在非小細(xì)胞肺癌診斷的臨床價(jià)值。方法：檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌患者126例（肺鱗癌67例、肺腺癌59例，非小細(xì)胞肺癌組）、肺部良性疾病患者68例（肺部良性疾病組）和健康人群45例（健康對(duì)照組）血清中細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖類抗原153（CA153）、神經(jīng)元特異烯醇化酶（NSE）及新型細(xì)胞角蛋白標(biāo)志物Monototal水平，并統(tǒng)計(jì)分析其敏感性和特異性。結(jié)果：非小細(xì)胞肺癌組血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal水平均顯著高于肺部良性疾病組及健康對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;非小細(xì)胞肺癌組血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal陽性率顯著高于肺部良性疾病組及健康對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），敏感性分別為66.7%、32.5%、40.4%及77.8%;各項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物單檢對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷的靈敏度分別為66.7%、32.5%、40.4%和77.8%，4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的敏感性為89.7%，顯著高于單項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：Monototal聯(lián)合CYFRA21-1、CA153、NSE檢測(cè)能提高非小細(xì)胞肺癌診斷的靈敏性。

【關(guān)鍵詞】 新型細(xì)胞角蛋白; 非小細(xì)胞肺癌; 聯(lián)合診斷; 靈敏性; 特異性

【Abstract】 Objective：To observe the clinical value of combined detection of novel cytokeratin biomarker Monototal and tumor markers in diagnosis of non-small cell lung cancer.Method：Levels of serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal in 126 non-small cell lung cancer patients（67 squamous carcinoma cases，59 adenocarcinoma cases，non-small cell lung cancer group），68 benign pulmonary diseases patients（benign pulonary diseases group）and 45 healthy volunteers（healthy control group）were measured and their sensitivity and specificity were analyzed.Result：The levels of serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal in non-small cell lung cancer group were greatly increased compared with the benign pulmonary diseases group and healthy control group（P<0.05）.The non-small cell lung cancer group had significantly higher positive rate in serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal than the benign pulmonary diseases group and health control group（P<0.05），with sensitivity respectively as 66.7%，32.5%，40.4% and 77.8%.Single indicator detection had sensitivity of nonsmall cell lung cancer respectively as 66.7%，32.5%，40.4% and 77.8%，which was 89.7% in combined detection of 4 indicators.The combined detection had higher sensitivity than single indicator detection，the difference had statistical significance（P<0.05）.Conclusion：Combined detection of serum CYFRA21-1，CA153，NSE and Monototal can improve the sensitivity of non-small cell lung cancer diagnosis.

【Key words】 Novel cytokeratin biomarker monototal; Non-small cell lung cancer; Combined detection; Sensitivity; Specificity

First-authors address：Jingzhou Chest Hospital，Jingzhou 434020，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.04.016

肺癌是我國(guó)發(fā)病率和死亡率最高的一種惡性腫瘤，其中非小細(xì)胞肺癌高達(dá)80%，術(shù)后5年內(nèi)生存率較低，主要因?yàn)榇祟惸[瘤術(shù)后容易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[1-2]。當(dāng)下對(duì)于非小細(xì)胞肺癌的診斷技術(shù)主要依賴于細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)檢查，并且組織的獲取會(huì)引起患者較大的創(chuàng)傷，還會(huì)導(dǎo)致其他并發(fā)癥的發(fā)生[3]。血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)可以很好地避免細(xì)胞組織學(xué)檢測(cè)方法帶來的弊端，具有創(chuàng)傷小、檢測(cè)標(biāo)本來源方便、方法重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)[4]，并且研究發(fā)現(xiàn)血清腫瘤標(biāo)志物在癌癥診斷、分類及預(yù)后等方面都有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值[5]。細(xì)胞角蛋白（cytokeratin，CK）屬于上皮細(xì)胞中特異表達(dá)的一種中間微絲蛋白[6]。近年來，一種新型細(xì)胞角蛋白Monototal試劑盒能夠同時(shí)用于CK8、18和19單克隆片段，并且研究發(fā)現(xiàn)Monototal對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷具有較好敏感性[7-8]，但其聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷研究尚缺乏。因此，本文研究了Monototal聯(lián)合血清中細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖類抗原153（CA153）、神經(jīng)元特異烯醇化酶（NSE）檢測(cè)在非小細(xì)胞肺癌診斷中的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 非小細(xì)胞肺癌組：收集2016年3月-2017年10月本院腫瘤科確診的非小細(xì)胞肺癌患者126例，其中男81例，女45例，年齡33～78歲，平均（54.7±14.2）歲，均通過細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)確診;其中肺鱗癌患者67例，肺腺癌患者59例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）非小細(xì)胞肺癌組及肺部良性疾病組患者入院確診為該類疾病便被納入研究，在此之前一個(gè)月內(nèi)未服用任何藥物，以排除藥物對(duì)血清中各項(xiàng)研究指標(biāo)的影響;（2）所有研究對(duì)象均接受支氣管鏡及臨床病理明確的診斷;（3）不存在其他并發(fā)癥、內(nèi)分泌性疾病及其他惡性腫瘤;（4）簽署知情同意書的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）并發(fā)有嚴(yán)重器官衰竭性疾病及內(nèi)分泌性疾病;（2）未能確診的患者;（3）正在接受放化療及拒絕參加的患者;（4）患者病情加重急需馬上治療的患者。肺部良性疾病組：納入同期在本院就診的肺部良性疾病患者68例，男45例，女23例;年齡31～80歲，平均（52.5±12.9）歲，均通過細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)檢測(cè)確診。健康對(duì)照組納入同期本院體檢中心的健康人群45例，男31例，女14例;年齡29～77歲，平均（51.4±11.8）歲，無胃腸道、肝臟和生殖系統(tǒng)病變。三組年齡、性別比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義（P>0.05），具有可比性。并且此研究獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 收集所有研究對(duì)象清晨空腹靜脈血4 mL，于5 000 r/min離心8 min，分離血清儲(chǔ)存于-80 ℃超低溫冰箱中待測(cè)。采用羅氏Cobas E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)血清中細(xì)胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、糖類抗原153（CA153）及神經(jīng)元特異烯醇化酶（NSE）含量。采用Monototal試劑盒（德國(guó)，ILD biotech）檢測(cè)血清角蛋白8、18、19濃度。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察非小細(xì)胞肺癌患者、肺部良性疾病患者、健康體檢者中CYFRA21-1（0～3.3 ng/mL）、CA153（0～35 U/mL）、NSE（0～25 ng/mL）及Monototal（0～75 U/L）水平差異及陽性率，觀察比較4種腫瘤標(biāo)志物及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷的靈敏度和特異度。4種指標(biāo)聯(lián)合診斷時(shí)只要其中1種指標(biāo)含量為陽性即確定為陽性患者。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組納入對(duì)象腫瘤標(biāo)志物含量比較 非小細(xì)胞肺癌組患者血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal水平均顯著高于肺部良性疾病組及健康對(duì)照組，三組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 三組納入對(duì)象血清腫瘤標(biāo)志物在各組中陽性率比較 非小細(xì)胞肺癌組患者血清CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal陽性率明顯高于肺部良性疾病組和健康對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 腫瘤標(biāo)志物單檢和聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷價(jià)值 CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal單檢對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷的靈敏度分別為66.7%、32.5%、40.4%和77.8%，4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的敏感性為89.7%，顯著高于單項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。4項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal在肺部良性疾病組及健康對(duì)照組中均正常的有98例，特異性為86.7%，低于CYFRA21-1、CA153、NSE及Monototal單一指標(biāo)診斷的特異度（96.5%、98.2%、97.3%和92.3%）。見表3。

3 討論

細(xì)胞角蛋白在正常細(xì)胞演變?yōu)閻盒阅[瘤細(xì)胞后階段過程中是穩(wěn)定表達(dá)的，并且通常持續(xù)表達(dá)[9-10]。在癌癥演變過程中，角蛋白碎片和其他蛋白水解產(chǎn)物會(huì)進(jìn)入血液循環(huán)中，對(duì)這些標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)分析可以促使非小細(xì)胞肺癌的早期診斷。目前，已報(bào)道的細(xì)胞角蛋白有二十余種，其中CK19可作為上皮惡性腫瘤細(xì)胞活性的標(biāo)志物，并應(yīng)用于腫瘤的診斷、預(yù)后及療效評(píng)估[11-13]。細(xì)胞角蛋白只有被降解為可溶性小片段后才能釋放入血，血清學(xué)檢查只針對(duì)某些特異抗體，其中CYFRA21-1就是CK19的一種水解片段[14]。Monototal試劑盒為角蛋白新型檢測(cè)方法，可以同時(shí)檢測(cè)識(shí)別CK8、18和19單克隆片段。本文結(jié)果提示，非小細(xì)胞肺癌組血清Monototal水平均顯著高于肺部良性疾病組及健康對(duì)照組，并且血清Monototal陽性率顯著高于肺部良性疾病組及健康對(duì)照組，說明新型細(xì)胞角蛋白Monototal標(biāo)志物可以很好地區(qū)分非小細(xì)胞肺癌和非肺癌患者。血清Monototal診斷非小細(xì)胞肺癌的敏感性和特異性分別為77.8%和92.3%。前期也有相關(guān)研究探討了Monototal在非小細(xì)胞肺癌臨床監(jiān)測(cè)中的價(jià)值，表明非小細(xì)胞肺癌患者血清Monototal水平與腫瘤負(fù)荷存在相關(guān)性[15-17]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)Monototal對(duì)肺鱗癌診斷的敏感性為94.0%，顯著高于肺腺癌，說明Monototal可以很好地區(qū)分肺腺癌和肺鱗癌。在理論上Monototal包括細(xì)胞角蛋白8、18、19三個(gè)單克隆抗體，三種細(xì)胞角蛋白片段均屬于細(xì)胞角蛋白家族，但三種單克隆抗體之間是否存在相互作用或干擾尚需進(jìn)一步研究。

同時(shí)，本文也檢測(cè)分析了血清CYFRA21-1、CA153及NSE腫瘤標(biāo)志物對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷的臨床價(jià)值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)非小細(xì)胞肺癌組血清CYFRA21-1、CA153及NSE水平均顯著高于肺部良性疾病組及健康對(duì)照組，非小細(xì)胞肺癌組血清CYFRA21-1、CA153及NSE陽性率顯著高于肺部良性疾病組及健康對(duì)照組，敏感性分別為66.7%、32.5%及40.4%，各項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物單檢對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷的靈敏度分別為66.7%、32.5%和40.4%，然而4項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的敏感性為89.7%，顯著高于單項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)。因此，在以后臨床診斷非小細(xì)胞肺癌過程中應(yīng)將新型細(xì)胞角蛋白Monototal聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，可以更好地提高檢測(cè)靈敏度。早期研究也發(fā)現(xiàn)CYFRA21-1聯(lián)合NSE檢測(cè)對(duì)非小細(xì)胞肺癌診斷的靈敏度和特異度均較高，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)CYFRA21-1對(duì)鱗癌診斷價(jià)值更高，NSE對(duì)腺癌診斷價(jià)值更高[18]。潘傳四等[19]研究發(fā)現(xiàn)CYFRA21-1、CA125及NSE可以發(fā)揮互補(bǔ)作用，顯著提高非小細(xì)胞肺癌的陽性檢出率，并且非小細(xì)胞肺癌陽性檢出率與癌癥發(fā)展進(jìn)程相關(guān)。呂翠紅等[20]采用中藥聯(lián)合干擾素對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行治療發(fā)現(xiàn)，治療后患者血清中VEGF、CA153及CYFRA21-1水平均顯著降低，提示CA153及CYFRA21-1可以作為預(yù)后判斷的指標(biāo)。

綜上所述，Monototal對(duì)非小細(xì)胞肺癌的診斷具有較好的敏感性，可以用于非小細(xì)胞肺癌的輔助診斷，而Monototal聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物可以更好地提高檢測(cè)的敏感性。

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（收稿日期：2018-07-17） （本文編輯：周亞杰）