穴位照射對(duì)非小細(xì)胞肺癌化療患者免疫功能的影響

蔣梅，柯曉斌，成東茹，楊麗廷

1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣東 廣州 510405；2.汕頭市中醫(yī)院，廣東 汕頭 515031；3.廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510405

機(jī)體的免疫功能與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)系，免疫功能低下是導(dǎo)致原發(fā)性支氣管肺癌發(fā)生的重要原因之一?；煂?duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的影響是多元的，傳統(tǒng)的認(rèn)識(shí)是細(xì)胞毒類化療藥物以殺滅腫瘤細(xì)胞達(dá)到治療腫瘤的目的，由于其選擇性差和毒性強(qiáng)等原因，對(duì)免疫系統(tǒng)也具有一定程度的損傷或抑制作用。近年來(lái)，隨著對(duì)腫瘤免疫認(rèn)識(shí)的深入，發(fā)現(xiàn)一定劑量的化療也可能產(chǎn)生免疫增強(qiáng)作用[1]。免疫治療與化療聯(lián)合應(yīng)用在腫瘤治療中有協(xié)同效應(yīng)。我院引進(jìn)的IZL-2003免疫治療系統(tǒng)為極高頻輻射，屬?gòu)?fù)合毫米波，通過(guò)刺激相關(guān)穴位產(chǎn)生作用，可以干預(yù)和抑制惡性腫瘤患者化療后Th細(xì)胞的異常，提高巨噬細(xì)胞的表達(dá)水平、增強(qiáng)其吞噬活性，提高機(jī)體免疫功能。本研究中，我們觀察了非小細(xì)胞肺癌患者含鉑雙藥化療配合IZL-2003免疫治療系統(tǒng)極高頻電磁波照射治療后，其外周血NK、T細(xì)胞水平的變化，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

本實(shí)驗(yàn)40例入組病例均來(lái)自我院腫瘤科2013年3月～2014年3月經(jīng)病理組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診的非小細(xì)胞肺癌患者經(jīng)化療者，用含鉑雙藥方案化療。按患者意愿分組，其中實(shí)驗(yàn)組20例，男性9例，女性11例，平均年齡為62.66±9.36歲，最大77歲，最小40歲；對(duì)照組20例，男性14例，女性6例，平均年齡為60.35±10.36歲，最大74歲，最小40歲。實(shí)驗(yàn)組腺癌12例，鱗癌8例，ⅢB期為4例，Ⅳ期為16例，行GP方案5例，DP方案6例，AP方案9例；對(duì)照組腺癌11例，鱗癌9例，ⅢB期為5例，Ⅳ期為15例，行GP方案6例，DP方案4例，AP方案10例，見(jiàn)表1。

1.2 方法

實(shí)驗(yàn)組病例進(jìn)行含鉑雙藥方案化療，治療2個(gè)療程，化療第1天開始配合IZL-2003免疫治療系統(tǒng)進(jìn)行1個(gè)療程6天的治療，每次30分鐘，每日1次，穴位選擇為：血海、屋翳、足三里、關(guān)元。對(duì)照組病例進(jìn)行含鉑雙藥方案化療，治療2個(gè)療程?；熐?、化療開始后第7天采用我院檢驗(yàn)科流式細(xì)胞術(shù)予查T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞了解免疫功能情況。

表1 兩組的一般臨床特點(diǎn)Table 1 General clinical characteristics of the two groups

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料（如性別、臨床分期）用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料數(shù)據(jù)（T淋巴亞群計(jì)數(shù)等）符合正態(tài)分布則采用t檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布者則釆用秩和檢驗(yàn)。P＜0.05則認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

化療前d0、d21，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組免疫功能，化療前兩組免疫功能情況無(wú)顯著性差異（P＞0.05），具有均衡可比性。

實(shí)驗(yàn)組第1療程N(yùn)K細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞亞群，化療前后無(wú)明顯變化（P＞0.05），見(jiàn)表2。

表2 實(shí)驗(yàn)組第1療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 2 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the first course of the experimental group(±s)

表2 實(shí)驗(yàn)組第1療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 2 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the first course of the experimental group(±s)

NK細(xì)胞總T細(xì)胞Th細(xì)胞Ts細(xì)胞Th/Ts d0 15.3±13.15 71.13±9.72 39.23±9.31 29.71±9.87 1.55±0.84 d7 17.86±11.54 74.10±10.50 41.20±11.22 30.87±9.82 1.57±0.88

實(shí)驗(yàn)組第2療程化療后（d28）總T細(xì)胞、Th細(xì)胞較化療前（d21）有所升高（P＜0.05）；NK細(xì)胞、Ts細(xì)胞、Th/Ts細(xì)胞化療前后無(wú)明顯變化（P＞0.05），見(jiàn)表3。

表3 實(shí)驗(yàn)組第2療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 3 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the second course of the experimental group(±s)

表3 實(shí)驗(yàn)組第2療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 3 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the second course of the experimental group(±s)

注：提示組內(nèi)化療前后行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，*P＜0.05。

NK細(xì)胞總T細(xì)胞Th細(xì)胞Ts細(xì)胞Th/Ts d28 16.46±13.37 74.79±9.55*43.82±11.08*29.12±9.81 1.74±0.85 d21 15.68±12.23 71.04±11.42 40.38±10.41 29.13±10.52 1.63±0.80

對(duì)照組第1療程化療期間，NK細(xì)胞化療后（d7）較化療前（d0）下降（P＜0.05）；T淋巴細(xì)胞亞群化療前后變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表4。

對(duì)照組第2療程化療期間，NK細(xì)胞化療后（d28）較化療前（d21）下降（P＜0.05）；T淋巴細(xì)胞亞群化療前后變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表5。

第1療程兩組NK細(xì)胞化療前后變化情況，化療后NK細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組升高較明顯（P＜0.05）；T淋巴細(xì)胞亞群化療前后兩組間變化情況變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表6。

表4 對(duì)照組第1療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 4 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the first course of the control group(±s)

表4 對(duì)照組第1療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 4 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the first course of the control group(±s)

注：提示組內(nèi)化療前后行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，*P＜0.05。

NK細(xì)胞總T細(xì)胞Th細(xì)胞Ts細(xì)胞Th/Ts d7 15.42±7.71*71.03±9.18 40.04±8.79 30.05±9.61 1.55±0.89 d0 18.27±10.13 70.82±12.82 40.50±10.79 29.84±10.92 1.60±0.93

表5 對(duì)照組第2療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 5 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the second course of the control group(±s)

表5 對(duì)照組第2療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 5 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the second course of the control group(±s)

注：提示組內(nèi)化療前后行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，*P＜0.05。

NK細(xì)胞總T細(xì)胞Th細(xì)胞Ts細(xì)胞Th/Ts d28 16.02±6.66*71.24±10.00 39.92±11.23 29.71±8.51 1.51±0.79 d21 19.58±8.07 69.78±11.13 37.76±10.38 29.85±9.29 1.42±0.75

表6 兩組第1療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 6 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the first two groups(±s)

表6 兩組第1療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 6 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the first two groups(±s)

注：提示組內(nèi)化療前后行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，*P＜0.05。

項(xiàng)目（d7-0）NK細(xì)胞總T細(xì)胞Th細(xì)胞Ts細(xì)胞Th/Ts P值0.034*0.355 0.287 0.586 0.672實(shí)驗(yàn)組2.57±10.03 2.97±8.98 1.96±7.76 1.12±5.04 0.02±0.52對(duì)照組-2.84±4.06 0.21±9.70-0.46±6.37 0.22±5.43-0.04±0.35

第2療程兩組NK細(xì)胞化療前后變化情況，化療后NK細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組升高較明顯（P＜0.05）；T淋巴細(xì)胞亞群化療前后兩組間變化情況無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表7。

表7 兩組第2療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 7 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the second two groups(±s)

表7 兩組第2療程化療前后免疫功能變化情況比較(±s)Table 7 Comparison of immune function changes before and after chemotherapy in the second two groups(±s)

注：提示組內(nèi)化療前后行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)，*P＜0.05。

項(xiàng)目（d28-21）NK細(xì)胞總T細(xì)胞Th細(xì)胞Ts細(xì)胞Th/Ts P值0.007*0.187 0.442 0.993 0.852實(shí)驗(yàn)組0.79±5.52 3.76±6.07 3.44±5.89-0.01±4.74-0.11±0.41對(duì)照組-3.56±3.99 1.45±4.67 2.17±4.39-0.14±4.62 0.09±0.48

3 討論

目前，支氣管肺癌已成為我國(guó)發(fā)病率和死亡率最高、預(yù)后最差的惡性腫瘤之一，免疫功能低下或抑制狀態(tài)下是導(dǎo)致肺癌的重要原因之一?；煷嬖谝欢ǖ亩靖狈磻?yīng)，使患者的免疫功能受到不同程度的影響，而如果免疫功能持續(xù)下降，可促進(jìn)腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。非小細(xì)胞肺癌約占肺癌總數(shù)的80%，化學(xué)藥物治療廣泛應(yīng)用于非小細(xì)胞肺癌的術(shù)后輔助及姑息性治療領(lǐng)域。含鉑雙藥是公認(rèn)的非小細(xì)胞肺癌化療的一線方案，而以順鉑（Cisplatin，CIS）為代表的鉑類藥物與烷化劑作用相似，主要通過(guò)與DNA分子單鏈內(nèi)兩點(diǎn)或雙鏈發(fā)生交叉鏈接，抑制癌細(xì)胞的DNA復(fù)制過(guò)程。大部分患者在使用多程順鉑治療后可產(chǎn)生耐藥，而機(jī)制尚不明確。有體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，順鉑處理腫瘤細(xì)胞之后，可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)CTL特異性殺傷作用的敏感性[2]。

免疫系統(tǒng)的抗腫瘤作用是通過(guò)體內(nèi)的免疫效應(yīng)細(xì)胞發(fā)揮作用，包括T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等，即細(xì)胞介導(dǎo)的免疫是抗腫瘤免疫的主要方式[3]。T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞在腫瘤免疫監(jiān)視中起中心調(diào)控作用，是機(jī)體抗腫瘤細(xì)胞免疫的重要效應(yīng)細(xì)胞[4]。極高頻電磁波是指波長(zhǎng)在1～10 mm，頻率30～300 GHZ的電磁波，屬非電離輻射中的極高頻波，對(duì)生物體的作用機(jī)制可分為熱效應(yīng)和非熱效應(yīng)。其中，非熱效應(yīng)能調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝與功能，促進(jìn)機(jī)體的新陳代謝，改善局部組織微循環(huán)，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬活性，提高機(jī)體的免疫機(jī)能[5]。國(guó)內(nèi)學(xué)者也報(bào)道極高頻電磁波對(duì)放化療有一定的減毒增效作用[6]。

極高頻電磁波結(jié)合中醫(yī)穴位刺激可能產(chǎn)生疊加效應(yīng)。針灸學(xué)理論認(rèn)為，穴位是人體臟腑經(jīng)絡(luò)之氣輸注于體表的特殊部位，各穴位分別歸屬各經(jīng)脈，各經(jīng)脈隸屬于相應(yīng)臟腑，反映其病理狀況，而刺激穴位能激發(fā)對(duì)應(yīng)的臟腑經(jīng)絡(luò)反應(yīng)，從局部到整體，調(diào)節(jié)氣血運(yùn)行及陰陽(yáng)平衡，扶助正氣，增強(qiáng)機(jī)體的抗病能力。元代醫(yī)家朱丹溪在《活法機(jī)要》中提出：“壯人無(wú)積，虛人則有之”。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，癌瘤的產(chǎn)生與人體正氣虧虛有密切相關(guān)，扶正固本法是中醫(yī)抗腫瘤最重要的治療大法之一?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞普遍具有逃避免疫系統(tǒng)監(jiān)視的特性，而細(xì)胞免疫及體液免疫均能有效抑制某些特定腫瘤的生長(zhǎng)，以程序性細(xì)胞死亡蛋白-1（programmed death-1，PD-1）及其配體（PD-L1）的免疫結(jié)合點(diǎn)阻斷劑、嵌合抗原受體T細(xì)胞（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，CAR-T）等藥物為代表的免疫治療已逐漸成為腫瘤治療的主流。而“免疫功能”與中醫(yī)所云之“正氣”相類似，扶正固本與激發(fā)自身的免疫系統(tǒng)達(dá)到抗腫瘤治療目的有異曲同工之妙。

文獻(xiàn)研究表明關(guān)元、足三里、氣海、腎俞、神闕、中脘等穴位與免疫功能有關(guān)。如足三里為足陽(yáng)明胃經(jīng)合穴，《素問(wèn)·血?dú)庑沃尽分刑岬健瓣?yáng)明常多氣多血”，刺激足三里穴可起到扶助后天脾胃之氣，補(bǔ)益氣血，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，治療免疫缺陷疾病[7-8]。關(guān)元穴位于下腹部，臍下3寸，為足三陰、任脈之會(huì)，古人稱之為“人身元陰元陽(yáng)交關(guān)之處”，有扶正固本、調(diào)理沖任、補(bǔ)益精血等功效。艾灸關(guān)元穴可增強(qiáng)局部熱代謝、提高局部皮膚毛細(xì)血管灌注量、改變局部電流值、改善機(jī)體免疫力等[9]。中醫(yī)認(rèn)為應(yīng)按照辨證施治原則，根據(jù)腫瘤發(fā)生部位及機(jī)體不同癥狀來(lái)選擇相應(yīng)的穴位，不同穴位刺激表現(xiàn)出來(lái)的免疫反應(yīng)不盡相同，多個(gè)穴位共同刺激的治療效果要明顯優(yōu)于單一穴位的刺激。本研究根據(jù)“經(jīng)脈所通，主治所及”的中醫(yī)針灸學(xué)原理，以“循經(jīng)取穴”為基本原則，選穴如下：1、血海穴，屬足太陰脾經(jīng)腧穴，為脾經(jīng)所生之血的聚集之處。為生血及活血化瘀的要穴，刺激后可促進(jìn)造血；2、屋翳：屬足陽(yáng)明胃經(jīng)穴，位于人體胸部，第2肋間隙，距前正中線4寸。其穴內(nèi)物質(zhì)為衛(wèi)外之氣，猶如房屋之屏障保護(hù)機(jī)體免受外來(lái)邪氣的侵襲。主治咳嗽，氣喘，咳唾膿血，胸肋脹痛等，對(duì)應(yīng)肺癌常見(jiàn)癥狀；3、足三里穴：屬足陽(yáng)明胃經(jīng)合穴，刺激該穴可強(qiáng)壯機(jī)體、調(diào)理脾胃功能，治療虛勞；4、關(guān)元穴：為小腸之募穴，可補(bǔ)益氣血，醫(yī)“諸虛百損”。由解剖角度看，這些穴位多處于一些淋巴結(jié)、毛細(xì)血管末梢、骨干骺端等富于造血功能的位置，采用極高頻電磁波照射后，對(duì)其產(chǎn)生刺激，激發(fā)機(jī)體臟腑經(jīng)絡(luò)反應(yīng)，從而調(diào)整陰陽(yáng)平衡，促進(jìn)血脈運(yùn)行，扶助正氣。

本實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)組患者化療前后，第1療程N(yùn)K細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞亞群均未見(jiàn)明顯變化（P＞0.05），第2療程患者化療后總T細(xì)胞、Th細(xì)胞可見(jiàn)明顯提升（P＜0.05），提示免疫功能得到提升；NK細(xì)胞、Ts細(xì)胞、Th/Ts均未見(jiàn)明顯變化（P＞0.05）；對(duì)照組第1療程、第2療程化療后均出現(xiàn)NK細(xì)胞下降（P＜0.05），T淋巴細(xì)胞亞群均未見(jiàn)明顯變化（P＞0.05）；化療后患者出現(xiàn)NK細(xì)胞減少，殺傷腫瘤細(xì)胞能力下降。兩組同期化療前后NK細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞亞群變化情況，第1療程、第2療程實(shí)驗(yàn)組經(jīng)極高頻電磁波照射治療后，患者NK細(xì)胞較對(duì)照組升高明顯（P＜0.05）；對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群，兩組間未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。初步結(jié)果顯示，極高頻電磁波進(jìn)行穴位照射是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下的特色療法，可能提高非小細(xì)胞肺癌患者化療后NK細(xì)胞水平，調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，與化療產(chǎn)生協(xié)同作用，作為化療期間的輔助治療，可操作性較強(qiáng)。