辣椒葉斑病病原學(xué)及分子檢測研究

趙瑜萍

【摘要】辣椒葉斑病是我國新報(bào)道的植物病害，在保護(hù)地辣椒生產(chǎn)中，病害發(fā)生面積及其危害呈上升趨勢。目前對(duì)于該病的發(fā)生危害、病原學(xué)、致病機(jī)理、病害發(fā)生規(guī)律乃至分子檢測等均缺乏系統(tǒng)的研究，制約著病害防治策略的制定及病害的防控。本文針對(duì)這些問題，以夾江縣土門鄉(xiāng)辣椒種植中發(fā)現(xiàn)的葉斑病為研究對(duì)象，對(duì)其致病病原進(jìn)行了鑒定，從病菌生物學(xué)特性、致病力分化、種群遺傳多樣性和侵染特性個(gè)方面進(jìn)行了病原學(xué)的系統(tǒng)研究;對(duì)其病原菌致病機(jī)理進(jìn)行了初步探討;并建立了辣椒葉斑病菌的分子檢測技術(shù)，以期為病害的早期診斷提供有效方法。

【關(guān)鍵詞】辣椒種植;葉斑病;病原學(xué)

夾江縣土門鄉(xiāng)地處縣城以北13公里，幅員面積達(dá)26.84平方公里，轄區(qū)有7個(gè)行政村、49個(gè)農(nóng)業(yè)社、1個(gè)社區(qū)，屬于淺丘地區(qū)。鄉(xiāng)境內(nèi)主要作物是海椒和茶葉，其中辣椒產(chǎn)業(yè)是本鄉(xiāng)特色產(chǎn)業(yè)，種植面積5000多畝，年產(chǎn)辣椒1500多萬斤。其中泡辣椒300多萬斤，產(chǎn)品銷往全國各地，被譽(yù)為“海椒特色產(chǎn)業(yè)之鄉(xiāng)”。鄉(xiāng)境內(nèi)有兩家泡菜加工廠，主要加工泡海椒，可見辣椒的種植和加工成為了當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)民的主要收入來源，加強(qiáng)辣椒種植中的辣椒葉斑病病因分析與控制，對(duì)本鄉(xiāng)辣椒產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展具有重要的意義。

一、關(guān)于辣椒葉斑病的危害簡述

辣椒葉斑病主要危害成株，在辣椒結(jié)果期，處于高溫高濕條件下，該病的發(fā)生率顯著增加。病菌主要侵染辣椒葉片，有時(shí)危害果實(shí)。發(fā)病初期葉片上出現(xiàn)針尖大小的褪綠斑點(diǎn)，后逐漸擴(kuò)展形成褐色、不規(guī)則型病斑，嚴(yán)重時(shí)病葉變黃，提早脫落。果實(shí)受害，形成近圓形病斑，病斑略四陷，斑面生出致密的橄欖綠色霉?fàn)钗?，?yán)重影響果實(shí)的產(chǎn)量和品質(zhì)。尖抱枝孢常見腐生或弱寄生于植物的蓮葉上，少有報(bào)道其作為致病菌對(duì)植株進(jìn)行侵染造成病害。中國曾報(bào)道云南省由尖孢枝孢引致香蕉霉污病。

鑒于辣椒葉斑病為我國辣椒生產(chǎn)上的新發(fā)生病害，且國內(nèi)外均缺乏系統(tǒng)研究，明確其病原菌的遺傳分化等生理生化性質(zhì)具有十分重要的實(shí)用意義。本文選取采自夾江縣土門鄉(xiāng)辣椒病害標(biāo)樣對(duì)其進(jìn)行病原菌的分離鑒定，確認(rèn)其致病菌的以為深入研究病害、選育抗病品種、開展預(yù)測預(yù)報(bào)及病害的有效防治提供理論依據(jù)。

辣椒葉斑病菌侵染存在潛育期，這些潛在的病原菌難以觀測到，從而影響對(duì)病害發(fā)生的及時(shí)監(jiān)測，往往是在田間已經(jīng)見到病斑明顯顯癥時(shí)，才開始采取防治措施，但由于錯(cuò)過了病害防治的最佳時(shí)期，而造成人力物力的浪費(fèi)。尤其對(duì)于此類人們尚未完全了解和認(rèn)識(shí)的新見病害，如果能夠?qū)υ摬『M(jìn)行早期預(yù)測預(yù)報(bào)，在病害尚未表現(xiàn)出明顯癥狀時(shí)，即采取措施進(jìn)行有效防治，防患于未然，對(duì)減少辣椒葉斑病所造成的經(jīng)濟(jì)損失具有重要意義。

二、辣椒葉斑病的癥狀分析

辣椒葉斑病的致病菌為尖孢枝孢。對(duì)該病的癥狀進(jìn)行了描述，并對(duì)病菌的生物學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)測定：病菌菌絲生長以V8汁培養(yǎng)基為最適;能有效利用多種糖和氮源，分別以山梨醇和麥芽浸膏最佳;菌絲適宜生長溫度為20-25℃;最適pH6～8;光照可促進(jìn)菌絲生長;菌絲致死溫度為77℃。病菌分生孢子萌發(fā)適宜溫度為20-30℃;最適pH7;光照對(duì)孢子萌發(fā)無明顯的促進(jìn)作用;分生孢子致死溫度為48℃。初步探討了辣椒葉斑病的侵染循環(huán)試驗(yàn)研究結(jié)果表明，辣椒葉斑病菌尖孢枝孢以菌絲體在植株殘?bào)w上潛藏，隨病殘?bào)w殘落于土壤越冬，作為病害翌年危害的初侵染源。溫度和濕度是影響病害發(fā)生的最主要因素，病菌侵染植株的最適溫度為20-25℃，潛育期為7-8d;在適溫條件下，保濕時(shí)間越長，病害發(fā)病率越高。罹病辣椒葉片的顯微及超微觀察結(jié)果顯示，病菌以菌絲通過表皮和氣孔2種途徑侵入寄主組織;接種后8h，即可觀察到分生孢子萌發(fā)產(chǎn)生芽管，進(jìn)而形成菌絲，在葉片組織中穿行擴(kuò)展;老熟后的菌絲上產(chǎn)生分生孢子梗，其上產(chǎn)生大量產(chǎn)生分生孢子;分生孢子成熟后自然脫落，可經(jīng)多次再侵染反復(fù)循環(huán)傳播;病菌菌絲在寄主組織中不斷擴(kuò)展，導(dǎo)致受侵細(xì)胞被破壞，最終崩解。

三、辣椒葉斑病的侵染循環(huán)

溫度和濕度是影響病害發(fā)生的最主要因素，病菌侵染植株的最適溫度為。潛育期為在適溫條件下，保濕時(shí)間越長，病害發(fā)病率越高。罹病辣椒葉片的顯微及超微觀察結(jié)果顯示，病菌以菌絲通過表皮和氣孔種途徑侵入寄主組織;接種后即可觀察到分生孢子萌發(fā)產(chǎn)生芽管，進(jìn)而形成菌絲，在葉片組織中穿行擴(kuò)展;老熟后的茵絲上產(chǎn)生分生孢子梗，其上產(chǎn)生大量產(chǎn)生分生孢子;分生孢子成熟后自然脫落，可經(jīng)多次再侵染反復(fù)傳播;病菌菌絲在寄主組織中不斷擴(kuò)展，導(dǎo)致受侵細(xì)胞被破壞，最終崩解。

四、辣椒葉斑病菌的致病機(jī)理

病菌最佳產(chǎn)毒條件一般置于黑暗條件下，持續(xù)振蕩培養(yǎng)活體內(nèi)外辣椒葉斑病菌產(chǎn)生的細(xì)胞壁降解酶活性測定結(jié)果表明，病菌能產(chǎn)生果膠酶纖維素酶、葡萄糖苷酶，人工培養(yǎng)條件下，果膠酶活性明顯高于纖維素酶，是活體外病菌產(chǎn)生的主要細(xì)胞壁降解酶，辣椒葉片接種病菌后，果膠酶活性顯著提高，在接種后達(dá)到活性高峰，推測其在病菌致病過程中先起作用，而纖維素酶活性逐漸增強(qiáng)，推測其參與病菌在寄主組織內(nèi)的擴(kuò)展。

結(jié)語

總之，辣椒葉斑病是我國新報(bào)道發(fā)生病害，在保護(hù)辣椒生產(chǎn)中，病害發(fā)生面積及其危害呈上升趨勢。目前對(duì)于該病的發(fā)生危害、病原學(xué)、致病機(jī)理、病害發(fā)生規(guī)律乃至分子檢測等均缺乏系統(tǒng)的研究，制約著病害防治策略的制定及病害的防控，所以作為一線的農(nóng)業(yè)技術(shù)工作人員，必須結(jié)合實(shí)際，不斷總結(jié)研究，找到防控的辦法，促進(jìn)辣椒產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。