新疆烏魯木齊縣牛、羊O型、A型口蹄疫抗體水平監(jiān)測(cè)與分析

齊姍姍

（新疆烏魯木齊市烏魯木齊縣畜牧獸醫(yī)站，新疆 烏魯木齊縣 830000）

口蹄疫,由病毒引起的是一種急性、熱性、高傳染性疾病，該病傳播速度快，傳播距離遠(yuǎn)，易感動(dòng)物可達(dá)70余種,包括豬、牛、羊等主要畜種及其他偶蹄動(dòng)物。臨床上以口鼻、乳房、蹄冠和趾間的皮膚黏膜出現(xiàn)水泡和爛斑為特征[1]?？谔阋吣壳耙寻l(fā)現(xiàn)七個(gè)血清型，分別為南非1、2、3型，亞洲Ⅰ型和A、O、C型，流行于我國(guó)的主要血清型為亞洲Ⅰ、A和O型[2]?？谔阋卟煌逍椭g無(wú)交叉保護(hù)性，所以給基層防控工作帶來(lái)很大困難，是危害我國(guó)畜牧業(yè)健康發(fā)展的一類重大動(dòng)物疫病[3]。

烏魯木齊縣隸屬于新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市，地處天山北麓，準(zhǔn)噶爾盆地南緣，東起喀拉塔格山以大河沿為界與吐魯番市接壤，南隔天山吐格塔格山與托克遜、和靜兩縣毗鄰，西至頭屯河與昌吉市相依，北與米東區(qū)相連，東北隔博格達(dá)山與吉木薩爾縣、阜康市為鄰。該縣為烏魯木齊市牲畜養(yǎng)殖密集區(qū)，畜牧業(yè)為該縣的主要產(chǎn)業(yè)[4]，為掌握當(dāng)前牛、羊口蹄疫疫苗的免疫水平，及時(shí)杜絕疫情隱患，本研究采用液相阻斷ELISA試驗(yàn)對(duì)烏魯木齊縣6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的牛、羊進(jìn)行了口蹄疫抗體水平檢測(cè)分析[5]，對(duì)全縣口蹄疫疫苗的免疫效果進(jìn)行評(píng)估，為后期的重大動(dòng)物疫病防控工作提供參考依據(jù)[6]。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

2018年10-11月期間，6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的村級(jí)動(dòng)物防疫員共采集散養(yǎng)牛全血樣品1 211份、羊全血樣品1 464份。

1.1.1 血清制備

將采集的血液樣品在3 000 r/min條件下離心3～5 min，取血清2 mL放入滅菌離心管中，-20℃保存待檢。

1.2 試劑及儀器設(shè)備

1.2.1 口蹄疫抗體檢測(cè)試劑

口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒 （批號(hào)：20181010101-2）和口蹄疫A型抗體液相阻斷ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：20181015103-1）均購(gòu)自蘭州獸醫(yī)研究所。

1.2.2 儀器設(shè)備

離心機(jī)：TDZ4-WS臺(tái)式低速自動(dòng)平衡離心機(jī)購(gòu)自長(zhǎng)沙湘智離心機(jī)有限公司。

移液器：量程為1-100 μL可調(diào)單道移液器、量程為1-300 μL可調(diào)十二道移液器，均為德國(guó)eqqendorf公司產(chǎn)品。

閉環(huán)控制中存在著無(wú)功優(yōu)化與電壓校正兩個(gè)模塊，控制流程如圖1所示，優(yōu)化與校正的關(guān)系如下：①用優(yōu)化算法可以進(jìn)行電壓校正，但失敗情況較多，計(jì)算速度較慢，而且動(dòng)作設(shè)備是全網(wǎng)的控制變量，這樣從控制的經(jīng)濟(jì)性考慮和調(diào)度經(jīng)驗(yàn)考慮都是不可行的。②將優(yōu)化與校正分離，在電壓正常時(shí)對(duì)全網(wǎng)進(jìn)行優(yōu)化，考慮降損并實(shí)現(xiàn)逆調(diào)壓，由于優(yōu)化實(shí)現(xiàn)了逆調(diào)壓，可以盡量保證電壓不越限。③在有電壓越限的情況下，啟動(dòng)校正。校正算法在控制區(qū)內(nèi)根據(jù)靈敏度選擇控制變量進(jìn)行校正，只需動(dòng)作幾個(gè)對(duì)越限點(diǎn)影響最大的幾個(gè)設(shè)備，使用基于最小二乘理論的直接校正算法只需幾秒鐘[5]。

培養(yǎng)箱：BPMJ-250F型培養(yǎng)箱購(gòu)自上海一恒科學(xué)儀器有限公司。

酶標(biāo)儀：SUNRISE型全自動(dòng)酶標(biāo)分析儀。

1.3 檢測(cè)方法及結(jié)果判定

1.3.1 檢測(cè)方法

嚴(yán)格按照O型、A型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。1.3.2 結(jié)果判定

抗體效價(jià)大于或等于 1：128 判為口蹄疫抗體陽(yáng)性；1：64～1：128 時(shí)，判為可疑;小于 1：64，判定為陰性?？梢裳鍢悠罚梢灾販y(cè)，重測(cè)抗體效價(jià)大于或等于1：128，判為陽(yáng)性，小于1：128判為陰性。

2 結(jié) 果

2.1 牛O、A型口蹄疫抗體合格率

表1 2018年烏魯木齊縣牛O、A型口蹄疫抗體合格率統(tǒng)計(jì)表 份

2.2 羊O、A型口蹄疫抗體合格率

從采集的1 464份羊血清樣品中檢測(cè)出O型和A型口蹄疫抗體免疫合格樣品數(shù)量均為1 402份，即烏魯木齊縣羊群中O型和A型口蹄疫抗體免疫總體合格率均為95.8%，其中板房溝鎮(zhèn)抗體免疫合格率為88%，水西溝鎮(zhèn)抗體免疫合格率為95%，永豐鄉(xiāng)抗體免疫合格率為96%，薩爾達(dá)坂鄉(xiāng)抗體免疫合格率為97%，托里鄉(xiāng)抗體免疫合格率為98%，甘溝鄉(xiāng)抗體免疫合格率為99%（詳見(jiàn)表2）。

表2 2018年烏魯木齊縣羊O、A型口蹄疫抗體合格率統(tǒng)計(jì)表份

從表1、表2中可以看出烏魯木齊縣牛、羊口蹄疫抗體免疫合格率均達(dá)到了我國(guó)農(nóng)業(yè)部制定的家畜口蹄疫群體免疫合格率≥70%的標(biāo)準(zhǔn)。烏魯木齊縣牛、羊口蹄疫抗體合格率水平較高，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)之間抗體水平穩(wěn)定，波動(dòng)幅度較小,說(shuō)明疫苗的免疫效果好，能夠有效地預(yù)防口蹄疫。

3 結(jié)論與討論

3.1 結(jié)論

烏魯木齊縣牛羊口蹄疫抗體免疫合格率較高，主要原因是對(duì)口蹄疫防控工作的重視，主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：對(duì)免疫檢測(cè)程序不斷進(jìn)行優(yōu)化，有效提高免疫工作的效率；每個(gè)月進(jìn)行下鄉(xiāng)檢查，監(jiān)督管理到位；對(duì)村級(jí)動(dòng)物防疫員進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn)，嚴(yán)格按照技術(shù)規(guī)范操作；對(duì)血清樣品保存嚴(yán)格，保證血清質(zhì)量良好。

有些鄉(xiāng)鎮(zhèn)抗體水平相對(duì)較低，防控工作仍任重道遠(yuǎn)。這些鄉(xiāng)鎮(zhèn)抗體水平較低的原因主要是牧民防范意識(shí)薄弱，沒(méi)有按照國(guó)家制定的規(guī)章制度進(jìn)行疫苗免疫；飼養(yǎng)管理不當(dāng)，飼養(yǎng)制度不完善，飼料種類單一、品質(zhì)不良，日糧配合不合理；畜舍衛(wèi)生消毒制度不健全，外來(lái)人員可隨意出入圈舍，人員較為雜亂，導(dǎo)致家畜抵抗力低下，容易患病；部分村級(jí)動(dòng)物防疫員仍欠缺專業(yè)知識(shí)和缺乏動(dòng)物防疫的專業(yè)素養(yǎng)。所以，在加強(qiáng)防疫人員規(guī)范操作的同時(shí)還應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和圈舍衛(wèi)生，增強(qiáng)畜群的抵抗力，從而有效控制口蹄疫。

3.2 討論

口蹄疫傳染性強(qiáng)，傳播迅速，易造成大流行，主要侵害偶蹄動(dòng)物，在皮膚黏膜和少毛與無(wú)毛部的皮膚上形成水皰、爛斑等口蹄疫病變。成年牲畜病死率低，一般呈良性經(jīng)過(guò)，但幼畜死亡率較高。一年四季均有發(fā)生，但其流行卻有明顯的季節(jié)規(guī)律。一般冬春季較易發(fā)生大流行，夏季減緩或平息[7]。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）數(shù)據(jù)顯示，A型口蹄疫感染率呈下降趨勢(shì)，近三年來(lái)僅零星發(fā)生；而O型口蹄疫則呈現(xiàn)持續(xù)增長(zhǎng)的趨勢(shì)，至2018年O型口蹄疫疫情已占絕大部分。2017年全球O型口蹄疫感染率是同年A型的3倍[8]。A型口蹄疫在未來(lái)很可能會(huì)逐漸消失。

3.2.1 我國(guó)大多數(shù)地區(qū)口蹄疫的免疫狀況總體良好，能夠有效抵御大規(guī)模爆發(fā)

王娟娟[9]對(duì)2014年柳城縣豬群480份血清樣品進(jìn)行口蹄疫免疫抗體檢測(cè)，豬口蹄疫抗體水平總體合格率是76.0%。張國(guó)華[10]對(duì)2016年巴中市各區(qū)縣試驗(yàn)抽取440份豬、牛、羊血清進(jìn)行了口蹄疫免疫抗體檢測(cè)，所有血清樣品的O型口蹄疫免疫抗體合格率平均為75.53%。羅渝等[11]對(duì)2018年新和縣8個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機(jī)采集血清樣品3774份進(jìn)行了口蹄疫免疫抗體檢測(cè)，牛免疫抗體合格率為82.9%,羊免疫抗體合格率為78.1%。以上檢測(cè)結(jié)果表明大多數(shù)地區(qū)口蹄疫的免疫合格率高于國(guó)家免疫方案中要求的≥70%的標(biāo)準(zhǔn)。

3.2.2 口蹄疫的防治關(guān)系到我國(guó)畜牧業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展

疫苗免疫是我國(guó)控制口蹄疫的關(guān)鍵措施。雖然我國(guó)大部分地區(qū)口蹄疫免疫情況良好，但有些地區(qū)口蹄疫疫情嚴(yán)重，防控工作仍要提高重視程度，加強(qiáng)監(jiān)測(cè)力度。養(yǎng)殖單位應(yīng)提高防控意識(shí)，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，發(fā)現(xiàn)疫情立即上報(bào)并隔離發(fā)病動(dòng)物，按國(guó)家相關(guān)規(guī)定處置疫點(diǎn)、疫區(qū)和受威脅區(qū)的易感動(dòng)物，撲殺并無(wú)害化處理疫點(diǎn)易感動(dòng)物，以免疫情蔓延。