殺蟲(chóng)劑對(duì)新入侵海南草地貪夜蛾種群幼蟲(chóng)的毒力

金濤 林玉英 馬光昌 馬子龍 向凱萍 易克賢 彭正強(qiáng)

摘 ?要 ?草地貪夜蛾是2019年1月新入侵我國(guó)云南的重大農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，4月首次在海口玉米田中剝查發(fā)現(xiàn)該蟲(chóng)。草地貪夜蛾嚴(yán)重威脅到海南本地的鮮玉米生產(chǎn)，篩選出具有較高毒力水平的化學(xué)藥劑防治該蟲(chóng)迫在眉睫。本文采用浸葉法測(cè)定了15種殺蟲(chóng)劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的毒力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用較低濃度的甲維鹽（5 mg/L，24 h）和多殺菌素（5 mg/L，24 h），以及較高濃度氯蟲(chóng)苯甲酰胺（50 mg/L，72 h）和辛硫磷（100 mg/L，72 h）時(shí)，對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的致死率達(dá)100%，這4種殺蟲(chóng)劑在24 h的LC50分別為0.28、0.31、9.77和11.7 mg/L;其他種類(lèi)殺蟲(chóng)劑如滅多威、吡丙醚、氟蟲(chóng)腈、啶蟲(chóng)脒、阿維菌素、高效氯氰菊酯和虱螨脲，在100 mg/L濃度水平下，72 h對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的校正死亡率分別為100%、96.67%、88.33%、86.11%、81.67%、80.83%和80.09%。表明了可選用甲維鹽、多殺菌素、氯蟲(chóng)苯甲酰胺和辛硫磷作為主要成分的殺蟲(chóng)劑，并組合其他種類(lèi)殺蟲(chóng)劑，作為當(dāng)前防治草地貪夜蛾幼蟲(chóng)主要防治藥劑。

關(guān)鍵詞 ?草地貪夜蛾;殺蟲(chóng)劑;毒力測(cè)定;浸葉法

中圖分類(lèi)號(hào) ?Q968.1 ?????文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 ?A

Abstract ?The fall armyworm， Spodoptera frugiperda， first invaded Yunnan， China， in January 2019， is a notorious agricultural pest insects. It was first founded on maize in Haikou city in April， and poses a serious threat to the production of fresh eating maize. It is urgent to screen out high toxicity insecticides for controlling this pest. By leaf dipping method， the toxicities of 15 insecticides to larvae of S. frugiperda were tested under laboratory conditions. The results showed that at the relative lower concentration of emamectin benzoate （5 mg/L， 24 h） and spinosad （5 mg/L， 24 h）， and relative higher concentration of chlorantraniliprole （50 mg/L， 72 h） and phoxim （100 mg/L， 72 h） have 100% contact toxicity to larvae of S. frugiperda. Their 50% lethal concentration （LC50） at 24 h is 0.28， 0.31， 9.77 and 11.7 mg/L， respectively. Other insecticides such as methomy， pyriproxyfen， fipronil， acetamiprid， abamectin， beta-cypermethrin and lufenuron， at concentration of 100 mg/L with 72 h， have 100%， 96.67%， 88.33%， 86.11%， 81.67%， 80.83%， and 80.09% contact toxicity to larvae of S. frugiperda. It recommended to use emamectin benzoate， spinosad， chlorantraniliprole， and phoxim as the main ingredients， as well as combined with other above mentioned insecticides， for controlling of larvae of S. frugiperda.

Keywords ?Spodoptera frugiperda; insecticide; toxicity bioassay; leaf dipping method

DOI ?10.3969/j.issn.1000-2561.2019.08.017

草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda，俗稱(chēng)秋黏蟲(chóng)（fall armyworm），屬于鱗翅目夜蛾科灰翅夜蛾屬，原產(chǎn)于美洲熱帶和亞熱帶地區(qū)，是一種嚴(yán)重威脅農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重大危險(xiǎn)性遷飛害蟲(chóng)。該蟲(chóng)按寄主偏好可分為“玉米型”和“水稻型”，“玉米型”偏好玉米、高粱和棉花等，“水稻型”偏好水稻等，目前入侵我國(guó)的主要為“玉米型”，其寄主廣泛，包括玉米、甜玉米、甘蔗、高粱等將近200多種作物[1-2]。2016年1月，因商貿(mào)貨運(yùn)將在美洲大陸棲居的草地貪夜蛾帶入了非洲西海岸的尼日利亞，隨后僅用了2年時(shí)間就席卷了撒哈拉以南44個(gè)國(guó)家和地區(qū)，對(duì)非洲糧食安全造成了極大的影響[2-4]。2018年7月以來(lái)，草地貪夜蛾跨海遷入也門(mén)和印度[5]，爾后一路東遷，2019年1月11日在我國(guó)云南省普洱市江城縣，首次發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾為害玉米[6]。截至6月，已擴(kuò)散到18個(gè)省、區(qū)、市，并呈繼續(xù)北遷趨勢(shì)，防控形勢(shì)嚴(yán)峻。在海南地區(qū)，于2019年4月30日首次在海口市秀英區(qū)石山鎮(zhèn)石巖村玉米田中首次發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)，至5月15日，海南省18個(gè)市、縣，44個(gè)鎮(zhèn)，108個(gè)村，2個(gè)社區(qū)和1個(gè)國(guó)營(yíng)農(nóng)場(chǎng)發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾為害，累計(jì)發(fā)生面積47.79 hm2（海南省植?？傉窘y(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)），對(duì)當(dāng)前的鮮玉米及糧食生產(chǎn)安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

采用化學(xué)殺蟲(chóng)劑滅除農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，具有高效、速效和使用方便的特點(diǎn)[7]，是滅除暴發(fā)性尤其是突發(fā)性入侵害蟲(chóng)應(yīng)急防控的重要手段[8-9]。草地貪夜蛾長(zhǎng)期發(fā)生于美洲地區(qū)，其化學(xué)農(nóng)藥防治應(yīng)用已有數(shù)十年的歷史，加上2016年遷入非洲和亞洲以后，各國(guó)和各地區(qū)長(zhǎng)期且不同類(lèi)型的化學(xué)農(nóng)藥大量使用，必然使該蟲(chóng)產(chǎn)生不同程度的抗藥性。這種使害蟲(chóng)產(chǎn)生的抗藥性遺傳特征，隨著遷飛習(xí)性會(huì)將抗性基因在較大區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)散，從而可能產(chǎn)生區(qū)域性對(duì)殺蟲(chóng)劑的抗性問(wèn)題[10]。因此，盡早地了解該蟲(chóng)遷入海南的種群對(duì)殺蟲(chóng)劑敏感性水平，對(duì)指導(dǎo)遷入?yún)^(qū)應(yīng)急防控工作有重要意義。鑒于此，本文選用了市面上15種殺蟲(chóng)劑原藥，對(duì)該蟲(chóng)的毒殺水平進(jìn)行了初步篩選，并對(duì)具有高毒力殺蟲(chóng)劑的毒力水平進(jìn)行了測(cè)定。旨在了解草地貪夜蛾在初入侵海南時(shí)種群的殺蟲(chóng)劑敏感性水平，同時(shí)為合理地選擇高效殺蟲(chóng)劑實(shí)施防治，以及制定科學(xué)有效地應(yīng)急防控措施提供科學(xué)依據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

于2019年5月5日至5月16日，采集海南省海口市美安鎮(zhèn)玉米地的高齡幼蟲(chóng)，帶回中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所的隔離檢疫室內(nèi)，使用玉米葉單個(gè)隔離飼養(yǎng)，羽化后轉(zhuǎn)入到含玉米苗的飼養(yǎng)籠中，以其孵化后的子代使用玉米嫩葉飼養(yǎng)至2齡幼蟲(chóng)作為實(shí)驗(yàn)蟲(chóng)源。飼養(yǎng)和測(cè)試環(huán)境：溫度為26～28 ℃，光照周期為16 h光照︰8 h黑暗，相對(duì)濕度為75%～85%。

共選用15種殺蟲(chóng)劑原藥：97%多殺菌素、92%辛硫磷、90%敵百蟲(chóng)、95%高效氯氰菊酯、96.5%吡蟲(chóng)啉、97.4%滅多威和98.1%殺螟丹，由江蘇南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司提供;96.4%氯蟲(chóng)苯甲酰胺、98%阿維菌素、72%甲維鹽、98%氟蟲(chóng)腈和96.9%功夫菊酯原粉由廣東立威化工有限公司提供;97%吡丙醚由浙江禾本科技有限公司提供;97%虱螨脲由石家莊瑞凱化工有限公司提供;97.3%啶蟲(chóng)脒由海南正業(yè)中農(nóng)高科股份有限公司提供。除氯蟲(chóng)苯甲酰胺使用二甲基甲酰胺和丙酮混合液配置母液，以及殺螟丹使用水和丙酮混合液配置母液外，其他原藥均使用丙酮將藥劑配制成母液，為防止丙酮揮發(fā)，在瓶口使用封口膠密封保存。

1.2 ?方法

1.2.1 殺蟲(chóng)劑預(yù)篩選和生物測(cè)定 ?采用浸葉法，將殺蟲(chóng)劑原藥母液使用丙酮-雙蒸水（9︰1）藥液稀釋為100、50、10、5 mg/L，將藥液倒入玻璃管中。取幼嫩的玉米心葉，剪成6～8 cm葉段，浸漬藥液中漂洗5 s后取出，室內(nèi)環(huán)境晾干后置于直徑9 cm培養(yǎng)皿中。挑選個(gè)體行為活潑、體表圓潤(rùn)的草地貪夜蛾2齡幼蟲(chóng)10～12頭，投入到培養(yǎng)皿中。對(duì)照組使用丙酮-雙蒸水（9︰1）的處理液浸漬。每組處理重復(fù)4次。在24、48、72 h時(shí)記錄害蟲(chóng)的死亡率。判斷死亡試蟲(chóng)的標(biāo)準(zhǔn)：剝離出葉片中試蟲(chóng)，使用毛筆尖輕觸蟲(chóng)體，5 s內(nèi)軀體和附足不動(dòng)者視為死亡。對(duì)照組死亡率在10%以下為有效實(shí)驗(yàn)。

生物測(cè)定方法，選取初步篩選出的較強(qiáng)毒力的殺蟲(chóng)劑，同樣使用丙酮-雙蒸水（9︰1）藥液稀釋原藥母液5～6個(gè)濃度，對(duì)照組使用丙酮-雙蒸水（9︰1）處理液浸漬處理。每組處理重復(fù)3次。采用上述浸葉法，并在24 h時(shí)記錄害蟲(chóng)的死亡率。判斷死亡試蟲(chóng)的標(biāo)準(zhǔn)如上。

1.2.2 ?毒力計(jì)算方法 ?以試蟲(chóng)對(duì)低濃度殺蟲(chóng)劑在24 h時(shí)表現(xiàn)出的較高死亡率，作為優(yōu)選的高效殺蟲(chóng)劑種類(lèi)，并進(jìn)行毒力測(cè)定。應(yīng)用SPSS軟件數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)[11]和Excel表格分析軟件[12]，計(jì)算出的致死中濃度（lethal concentration 50，LC50）及其95%置信限，卡方值及相關(guān)系數(shù)（r）等相關(guān)參數(shù)，以LC50的95%置信限是否有重疊，作為判斷不同藥劑毒力水平差異是否顯著的標(biāo)準(zhǔn)。相關(guān)計(jì)算公式如下：

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?不同濃度和作用時(shí)間下的殺蟲(chóng)劑初步篩選

15種殺蟲(chóng)劑對(duì)草地貪夜蛾的篩選結(jié)果如表1所示。不同種類(lèi)的供試藥劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的觸殺活性有較大差異，且發(fā)現(xiàn)大多數(shù)殺蟲(chóng)劑原藥對(duì)草地貪夜蛾具有明顯的殺蟲(chóng)活性。接觸藥劑處理后，隨著處理濃度增加或處理時(shí)間的延長(zhǎng)，其幼蟲(chóng)校正死亡率總體上呈上升趨勢(shì)。其中，5 mg/L甲維鹽和多殺菌素可在24 h內(nèi)對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的致死率達(dá)到100%;較高濃度的50 mg/L氯蟲(chóng)苯甲酰胺和100 mg/L辛硫磷也可在72 h內(nèi)對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的致死率達(dá)到100%，表明了甲維鹽、多殺菌素、氯蟲(chóng)苯甲酰胺和辛硫磷對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)具有顯著的致死作用。滅多威和吡丙醚的毒力水平次之，兩者在100 mg/L濃度水平下，吡丙醚和滅多威在72 h的校正死亡率為100%和96.67%，表明了這2種殺蟲(chóng)劑具有潛在的殺蟲(chóng)效果。其他種類(lèi)殺蟲(chóng)劑如氟蟲(chóng)腈、啶蟲(chóng)脒、阿維菌素、高效氯氰菊酯和虱螨脲，在100 mg/L濃度水平下，在72 h的校正死亡率均超過(guò)80%，分別為88.33%、86.11%、81.67%、80.83%和80.09%，表明了這些殺蟲(chóng)劑具有一定的殺蟲(chóng)效果。而其他種類(lèi)殺蟲(chóng)劑如殺螟丹、敵百蟲(chóng)和功夫菊酯在以上濃度下，并無(wú)顯著短時(shí)毒力作用，表明這些種類(lèi)的殺蟲(chóng)劑并不適合用于防治草地貪夜蛾。因此，本實(shí)驗(yàn)毒力作用較強(qiáng)的甲維鹽、多殺菌素、氯蟲(chóng)苯甲酰胺和辛硫磷，進(jìn)一步明確這4種殺蟲(chóng)劑對(duì)草地貪夜蛾的毒力水平。

2.2 ?殺蟲(chóng)劑對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)的毒力

草地貪夜蛾幼蟲(chóng)對(duì)甲維鹽、多殺菌素、氯蟲(chóng)苯甲酰胺和辛硫磷4種不同類(lèi)型殺蟲(chóng)劑的毒力水平如表2所示?？股仡?lèi)殺蟲(chóng)劑甲維鹽與多殺菌素對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)毒力水平不存在顯著差異，其LC50和LC90相對(duì)較低，LC50分別為0.28、0.31?mg/L，LC90分別為3.32、3.12 mg/L，而氯蟲(chóng)苯甲酰胺和辛硫磷對(duì)草地貪夜蛾幼蟲(chóng)毒力水平也不存顯著差異，LC50分別為9.77、11.7 mg/L，LC90分別為61.81、9.56 mg/L，但與抗生素類(lèi)殺蟲(chóng)劑甲維鹽和多殺菌素的毒力水平存在顯著差異。這些結(jié)果表明了甲維鹽和多殺菌素對(duì)草地貪夜蛾的毒力作用最高，且氯蟲(chóng)苯甲酰胺和辛硫磷也具有明顯的毒力作用。

草地貪夜蛾作為新入侵我國(guó)并廣泛大面積爆發(fā)成災(zāi)的危險(xiǎn)性害蟲(chóng)，施用化學(xué)殺蟲(chóng)劑是當(dāng)前壓低蟲(chóng)口基數(shù)，減少遷出蟲(chóng)源的主要方法。美州地區(qū)從20世紀(jì)30年代開(kāi)始，使用了多種類(lèi)型如甲胺磷、敵敵畏等高毒類(lèi)殺蟲(chóng)劑防治草地貪夜蛾幼蟲(chóng)。20世紀(jì)90年代以來(lái)，隨著環(huán)保意識(shí)增強(qiáng)、害蟲(chóng)抗藥性的產(chǎn)生和新型殺蟲(chóng)劑種類(lèi)的推出，多種類(lèi)型的殺蟲(chóng)劑如多殺菌素、溴蟲(chóng)腈、殺蟲(chóng)隆、滅多威、氟蟲(chóng)酰胺、乙基多殺菌素、氯蟲(chóng)苯甲酰胺、茚蟲(chóng)威、毒死蜱、氯氟氰菊酯、虱螨脲，被廣泛地用于防治草地貪夜蛾[13-14]。2016年入侵非洲以后，非洲多數(shù)國(guó)家推行用藥滅多威、氟氯氰菊酯、甲基對(duì)硫磷和硫丹等殺蟲(chóng)劑作為防治草地

貪夜蛾的主要防治品種，但仍有大多數(shù)市場(chǎng)上流行商品藥劑用于防治該蟲(chóng)[3]。該蟲(chóng)入侵我國(guó)后，測(cè)試了21種商品制劑殺蟲(chóng)劑對(duì)草地貪夜蛾云南地區(qū)種群的防治效果顯示，20%甲氰菊酯EC、15%唑蟲(chóng)酰胺SC、25 g/L溴氰菊酯EC、25 g/L高效氯氟氰菊酯EC和20%呋蟲(chóng)胺SC對(duì)草地貪夜蛾卵具有較高的毒殺活性，校正孵化抑制率可達(dá)80%以上。1%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽EC、5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽ME、5%啶蟲(chóng)脒EC、75%乙酰甲胺磷SP、6%乙基多殺菌素SC和20%甲氰菊酯EC對(duì)草地貪夜蛾2齡幼蟲(chóng)具有較強(qiáng)的毒殺作用，校正死亡率超過(guò)90%[15]。本文以15種殺蟲(chóng)劑原藥，比較不同殺蟲(chóng)劑對(duì)草地貪夜蛾2齡幼蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性，發(fā)現(xiàn)甲維鹽、多殺菌素、氯蟲(chóng)苯甲

酰胺和辛硫磷在較低濃度下，具有明顯的毒殺作用;吡丙醚、滅多威、氟蟲(chóng)腈、啶蟲(chóng)脒、阿維菌素、高效氯氰菊酯和虱螨脲等殺蟲(chóng)劑在72 h的校正死亡率均超過(guò)80%，也具有一定的殺蟲(chóng)效果，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與當(dāng)前文獻(xiàn)記載的測(cè)定殺蟲(chóng)劑防治水平基本一致。

選用適當(dāng)?shù)南x(chóng)齡作為試蟲(chóng)開(kāi)展殺蟲(chóng)劑的毒力測(cè)定，是準(zhǔn)確評(píng)價(jià)不同種類(lèi)殺蟲(chóng)劑防治效果的關(guān)鍵。初孵的草地貪夜蛾幼蟲(chóng)主要在玉米葉片的背面取食葉面為害，進(jìn)入3齡后，可以咬破葉面和莖稈，進(jìn)入玉米心葉的喇叭口或莖稈，潛入內(nèi)部組織為害。而田間采用常規(guī)噴霧的方式，藥劑難以到達(dá)害蟲(chóng)位置，因此3齡前的低齡草地貪夜蛾幼蟲(chóng)是化學(xué)藥劑防治的主要目標(biāo)。本文選用2齡幼蟲(chóng)作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，具有較強(qiáng)的現(xiàn)實(shí)意義。同時(shí)，在施藥時(shí)，要把握草地貪夜蛾1～3齡的最佳用藥窗口期，選擇在清晨或傍晚，對(duì)12葉期前的苗期玉米采用點(diǎn)噴心葉的方法施藥，而對(duì)于結(jié)穗期的玉米主要在玉米棒穗頭點(diǎn)噴，達(dá)到最佳的防治效果。

甲維鹽和多殺菌素作為一類(lèi)生物抗生素類(lèi)型的殺蟲(chóng)劑，通過(guò)抑制害蟲(chóng)神經(jīng)傳導(dǎo)作用而導(dǎo)致害蟲(chóng)死亡，具有高效低毒等特點(diǎn)[16-17]，本研究發(fā)現(xiàn)了這2種殺蟲(chóng)劑在較低濃度下，在短時(shí)間內(nèi)對(duì)草地貪夜蛾具有較強(qiáng)的致死作用。氯蟲(chóng)苯甲酰胺作為一種新型二酰胺類(lèi)殺蟲(chóng)劑，能高效激活昆蟲(chóng)魚(yú)尼丁受體，對(duì)鱗翅目幼蟲(chóng)具有顯著的防治效果[18-19]，辛硫磷是一種廣譜性高效、低毒、無(wú)殘毒的有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑，在我國(guó)具有較長(zhǎng)時(shí)間的使用歷史，曾被廣泛應(yīng)用于防治各類(lèi)螟蟲(chóng)[20-21]，但噴施辛硫磷過(guò)量可致玉米葉片局部或大部分變白，尤其是和除草劑混合使用時(shí)會(huì)產(chǎn)生一些藥害現(xiàn)象[22]，應(yīng)當(dāng)予以嚴(yán)格控制使用劑量和慎重施用方法使用。雖然滅多威也表現(xiàn)出一定的殺蟲(chóng)效果，但因?yàn)槎拘暂^高等原因，在2011年6月15日農(nóng)業(yè)部1586號(hào)公告上，撤銷(xiāo)了滅多威在柑橘、蘋(píng)果、茶樹(shù)、十字花科蔬菜上的登記使用。因此，推薦甲維鹽、多殺菌素、氯蟲(chóng)苯甲酰胺和辛硫磷等作為主要成分的殺蟲(chóng)劑，并組合其他種類(lèi)藥劑如吡丙醚、氟蟲(chóng)腈、啶蟲(chóng)脒、阿維菌素、高效氯氰菊酯和虱螨脲等組成的復(fù)配劑，作為當(dāng)前應(yīng)急防控草地貪夜蛾藥劑。

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