飼糧碘添加水平對獺兔氮代謝、血液成分及內(nèi)臟器官發(fā)育的影響

張 偉， 申 壘， 劉公言， 張 斌， 楊國雨， 李 淑， 陳曉陽， 李福昌*

（1.濟寧職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山東濟寧 272000；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，山東省動物生物工程與疾病防治重點實驗室，山東泰安271018）

碘是動物機體營養(yǎng)代謝、生長發(fā)育及繁衍后代所必需的微量元素（楊正，1998）。碘在動物體內(nèi)主要用于合成甲狀腺素，而甲狀腺素是機體內(nèi)具有生物活性的碘化合物。飼料中缺碘會導(dǎo)致家兔皮膚增厚，毛發(fā)失去光澤，周身被毛纖維化，影響動物生長發(fā)育（孫全文，2005）。然而，動物食入過量碘不僅會增加飼養(yǎng)成本，導(dǎo)致機體中毒，而且會導(dǎo)致排泄量增加造成環(huán)境污染。朱衛(wèi)華和余紅梅（2000）報道，母豬缺碘會造成預(yù)產(chǎn)期推遲，所產(chǎn)仔豬體質(zhì)極弱，全身無毛或少毛，有的產(chǎn)后1～3 d內(nèi)死亡，并伴有全身皮膚水腫。奚剛等（2000）報道，在飼糧中添加0.15 mg/kg的碘可以預(yù)防母豬出現(xiàn)碘缺乏癥。 近年來，關(guān)于豬、雞、牛等畜禽對碘需要量的研究以及用鼠來研究缺碘和高碘引起的甲狀腺腫大發(fā)病機理的報道較多，但有關(guān)家兔對碘需要量的研究鮮見報道。現(xiàn)有的家兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)中，碘的需要量差異也很大。本試驗通過研究飼糧添加不同水平碘對獺兔氮代謝、血液成分及內(nèi)臟器官發(fā)育的影響，探討獺兔適宜的碘添加水平，為我國獺兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的制定提供合理的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼糧 基礎(chǔ)飼糧參照美國NRC（1977）、De Blas和 Mateos（1998）的生長兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制而成，其原料組成及營養(yǎng)水平見表1。分別在基礎(chǔ)飼糧中以碘化鉀的形式添加碘，其添加水平分別為 0、0.2、0.4、0.8、1.6 mg/kg， 制成碘實測水平為0.13、0.32、0.51、0.92、1.70 mg/kg 的 5 種 試 驗 飼糧，并用制粒機將飼糧壓制成直徑約4～6 mm的顆粒飼料，在通風(fēng)干燥避光處儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗動物分組與飼養(yǎng)管理 本試驗選取體重相近 [（1759.3±100）]g的 3月齡健康狀況良好的生長獺兔200只，公母各占1/2，按性別和體重隨機分為5組，每組40個重復(fù)，每個重復(fù)1只試驗兔，分別飼喂碘添加水平不同的5種飼糧。試驗兔單籠飼養(yǎng)，試驗期間早、晚各飼喂1次。試驗前對兔舍進(jìn)行徹底清洗和消毒，試驗期間自然采光和通風(fēng)，自由采食和飲水，每周帶兔消毒兔舍1次。預(yù)試期7 d，正試期53 d。

飼養(yǎng)試驗結(jié)束前7 d，每組選取和該組平均體重相近的8只試兔，轉(zhuǎn)移到經(jīng)消毒處理的代謝籠內(nèi)，同樣進(jìn)行單籠飼養(yǎng)，并飼喂相應(yīng)的試驗飼糧。在代謝籠中經(jīng)3 d調(diào)整適應(yīng)后連續(xù)4 d收集每只試兔全天的糞樣和尿樣，同時記錄每只試兔每天的采食量、排糞量和排尿量。鮮糞稱重后，一部分加10%的硫酸固氮，-20℃保存，用于糞氮含量測定。另一部分直接放在烘箱中65℃連續(xù)烘72 h后置于室溫回潮24 h，稱重即為糞樣的風(fēng)干重量，最后將4 d的風(fēng)干糞樣混合粉碎用于氨基酸含量測定。尿樣量取體積后，取一定比例放入250 mL塑料瓶中，同時加入5 mL濃硫酸固氮，最后將4 d尿樣混勻4℃保存用于尿氮檢測。

試驗結(jié)束當(dāng)天清晨空腹，稱重，心臟采血10 mL，置于采血管中，室溫避光靜置15 min后，3000 r/min離心10 min，分離所得血漿，置于-20℃下冷凍保存用于血液指標(biāo)測定。試兔采血后屠宰，用于測定內(nèi)臟器官發(fā)育及脂肪沉積指標(biāo)。

1.3 測定指標(biāo)和方法

1.3.1 氮代謝指標(biāo) 飼料、糞和尿樣中氮含量采用凱氏定氮原理進(jìn)行測定，樣品測定方法根據(jù)GB/T 6432-2018飼料中粗蛋白質(zhì)的測定—凱氏定氮法進(jìn)行，氮代謝指標(biāo)計算公式如下：

可消化氮/（g/d）=食入氮-糞氮；

沉積氮/（g/d）=食入氮-糞氮-尿氮；

氮表觀消化率/%=可消化氮/食入氮×100；

氮利用率/%=沉積氮/食入氮×100；

氮生物學(xué)效價/%=沉積氮/可消化氮×100。

1.3.2 血液指標(biāo)測定 血漿中促甲狀腺激素（TSH）、甲狀腺素（T4）、游離甲狀腺素（FT4）、三碘甲狀腺原氨酸 （T3）和游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）采用酶聯(lián)免疫試劑盒測定（上海朗頓生物科技有限公司）。

1.3.3 內(nèi)臟器官發(fā)育及脂肪沉積指標(biāo) 試驗兔空腹12 h后稱重即為宰前活體重。屠宰后，對試驗兔的肩部脂肪、腎周脂肪、胃周脂肪小心剝離，進(jìn)行稱重，計算各部位脂肪占宰前活體重的比例。同時小心剝離試驗兔的肝臟、脾臟、胸腺、甲狀腺，進(jìn)行稱重，并根據(jù)以下公式計算肝臟、脾臟、胸腺、甲狀腺指數(shù)。

肝臟指數(shù)/（g/kg）=肝臟重/宰前活重；

脾臟指數(shù)/（g/kg）=脾臟重/宰前活重；

胸腺指數(shù)（g/kg）=胸腺重/宰前活重。

1.4 數(shù)據(jù)處理 用SAS 9.1.3統(tǒng)計軟件 （SAS Inst，Inc，Cary，NC，USA）中的 GLM 進(jìn)行數(shù)據(jù)的方差分析，用Duncan氏法進(jìn)行數(shù)據(jù)的多重比較，結(jié)果以“平均值和均方根誤差”表示，P＜0.05為差異顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧碘添加水平對獺兔氮代謝的影響 由表2可以看出，獺兔飼糧中不同碘添加水平對食入氮和沉積氮有顯著影響（P＜0.05），并在添加水平為0.8 mg/kg時達(dá)到最大值；對糞中和尿中氮含量、可消化氮、氮表觀消化率和氮利用率無顯著影響（P ＞ 0.05）。

2.2 飼糧碘添加水平對獺兔血液指標(biāo)的影響由表3可以看出，獺兔飼糧不同碘添加水平對血漿中 TSH、T4、FT4和 T3含量的影響顯著 （P＜0.05），并分別在添加水平為 0.4、0.8、0.8 mg/kg 和0.8 mg/kg時達(dá)到最大值，且最大值分別為0.25 mIU、15.76 μg/L、5.65 μg/L、0.71 μg/L。飼糧不同碘添加水平對獺兔血漿中FT3影響不顯著（P＞0.05）。

2.3 飼糧碘添加水平對獺兔內(nèi)臟器官發(fā)育的影響 由表4可以看出，獺兔飼糧不同碘添加水平對獺兔胸腺指數(shù)、肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和甲狀腺指數(shù)均無顯著影響（P＞0.05）。

表4 飼糧碘水平對獺兔內(nèi)臟器官發(fā)育的影響（n=8）g/kg

2.4 飼糧碘添加水平對獺兔脂肪沉積的影響由表5可以看出，獺兔飼糧碘不同添加水平對獺兔肩部脂肪率、腎周脂肪率和胃周脂肪率沒有顯著影響（P＞0.05），其中腎周脂肪率隨碘添加水平增加呈先上升后下降的趨勢，并在添加水平為0.8mg/kg時達(dá)到最大值。

表5 飼糧碘添加水平對獺兔脂肪沉積的影響（n=8）

3 討論

動物的生長發(fā)育與體內(nèi)氮代謝有密切的關(guān)系。獺兔飼糧中的含氮物質(zhì)經(jīng)獺兔及獺兔盲腸內(nèi)的微生物的消化吸收以后，一部分用于合成獺兔體內(nèi)的蛋白質(zhì)供機體利用，另一部分隨糞便、尿液和汗液排出體外。這一系列代謝活動構(gòu)成了家兔的氮平衡，即為家兔的氮代謝（Ahmed和Ashour，1984）。本試驗發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加不同水平碘有利于獺兔體內(nèi)氮沉積，并且當(dāng)獺兔飼糧中碘水平為0.8 mg/kg時，沉積率達(dá)到最高。

甲狀腺是動物體極為重要的內(nèi)分泌器官，甲狀腺通過甲狀腺激素控制機體能量代謝、蛋白質(zhì)的合成及調(diào)節(jié)機體對各種激素的敏感性。碘經(jīng)過消化道吸收進(jìn)入血液，大約有65%被甲狀腺攝取后在甲狀腺過氧化物酶（TPO）作用下，氧化為碘，與甲狀腺球蛋白結(jié)合（TG）形成一碘甲狀腺原氨酸（MIT）和二碘甲狀腺原氨酸（DIT），然后在過氧化物酶作用下耦聯(lián)為四碘甲狀腺原氨酸 （T4）和三碘甲狀腺原氨酸 （T3），貯存于甲狀腺泡中（Fukuda等，1975）。垂體釋放促甲狀腺素增加時，甲狀腺釋放甲狀腺素（T3、T4）進(jìn)入血液，運送到動物體各個器官組織，經(jīng)脫碘酶作用后，T4轉(zhuǎn)變?yōu)門3，碘重新被釋放，經(jīng)循環(huán)被重復(fù)利用（李利和王角立，1996）。在本研究中，隨獺兔飼糧中碘添加水平的增大，獺兔血漿中TSH、T4、FT4和T3含量先增加后降低，并分別在 0.4、0.8、0.8 mg/kg和0.8 mg/kg時達(dá)到最大值，且最大值分別為0.25 mIU和 15.76 μg/L、5.65 μg/L、0.71 μg/L。

脾臟和胸腺是動物體重要的免疫器官，胸腺的主要作用是誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的分化和分泌胸腺激素，主要參與細(xì)胞免疫。脾臟是動物體最大的外周淋巴器官，含有大量免疫細(xì)胞，是免疫應(yīng)答的主要場所。脾臟和胸腺指數(shù)在一定程度上反映了機體免疫功能的強弱。肝臟是動物體重要的多功能器官，以代謝功能為主，參與去氧化、儲存肝糖原以及合成分泌性蛋白。本試驗發(fā)現(xiàn)，飼糧不同碘添加水平對獺兔胸腺指數(shù)、肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、腎臟指數(shù)和甲狀腺指數(shù)沒有影響，由此推測在本試驗飼糧中碘的最大添加量為1.6 mg/kg依然是安全的。

脂肪組織是一種代謝和內(nèi)分泌器官，在機體的能量代謝中發(fā)揮重要功能。動物攝入的能量超出機體所需要的能量時，動物體就會把多余的能量以脂肪的形式儲存在體內(nèi)，當(dāng)動物體攝入的能量不能滿足機體的需要時，動物體就會啟動脂解模式，分解體內(nèi)貯存的脂肪來供能 （周順伍，1999）。動物的脂肪組織分為棕色脂肪和白色脂肪兩大類，棕色脂肪主要分布于肩胛處，與毛細(xì)血管直接接觸，受交感神經(jīng)末梢支配，主要負(fù)責(zé)機體產(chǎn)熱，對調(diào)節(jié)動物體溫起重要作用。白色脂肪細(xì)胞主要分布于胃周和腎周，對組織器官起襯托和保護作用，兩者共同維護體內(nèi)能量代謝穩(wěn)態(tài)（葉祖承和蔡益鵬，1994）。本試驗結(jié)果表明，飼糧不同碘添加水平對獺兔肩部脂肪率、腎周脂肪率和胃周脂肪率沒有顯著影響，因此，推測獺兔飼糧不同碘添加水平對脂肪沉積沒有影響。

4 結(jié)論

綜合本試驗測定指標(biāo)，3～5月齡生長獺兔飼糧碘的適宜添加量為0.8 mg/kg（飼糧中碘的實測值為 0.92 mg/kg）。