一種測定21種蔬菜中甲基異柳磷含量的方法

楊 熙，曾 莉，朱大林，林澤鵬

(中國廣州分析測試中心 廣東省化學(xué)危害應(yīng)急檢測技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510070)

甲基異柳磷(isofenphos-methyl)，化學(xué)名稱：N-異丙基-O-甲基-O-[(2-異丙氧基羰基)苯基]硫代磷酰胺酯[1]。甲基異柳磷是一種土壤殺蟲劑，對害蟲具有較強(qiáng)的觸殺和胃毒作用，其殺蟲廣譜、殘效期長，是防治地下害蟲的優(yōu)良藥劑[2]。該殺蟲劑殺蟲廣譜，殘效期長，是防治地下害蟲的優(yōu)良藥劑，主要用于小麥、花生、大豆、玉米、地瓜、甜菜、蘋果等作物防治蠐螬、螻蛄、金針蟲等地下害蟲，也可用于防治粘蟲、蚜蟲、煙青蟲、桃小食心蟲、紅蜘蛛等[3]。目前，甲基異柳磷已被列入蔬菜生產(chǎn)上的禁用農(nóng)藥之一，且將其列為蔬菜農(nóng)藥殘留量定量監(jiān)測的農(nóng)藥品種之一，因而甲基異柳磷農(nóng)藥檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性顯得尤為重要[4]。為了更有效、更科學(xué)地使用甲基異柳磷殺蟲劑,需要對其在農(nóng)作物中的殘留量進(jìn)行監(jiān)測[5]。在GB 2763-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量[6]中規(guī)定甲基異柳磷在大部分蔬菜中使用的殘留限量臨時(shí)限值都是不得超過0.01 mg/kg，所以對于大部分蔬菜中甲基異柳磷的微含量檢測需要有合適的方法來測定，而本文所建立的方法是既高效有節(jié)約成本的分析方法。

目前，能夠測定甲基異柳磷的方法很多，比如現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.144-2003[7]、以及很多人提出適用于甲基異柳磷檢測的農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NYT 761-2008 蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定[8]的氣相色譜法，兩種標(biāo)準(zhǔn)方法處理步驟繁瑣且耗用試劑高，不利于環(huán)保，且NYT 761-2008所用提取溶劑乙腈沸點(diǎn)較高，濃縮時(shí)間長。另外，光譜快速檢測法[9-10]，氣質(zhì)聯(lián)用法[11-12]等多種方法對于檢出限相對偏高，對于樣品中甲基異柳磷微含量檢測有可能大部分檢測不出，而造成結(jié)果是未檢出，達(dá)不到GB 2763-2016蔬菜限量值要求。為此建立了本方法較為實(shí)用，能夠準(zhǔn)確定性定量，適用于大批量檢測，分析速度快、節(jié)約資本的同時(shí)有利于環(huán)保適用于本文21種蔬菜的檢測。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

Agilent7890B氣相色譜儀(GC FPD檢測器)；XW-80A微型震蕩儀；TDZ5-WS離心機(jī)：湖南塞特湘儀科技有限公司；N-EVAP氮吹儀：美國Organomation；50 mL塑料離心試管：美國Labcon Perform RTM；5 mL比色管，100 mL燒杯：天波玻璃儀器有限公司；Sartorius電子天平。

甲基異柳磷：100 μg/mL，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所；乙酸乙酯、無水硫酸鈉：廣州化學(xué)試劑廠。

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：把甲基異柳磷標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙酸乙酯配制成1.00 μg/mL的儲備液。

1.2 實(shí)驗(yàn)步驟

將樣品打碎磨成漿狀之后稱取10 g(精確至0.000 1 g)置于50 mL塑料離心試管中，加入乙酸乙酯25 mL、在微型漩渦混合儀震蕩2 min，放于離心機(jī)3000 r/min離心5 min，取出有機(jī)相到100 mL燒杯，再用乙酸乙酯提取2次，合并有機(jī)相溶液，用30～40 g無水硫酸鈉進(jìn)行除水，最后將有機(jī)相溶液在氮吹儀上(水溫40～45℃)濃縮至低于5 mL，乙酸乙酯定容至10 mL，供氣相色譜FPD分析。

1.3 分析條件

色譜柱：DB1701(30 m×320 μm×0.25 μm)；柱溫130℃(保持1 min)，以15℃(1 min)升至240℃保持3 min。進(jìn)樣口220℃；分流比5∶1，進(jìn)樣量1 μL；FPD檢測器270℃；氮?dú)庾鬏d氣，流量2 mL/min；尾吹流量60 mL/min；氫氣流量60 mL/min；空氣流量100 mL/min。

2 結(jié)果與探討

2.1 選擇溶劑

能夠提取有機(jī)磷一類農(nóng)藥的的有機(jī)溶劑有多種，但是能夠用于甲基異柳磷的提取溶劑我們經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)對以下幾種進(jìn)行選用。幾種分別是二氯甲烷、丙酮、乙腈、乙酸乙酯等，首先是二氯甲烷沸點(diǎn)較低，揮發(fā)快，回收率較低，丙酮不能夠和水相很好的分成，導(dǎo)致提取不完全，乙腈是比較合適的提取溶劑，回收率也可達(dá)到要求，但是由于沸點(diǎn)較高，在濃縮時(shí)耗時(shí)較長，這三種溶劑綜合考慮之后，不宜選用。最終，選用乙酸乙酯作為本方法的提取溶劑，回收率在幾種選用溶劑中最高，最為理想。

在采用1.3的分析條件下，所用的毛細(xì)管柱DB1701和FPD檢測器檢測后，可從圖1中清晰地看到甲基異柳磷峰型良好且無拖尾，無干擾，達(dá)到理想的分離效果，且分析時(shí)間短，目標(biāo)峰在9 min之內(nèi)即完全出峰。在本方法的分析條件下同時(shí)也贊成使用HP-5MS色譜柱做檢測分析，效果上和DB1701分離效果并無差距，不管是研究或是檢測兩種色譜柱都適用。選用色譜柱和采用本方法的色譜條件節(jié)省大量分析時(shí)間和成本，證明此色譜條件及色譜柱適用性不只是對于甲基異柳磷的檢測分析也適用其他有機(jī)磷項(xiàng)目的檢測。甲基異柳磷色譜峰見圖1中2的對照品。

2為甲基異柳磷、3為空白、1為陽性樣品

2.2 測定結(jié)果

2.2.1 本方法21種蔬菜樣品的測定結(jié)果，詳見表1。

表1 21種蔬菜的測定結(jié)果

表1(續(xù))

2.2.2 線性關(guān)系、回歸方程及檢出限

將配制好濃度為1.00μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液稀釋成濃度為0.020，0.040，0.080，0.120，0.20 μg/mL的線性濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行分析。以峰面積(Y)對質(zhì)量濃度(X)進(jìn)行回歸分析計(jì)算，得到相應(yīng)的回歸方程。以3倍信噪比和基線噪聲為2.0 pA·s計(jì)算出本方法的檢出限，詳見表2。

表2 甲基異柳磷的線性關(guān)系、相關(guān)系數(shù)及檢出限

由表2數(shù)據(jù)可以看出，本方法的檢出限為0.0029 mg/kg明顯要低于GB/T 5009.144-2003國標(biāo)中的檢出限0.004 mg/kg，更加體現(xiàn)出本方法的適用性，對于蔬菜中甲基異柳磷微含量的檢測是完全適用的。

2.2.3 回收率及精密度

取青椒陰性樣品10 g進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，以線性濃度范圍的高、中、低濃度為加標(biāo)點(diǎn)0.020，0.080和0.20 μg/mL為加標(biāo)濃度加標(biāo)量為1 mL(即絕對含量為0.020，0.080和0.20 μg)，按照本方法的實(shí)驗(yàn)步驟操作，每個(gè)加標(biāo)濃度平行加標(biāo)3次，計(jì)算出3個(gè)濃度各3次加標(biāo)的平均回收率和各自相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)；試驗(yàn)結(jié)果詳見表3。

表3 加標(biāo)量、測定結(jié)果、回收率及RSD(n=3)

3 結(jié)論

本方法通過優(yōu)化前處理，改變色譜條件，建立了一種對21種蔬菜中甲基異柳磷含量測定的氣相色譜法。由多次實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)論是：該方法分析速度快，效率高、節(jié)約成本且能夠準(zhǔn)確定量，滿足大批量蔬菜中甲基異柳磷殘留檢測分析。