蚯蚓提取物對成華豬生長性能、血清生化指標(biāo)、抗氧化能力及免疫功能的影響

徐麒麟， 吳永勝， 朱佳文， 許禎瑩*， 邱 鐘，劉瀚揚， 陳亞迎， 雷春龍， 邱時秀， 李 娟

（1.成都市農(nóng)林科學(xué)院畜牧研究所，四川成都 611130；2.邛崍市嘉林生態(tài)農(nóng)場，四川成都 611130）

成華豬是四川省推廣數(shù)量較多、覆蓋地域較廣的地方優(yōu)良豬種，但由于其本身瘦肉率低，生長速度慢，加之外來品種的大規(guī)模引進和雜交利用，成華豬的規(guī)模逐漸減少，生產(chǎn)性能逐漸下降，優(yōu)良基因流失嚴(yán)重，成華豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展面臨巨大威脅（Shen 等，2016；羅成剛等，2012）。 積極開展成華豬保護與開發(fā)利用對充分發(fā)揮優(yōu)良地方品種資源優(yōu)勢具有重要意義。

蚯蚓俗稱地龍，具有活血化瘀、清熱定驚、平喘通絡(luò)、消炎止痛和抗腫瘤等多種功效，在傳統(tǒng)中醫(yī)上應(yīng)用廣泛（Luo 等，2018；Balamurugan，2007）。蚯蚓蛋白質(zhì)含量十分豐富，是一種優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)飼料，可以作為魚粉的替代品（邱時秀等，2012；王燕麗和李君榮，2012）。蚯蚓加工后的蚯蚓粉可以明顯提高動物的生產(chǎn)性能和免疫功能，增加經(jīng)濟效益（郭瑞萍等，2018；李娟等，2017）。蚯蚓提取物含有豐富的抗氧化酶、氨基酸、生物多糖等活性物質(zhì)，具有促生長、抗炎、抗氧化、抗病等多種功效（Goodarzi等，2016）。 因此，本試驗通過在日糧中添加不同濃度的蚯蚓提取物，研究其對成華豬生長性能、血清生化指標(biāo)、血清抗氧化及免疫功能的影響，為蚯蚓提取物在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 蚯蚓提取物由成都市農(nóng)林科學(xué)院畜牧研究所研制，蚯蚓為人工飼養(yǎng)的赤子愛勝蚓（Eisenia foetida）。經(jīng)檢測分析，所制備的蚯蚓提取物中氨基酸總量 （17種）5.42%、游離氨基酸2.97%、超氧化物歧化酶（SOD）1289 IU/mL、小肽6.95%、干物質(zhì)（DM）13.5%、粗蛋白質(zhì)（CP）7.35%、粗脂肪（EE）0.41%、粗灰分（Ash）2.14%、鈣（Ca）0.47%、磷（P）0.69%。

1.2 試驗設(shè)計及飼養(yǎng)管理 試驗于2017年9月至11月在四川省成都邛崍市嘉林生態(tài)農(nóng)場進行。選用胎次、體重[（45±1）kg]相近的 150 日齡成華豬公豬80頭，隨機分為4組，每組5個重復(fù)，每個重復(fù)4頭豬。采用單因素試驗設(shè)計，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別飼喂含 3、6、9 mL/kg蚯蚓提取物的基礎(chǔ)日糧。參照NRC（2012）豬的營養(yǎng)需要、豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 65-2004）及豬場的實際飼喂水平設(shè)計日糧配方（表1）。試驗豬為全封閉豬舍圈養(yǎng)，自由采食、飲水，其免疫、驅(qū)蟲、消毒和管理程序按豬場常規(guī)管理進行。預(yù)試期7 d，正試期70 d。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 指標(biāo)測定

1.3.1 生長性能 分別于試驗第1天、70天早晨進行個體空腹稱重。每天觀察豬群生長情況，記錄飼料消耗情況。根據(jù)記錄的采食量和體重計算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.3.2 血樣采集及指標(biāo)測定 正試期第70天，每個重復(fù)隨機選取2頭進行前腔靜脈空腹采血，室溫靜置1 h后，3000 r/min離心15 min，分離血清并置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

血清生化指標(biāo)：血清總蛋白（TP）、葡糖糖含量（GLU）均采用試劑盒檢測，試劑盒分別購自南京建成生物工程研究所和上海榮盛生物藥業(yè)有限公司。

血清氧化應(yīng)激指標(biāo)：乳酸脫氫酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）均采用豬ELISA試劑盒測定，試劑盒均購自北京奇松生物有限公司。

血清免疫指標(biāo)：血清補體C3、免疫球蛋白A（IgA）、白細胞介素-2（IL-2）、白細胞介素-6（IL-6）均采用豬ELISA試劑盒測定，試劑盒均購自北京奇松生物有限公司。

1.4 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)采用SAS 9.2統(tǒng)計分析軟件中的MEANS過程進行描述性統(tǒng)計分析，ANOVA過程進行方差分析和Duncan's多重比較，P＜0.05表示差異顯著，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 蚯蚓提取物對成華豬生長性能的影響 由表2可知，試驗Ⅱ組和Ⅲ組平均日增重較對照組分別提高 4.7%（P ＞ 0.05） 和 3.2%（P＞ 0.05），試驗Ⅱ組平均日采食量較對照組提高7.3%（P＞0.05），但4個組平均日增重和平均日采食量之間差異不顯著（P＞0.05）。試驗Ⅲ組料重比較對照組降低12.9%（P＜0.05），且顯著低于試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組（P ＜ 0.05）。

表2 蚯蚓提取物對成華豬生長性能的影響

2.2 蚯蚓提取物對成華豬血清生化指標(biāo)的影響由表3可知，試驗Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組血清總蛋白較對照組分別提高 17.2%（P ＜ 0.05）、23.2%（P ＜0.05）和6.1%（P＞0.05）。各試驗組血清葡萄糖與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 蚯蚓提取物對成華豬血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表4可知，隨著蚯蚓提取物濃度的升高，成華豬血清中乳酸脫氫酶的水平逐漸降低，與對照組相比，試驗Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組血清乳酸脫氫酶的水平分別降低了 54.6%（P ＜ 0.05）、77.6%（P ＜0.05）和80.0%（P＜0.05）。各試驗組血清超氧化物歧化酶和總抗氧化能力與對照組相比差異不顯著（P ＞ 0.05）。

表3 蚯蚓提取物對成華豬血清生化指標(biāo)的影響

表4 蚯蚓提取物對成華豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.4 蚯蚓提取物對成華豬血清免疫指標(biāo)的影響由表5可知，與對照組相比，各試驗組成華豬血清中補體C3和IgA水平均差異不顯著（P＞0.05）。試驗Ⅱ組血清中抗炎因子IL-2的水平與對照組相比升高了38.7%（P＜0.05），隨著蚯蚓提取物處理濃度的升高，成華豬血清中促炎因子IL-6的水平逐漸降低，其中，試驗Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組分別降低了 29.6%（P ＞ 0.05）、42.6%（P ＜ 0.05）和 46.8%（P ＜ 0.05）。

表5 蚯蚓提取物對成華豬血清免疫指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 蚯蚓提取物對成華豬生長性能的影響 豬日糧中添加蚯蚓提取物不但能夠顯著提高豬對飼料中礦物質(zhì)的消化吸收，而且還能降低豬的發(fā)病率和死亡率（羅紹奎等，2013）。陶延英（2007）研究發(fā)現(xiàn)，蚯蚓作為補料可提高斷奶小豬增重率65.1%。張泳楨（2016）研究發(fā)現(xiàn)，5%的蚯蚓粉代替日糧中部分豆粕豬平均日增重可提高14.61%，料重比降低12.51%。日糧中添加3%的蚯蚓粉，仔豬平均日增重可以提高11.43%，料重比降低11.44%（曾值虎，2013）。傅規(guī)玉（2006）研究發(fā)現(xiàn)，日糧中添加4%的蚯蚓粉，育肥豬的平均日增重提高13.1%，料重比降低22.5%。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，蚯蚓提取物組平均日增重和平均日采食量與對照組差異不顯著，這與李娟（2018）在伊莎雪佛黑雞上的研究結(jié)果相一致；但本試驗中9 mL/kg蚯蚓提取物組成華豬的料重比降低12.9%。綜上，推測蚯蚓提取物可能是提高了日糧利用率，但其分子機制尚需進一步研究。

3.2 蚯蚓提取物對成華豬血清生化指標(biāo)的影響血清生化指標(biāo)可以反映動物生理代謝水平。血清中的TP可反映動物機體本身營養(yǎng)狀況和對蛋白質(zhì)的消化利用情況，血清TP水平上升表明蛋白質(zhì)合成代謝增強，將促進蛋白質(zhì)沉積，從而提高增質(zhì)量效果（丁鵬等，2018；候海峰，2018）。 此外，血清TP含量同瘦肉率呈正相關(guān)，血清TP的升高有助于提高機體瘦肉率（孫耀貴和程佳，2013）。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，3、6 mL/kg和9 mL/kg蚯蚓提取物組血清總蛋白分別升高了17.2%、23.2%和6.1%，這與雷小文（2018）用蚯蚓液飼喂番鴨中所獲得的研究結(jié)果相一致，表明蚯蚓提取物可以提高成華豬體內(nèi)蛋白質(zhì)利用率。

3.3 蚯蚓提取物對成華豬血清抗氧化指標(biāo)的影響 血清LDH水平是反映動物機體遭受應(yīng)激程度的指標(biāo)之一，正常情況下，LDH主要存在于細胞質(zhì)中，機體組織細胞膜通透性增強，細胞內(nèi)的LDH才會進入血液（?，F(xiàn)琇等，2018）。 Li（2015）研究發(fā)現(xiàn)，蚯蚓提取物可以通過抑制LDH的釋放進而保護心肌細胞免受脂多糖誘導(dǎo)的細胞凋亡。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，3、6 mL/kg和9 mL/kg蚯蚓提取物組血清LDH的水平分別降低了54.6%、77.6%和80.0%（P＜0.05），表明日糧中添加蚯蚓提取物能夠提高成華豬的抗氧化功能。

3.4 蚯蚓提取物對成華豬血清免疫指標(biāo)的影響IL-2是由活化的T淋巴細胞產(chǎn)生，又叫T細胞生長因子，能夠促進T淋巴細胞分泌TNF-α等其他細胞因子，促進T、B淋巴細胞的增殖與分化，增強機體的細胞免疫和體液免疫應(yīng)答，具有廣譜的免疫增強活性（王留，2018；Xu 等，2018；鄒云等，2014）。IL-6是一種重要的促炎因子，其可反映機體損傷的程度 （蘇家宜等，2017；荀文娟等，2016）。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，6 mL/kg蚯蚓提取物組血清中抗炎因子IL-2的水平與對照組相比升高了 38.7%（P ＜ 0.05），6 mL/kg和 9 mL/kg蚯蚓提取物組促炎因子IL-6的水平與對照組相比分別降低了42.6%和46.8%（P＜0.05），表明蚯蚓提取物可通過影響炎癥因子的表達進而提高動物的免疫功能。

4 結(jié)論

日糧中添加蚯蚓提取物可以降低成華豬的料重比，提高蛋白質(zhì)的利用率。蚯蚓提取物可以降低血清中LDH水平；提高抗炎因子IL-2的水平并同時降低促炎因子IL-6的水平。在本試驗條件下，蚯蚓提取物以9 mL/kg添加量最適宜。