薛風(fēng)蘭
【摘 要】目的是排除獻(xiàn)血者血型鑒定的影響因素,采取積極有效的應(yīng)對措施,在血型鑒定過程中,按照國家標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,切實(shí)保證血型鑒定的100%準(zhǔn)確度,并滿足臨床輸血的安全性和有效性。
【關(guān)鍵詞】血型鑒定;ABO血型正反定型不符;影響因素;準(zhǔn)確定型;處理方法
【中圖分類號】R446.6【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-3783(2019)07-03--01
血液從供血者到臨床用血的過程中,正反定型是其中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。ABO 血型正反定型不一致的原因可能是操作檢驗(yàn)有誤或獻(xiàn)血者自身紅細(xì)胞或血清標(biāo)本存在問題,準(zhǔn)確的血型鑒定有助于避免ABO血型正反定型不符的出現(xiàn),提高血液采集的有效性,進(jìn)一步保障臨床輸血安全。通過探討血型正反定型不符形成的原因,采取更加積極有效的手段,排除血型鑒定的各種影響因素,從而保證輸血的安全有效。
1 ABO血型正反定型不符的幾種原因
1·1 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程不到位
表現(xiàn)為操作者工作責(zé)任心渙散,沒有按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作,未認(rèn)真核對,不細(xì)心觀察,工作粗心大意,標(biāo)本搞錯(cuò)等,試管中未添加標(biāo)準(zhǔn)血清或待檢血清,添加血清及紅細(xì)胞標(biāo)本過程中放置混亂,這類問題出現(xiàn)時(shí)常較嚴(yán)重。還有技術(shù)水平差,血型判斷錯(cuò)誤,紅細(xì)胞懸液太濃或太淡,紅細(xì)胞和血清比例不適當(dāng),離心速度和離心時(shí)間與要求不符,血型試劑保存不當(dāng)、室溫放置時(shí)間過久,溶血被錯(cuò)誤定性為陰性,冷抗體被誤認(rèn)為真凝集等。還有弱凝集結(jié)果判定時(shí)肉眼觀察不細(xì)致,又不用顯微鏡觀察。這些情況的發(fā)生都會(huì)導(dǎo)致血型誤判。
1·2 紅細(xì)胞標(biāo)本自身問題
極少數(shù)獻(xiàn)血者血液中存在某些ABO亞型紅細(xì)胞(如A亞型、B亞型),紅細(xì)胞表面抗體太弱,在正定型時(shí)出現(xiàn)假陰性表現(xiàn)。
出現(xiàn)紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象或自身凝集問題。由于遺傳性或獲得性原因使紅細(xì)胞表面發(fā)生異常,出現(xiàn)多凝集現(xiàn)象;也有某些疾病導(dǎo)致自身凝集現(xiàn)象而出現(xiàn)假陽性表現(xiàn)。
獻(xiàn)血者以前接受過異型輸血,其體內(nèi)有其他血型的紅細(xì)胞存在。
受到紅細(xì)胞獲得性抗原的影響,進(jìn)行鑒定時(shí)血型有可能發(fā)生改變。
紅細(xì)胞懸浮液中含有高濃度的其它血型物質(zhì),中和了抗A及抗B血清,出現(xiàn)假陰性表現(xiàn),如某些獻(xiàn)血者因?yàn)樽陨碓蚩稍斐裳臀镔|(zhì)濃度太高,需要多次洗滌紅細(xì)胞后再進(jìn)行鑒定。
紅細(xì)胞懸浮液里含有某種不同成分的抗體,出現(xiàn)假陽性反應(yīng),需要最少洗滌三次紅細(xì)胞后再進(jìn)行鑒定。
攝入藥物、抗凝劑等物質(zhì)對血型結(jié)果造成影響。比如短期內(nèi)輸入大量右旋糖酐等膠體溶液,能吸附紅細(xì)胞表面的抗原,引起紅細(xì)胞聚集,可以使原有的抗原性發(fā)生改變,從而引起血型的改變。
某些疾病也會(huì)導(dǎo)致紅細(xì)胞表面抗原減弱,在進(jìn)行血型正定型鑒定時(shí)容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
極少數(shù)獻(xiàn)血者體內(nèi)含有兩類紅細(xì)胞群體,血型鑒定時(shí)出現(xiàn)混合外觀凝集。
接受放射性照射過量可能導(dǎo)致紅細(xì)胞表面抗原發(fā)生變異,造成血型改變。
1·3 血清標(biāo)本出現(xiàn)問題
操作者在用血漿或者血清做反定型時(shí)出現(xiàn)的呈凝膠狀的纖維蛋白凝塊被誤認(rèn)為是凝集。
某些疾病會(huì)導(dǎo)致血清中蛋白比例失調(diào),或纖維蛋白含量過高容易出現(xiàn)假凝集。
獻(xiàn)血者接受過異型輸血容易刺激機(jī)體產(chǎn)生不規(guī)則抗體。
血清中含有其他不同的凝集紅細(xì)胞的抗體,此類抗體會(huì)凝集紅細(xì)胞發(fā)生假凝集。
獻(xiàn)血者血清中的冷抗體造成的自凝現(xiàn)象,容易造成假凝現(xiàn)象,血型鑒定時(shí)用其紅細(xì)胞和生理鹽水在37℃水浴五至十分鐘做陰性對照。
輸入了異型血漿,導(dǎo)致血清中出現(xiàn)了意外抗體。
2 ABO血型正反不符的應(yīng)對措施
2·1 最有效的處理方法
(1)按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程重新鑒定血型,增強(qiáng)操作人員的責(zé)任心和技術(shù)水平,避免發(fā)生誤判情況,工作中切勿出現(xiàn)血型試劑加漏或者標(biāo)本加錯(cuò),并通過業(yè)務(wù)技術(shù)的積累提高操作的準(zhǔn)確性和判斷力。
(2)排除標(biāo)本錯(cuò)誤或標(biāo)準(zhǔn)血清被污染引起的非特異性凝集,應(yīng)該及時(shí)更換失效的標(biāo)準(zhǔn)血清和標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞。
(3)為防止漏查冷凝集反應(yīng),還要通過顯微鏡觀察配合肉眼觀察,確保結(jié)果判斷的準(zhǔn)確性和可靠性??赏ㄟ^做正定鑒定時(shí)用自身紅細(xì)胞加生理鹽水作對照,做反定鑒定時(shí)用自身血清加O型紅細(xì)胞作對照。如果發(fā)現(xiàn)對照管出現(xiàn)凝集,說明血清中還有冷凝集素存在。
(4)對于篩選出的存疑標(biāo)本,應(yīng)該排除不規(guī)則抗原的存在,方法是用生理鹽水將標(biāo)本紅細(xì)胞洗滌3次,去除吸附在紅細(xì)胞表面的抗原后再重新鑒定血型。
(5)排除弱抗原抗體反應(yīng),方法是抗原抗體反應(yīng)后應(yīng)在室溫20~24℃環(huán)境中放置半小時(shí)后,離心觀察排除冷凝集素的干擾。
(6)弱凝集現(xiàn)象遇到外力作用會(huì)使凝塊消失,所以試管從離心機(jī)取出后應(yīng)當(dāng)輕輕邊搖邊仔細(xì)觀察,并配合顯微鏡觀察。
(7)實(shí)在無法判定血型的標(biāo)本,運(yùn)用聚凝胺法、抗人球法等方法也可以作為鑒定血型的有效手段。
2·2 弱抗原所致血型正反定型不符的應(yīng)對措施
極少數(shù)獻(xiàn)血者由于自身體質(zhì)原因或疾病導(dǎo)致抗原減弱出現(xiàn)正反定型不符,可通過試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)??乖贵w反應(yīng)時(shí)在室溫20-24℃環(huán)境中放置半小時(shí),能夠增強(qiáng)抗A、抗B和抗A1B與紅細(xì)胞抗原的結(jié)合;在4℃放置半小時(shí)更能增強(qiáng)抗原抗體的結(jié)合,參照O型和自身紅細(xì)胞對照試驗(yàn),排除冷凝集反應(yīng)。
2·3 非特異性凝集所致正反定型不符的處理方法
非特異性凝集主要是冷凝集素在體內(nèi)作用導(dǎo)致。冷凝集素是冷反應(yīng)型抗紅細(xì)胞抗體,在0-4℃時(shí)最易和紅細(xì)胞膜抗原結(jié)合,是免疫球蛋白IGM抗體引起的自身免疫性凝集。健康人體內(nèi)冷凝集素效價(jià)一般小于1:16,只在20℃以下反應(yīng),4℃反應(yīng)最強(qiáng),因此嚴(yán)重干擾了血型的鑒定,只有在37℃孵育10分鐘,凝塊減弱直至消失,這就表明該標(biāo)本有冷凝集素。
2016年1月,我站采血車去同煤集團(tuán)采血,當(dāng)時(shí)外界氣溫零下十幾度,采血車內(nèi)溫度也不太高,其中一位獻(xiàn)血著在獻(xiàn)血初篩時(shí)紙片法血型定為B型,后來站內(nèi)檢驗(yàn)科用試管法復(fù)查血型時(shí),發(fā)現(xiàn)該獻(xiàn)血者血型其實(shí)為O型,抗B血清與該獻(xiàn)血者紅細(xì)胞血液有輕微凝集,然后放置在37℃水浴箱孵育十分鐘后發(fā)現(xiàn)凝集散開,證明該獻(xiàn)血者血液中有冷凝集素存在。
綜上所述,在AB0血型鑒定試驗(yàn)中,出現(xiàn)正反定型不符,不能立即判定血型結(jié)果,而是通過積累的豐富檢驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),建立和完善標(biāo)準(zhǔn)的操作流程,科學(xué)地分析ABO血型正反定型不符產(chǎn)生的真實(shí)原因,確保及時(shí)排除干擾,發(fā)現(xiàn)差錯(cuò),并對異常結(jié)果進(jìn)行系統(tǒng)全面地分析,確保ABO血型準(zhǔn)確無誤。如果發(fā)現(xiàn)正反定型不符的血液,不能用于臨床輸注,以保障臨床用血安全。
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