冷霧化兩用機在病理石蠟組織切片中的應(yīng)用

陸海善　羅春英　黃永秩　趙志文

【關(guān)鍵詞】 病理切片;干燥;靜電;冷霧化機

中圖分類號：R361+2? ?文獻標(biāo)志碼：B? ?DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.06.018

在病理組織石蠟切片制作時，切片的質(zhì)量與切片時工作環(huán)境、溫度、濕度有直接關(guān)系;在冬季，空氣干燥，切片時容易產(chǎn)生靜電，導(dǎo)致切片困難和切下的組織薄片粘連或出現(xiàn)裂縫、皺褶、顫痕、攤片困難、切片速度慢等問題。此類現(xiàn)象直接影響切片質(zhì)量、鏡下觀察，造成診斷困難，影響工作效率。所以，在臨床病理制片過程中急需解決以上問題。我們通過使用組織切片冷霧化兩用機對蠟塊和周圍空氣進行霧化加濕，期望通過該方法改善制片質(zhì)量，同時提高工作效率。

1 材料與方法

1.1 材料 搜集2018年8～12月間右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科外檢標(biāo)本蠟塊100個，其中胃腸鏡活檢35個，腺樣囊性癌組織蠟塊25個，甲狀腺蠟塊15個，淋巴結(jié)組織蠟塊25個。所用器材：萊卡脫水機，LeicaRM2245型切片機，組織切片冷霧化兩用機（CA310，見圖1），珊頓MX35型刀片。

1.2 方法 選取100個蠟塊均經(jīng)過4%中性甲醛固定，在萊卡脫水機中經(jīng)過梯度乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟浸泡、常規(guī)包埋[1]。蠟塊均使用同一臺切片機進行切片，厚度均為3 μm;每一蠟塊切片2次，第1次切片時采用組織切片冷霧化兩用機進行霧化處理，在切片過程中從始至終對蠟塊進行冷凝及霧化，該組切片為霧化組;第2次切片時按照常規(guī)切片即不使用冷霧化兩用機處理，該組切片為對照組。整個操作過程均由同一經(jīng)驗豐富的技師操作。

1.3 病理組織切片質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn) 在顯微鏡下觀察兩組病理組織切片的質(zhì)量，將病理組織切片分為優(yōu)質(zhì)片、良質(zhì)片和差質(zhì)片三個等級[2]。（1）優(yōu)質(zhì)片：編號清晰，薄厚適宜，無褶皺，色彩鮮亮，對比明確，易于觀察;（2）良質(zhì)片：編號清晰，有較少的褶皺，無污染及活氣泡， 色彩較為鮮亮，比較容易觀察;（3）差質(zhì)片：編號不清晰，有較多的褶皺或氣泡，顏色不清晰，對比不明顯，不易于觀察。優(yōu)良率= （優(yōu)質(zhì)片數(shù)+良質(zhì)片數(shù)） /總片數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 將本次研究的數(shù)據(jù)錄入到SPSS 20.0軟件中進行處理，計數(shù)資料用%表示， 采用χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2 結(jié)? 果

對照組切片時，用毛筆挑起切片時有靜電現(xiàn)象，由于靜電吸附，組織薄片容易粘連刀架和毛筆，不易挑起和分離（如圖2-A），切片困難，切完100個蠟塊用時130 min;霧化組切片時，用毛筆能輕松挑起組織片，靜電黏附現(xiàn)象消失（如圖2-B），切片放入水中容易展平，切完100個蠟塊用時100 min。

兩批石蠟切片均入自動染色機進行染色，自動封片后，利用顯微鏡鏡下觀察組織，對照組有8張胃腸組織、6張腺樣囊性癌組織、4張甲狀腺組織、8張淋巴結(jié)組織切片出現(xiàn)裂隙或折疊（如圖3-A、B）;霧化組只有3張淋巴結(jié)組織、1張甲狀腺組織出現(xiàn)少許折疊，其余組織均平整無裂隙;霧化組切片優(yōu)良率明顯高于對照組（圖3-C、D），用時也少于對照組，工作質(zhì)量及效率高于對照組。兩組組織標(biāo)本優(yōu)良率比較見表1。

3 討? 論

切片是影響組織切片質(zhì)量的重要一步，其相關(guān)影響因素較多。首先，在寒冷的冬天，空氣干燥，濕度低，當(dāng)濕度小于40%時，切片容易出現(xiàn)靜電現(xiàn)象，用毛筆不易挑起切片，容易出現(xiàn)粘連、皺褶甚至裂隙現(xiàn)象，造成組織切片困難[3]。其次出于成本考慮，很多基層醫(yī)院病理科只能配備1～2臺組織脫水機，還不能做到組織的分類處理，為了保證多數(shù)組織的脫水質(zhì)量，難免有些小組織（如胃腸、鼻咽等組織）和部分類型的組織（如子宮內(nèi)膜、淋巴結(jié)等）脫水過度，出現(xiàn)組織過脆的現(xiàn)象，切片時容易出現(xiàn)裂隙折疊，影響制片質(zhì)量[4]。

針對以上問題，有些技術(shù)員在切片時采取冰塊涂抹或用冰水浸泡，或在切片過程中遇到較硬、脆的組織時，取下所戴口罩向蠟塊吹氣，或用戴著手套的手摸蠟塊，防止蠟塊冰冷過度，并以此增加蠟塊濕度。這些補救措施雖然在一定程度上解決問題，但其操作不規(guī)范，不能保證切片質(zhì)量的穩(wěn)定性，并且影響工作效率，拖延病理報告的發(fā)出時間。

我們應(yīng)用冷霧化兩用機來解決空氣干燥和靜電吸附問題，結(jié)果顯示效果好、操作簡單，切片質(zhì)量穩(wěn)定，工作效率明顯提高。冷霧化兩用機的工作原理是利用成熟的超聲波霧化技術(shù)為基礎(chǔ)，霧化、加濕蠟塊表面及周圍的空氣，能有效地消除切片的干燥和靜電，同時輔以制冷機進行溫度調(diào)節(jié)，保持蠟塊的冷凍狀態(tài)。

冷霧化兩用機體積小，價格不貴，場地需求不高，而且能明顯提高工作效率，因此，我們認(rèn)為值得推廣使用。

參 考 文 獻

[1]? 王伯沄，李玉松，黃高升，等.病理學(xué)技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：75-76.

[2]? 王德田，董建強.實用現(xiàn)代病理學(xué)技術(shù)[M].北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2012：76.

[3]? 付先利，吳建農(nóng).一種解決切片干燥的方法[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志，2013，29（7）： 807.

[4]? 楊 梅.免疫組化染色對病理技術(shù)質(zhì)量控制的影響分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2017，15（19）：72-73.

（收稿日期：2018-12-19 修回日期：2019-04-11）

（編輯：潘明志）