無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)篩查胎兒性染色體異常的臨床意義探究

徐燕　袁幼紅　王琳琳　鄧雯

【摘要】 目的：分析無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)對(duì)于胎兒性染色體異常的篩查價(jià)值。方法：選擇2015年6月-2017年12月筆者所在科室需要進(jìn)行無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)篩查的8 526例孕婦作為研究對(duì)象，均采集孕婦外周血，提取純化胎兒游離DNA，利用聯(lián)合探針錨定聚合測(cè)序法，將其中結(jié)果顯示性染色體高危的孕婦建議進(jìn)行介入性產(chǎn)前診斷，行羊膜腔穿刺及胎兒染色體核型分析。結(jié)果：本組8 526例孕婦中，部分為染色體非整倍體疾病高危人群，其中有199例血清學(xué)唐氏篩查顯示高危的孕婦，有1 769例分娩年齡在35歲或以上的高齡孕婦，有286例經(jīng)體外受精成功受孕的孕婦，有104例彩色多普勒超聲檢查胎兒存在異常的孕婦。本組8 526例孕婦篩查顯示性染色體異常的有21例，陽(yáng)性率為0.25%，其中8例為XO高危，7例為XXY高危，3例為XXX高危，3例為XYY高危。全部高危孕婦均建議進(jìn)行羊水細(xì)胞核型分析，8例XO高危孕婦自愿接受介入性產(chǎn)前診斷有4例，核型分析顯示2例吻合，2例不吻合，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為50.00%;XXX高危孕婦分別為2例、1例、1例、50.00%;XXY高危孕婦分別為5例、4例、1例、80%;XYY高危孕婦分別為2例、1例、1例、50.00%;無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)性染色體異常準(zhǔn)確率為61.54%。結(jié)論：無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)用于篩查性染色體異常具有比較高的準(zhǔn)確率，能夠保證胎兒性染色體異常檢出率得到提升，值得在臨床推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè); 胎兒性染色體異常; 篩查

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.03.023 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2019）03-00-03

優(yōu)生優(yōu)育一直是我國(guó)計(jì)劃生育的重要目標(biāo)，怎樣做好更精準(zhǔn)的產(chǎn)前篩查項(xiàng)目的普及一直是研究的重點(diǎn)內(nèi)容，唐氏篩查缺乏滿意準(zhǔn)確度，且容易出現(xiàn)漏診，作為篩查手段沒(méi)有較高可信度[1]。雖然臨床診斷一直將羊水培養(yǎng)視作金標(biāo)準(zhǔn)，不過(guò)其樣本采集具有有創(chuàng)性，大部分孕婦接受度不高[2]。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)孕婦血漿中存在胎兒游離DNA，使得產(chǎn)前篩查有了新的進(jìn)展[3]。當(dāng)前二代測(cè)序技術(shù)有了比較明顯進(jìn)步，利用無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)胎兒13-三體綜合征、18-三體綜合征、21-三體綜合征都能夠獲得較高準(zhǔn)確率，也有研究發(fā)現(xiàn)這一方法用于檢測(cè)性染色體準(zhǔn)確性也較高[4]。本研究對(duì)2015年6月-2017年12月8 526例孕婦血漿開(kāi)展高通量二代測(cè)序，對(duì)檢查顯示為高危的孕婦實(shí)施有創(chuàng)性介入診斷，分析無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)篩查胎兒性染色體異常的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年6月-2017年12月筆者所在科室需要進(jìn)行無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)篩查的8 526例孕婦作為研究對(duì)象，年齡16～48歲，平均（32.00±4.16）歲，平均孕周（16.10±2.28）周。

1.2 方法

本研究與武漢華大基因公司合作，所有檢測(cè)對(duì)象在充分了解無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前胎兒染色體非整倍體基因檢測(cè)技術(shù)的前提下，簽署知情同意書(shū)，使用配套專(zhuān)用K管抽取孕婦靜脈血5 ml，4 ℃條件下進(jìn)行血漿分離，提取血漿中游離DNA，PCR擴(kuò)增，利用聯(lián)合探針錨定聚合測(cè)序法采用高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行覆蓋度測(cè)序，最后通過(guò)生物信息分析計(jì)算獲取樣本X染色體、Y染色體的Z值，按照樣本Z值對(duì)樣本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷。

2 結(jié)果

2.1 無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因染色體非整倍體檢測(cè)的人群分布

本組8 526例孕婦中，部分為染色體非整倍體疾病高危人群，其中血清學(xué)唐氏篩查顯示高危的孕婦有199例，分娩年齡在35歲或以上的高齡孕婦有1 769例，經(jīng)體外受精成功受孕的孕婦有286例，彩色多普勒超聲檢查胎兒存在異常的孕婦有104例，見(jiàn)表1。

2.2 無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)性染色體非整倍體

本組8 526例孕婦篩查顯示，性染色體異常21例，陽(yáng)性率為0.25%，其中8例為XO高危，7例為XXY高危，3例為XXX高危，3例為XYY高危。全部高危孕婦均建議進(jìn)行羊水細(xì)胞核型分析，8例XO高危孕婦接受介入性產(chǎn)前診斷有4例，核型分析顯示2例吻合，2例不吻合，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為50.00%;3例XXX高危孕婦接受介入性產(chǎn)前診斷有2例，核型分析顯示1例吻合，1例不吻合，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為50.00%;7例XXY高危孕婦接受介入性產(chǎn)前診斷有5例，核型分析顯示4例吻合，1例不吻合，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為80.00%;3例XYY高危孕婦接受介入性產(chǎn)前診斷有2例，核型分析顯示1例吻合，1例不吻合，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為50.00%。本研究中自愿接受產(chǎn)前診斷的13例無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)性染色體異常的高危孕婦，羊水細(xì)胞核型分析結(jié)果有8例吻合，準(zhǔn)確率為61.54%，見(jiàn)表2。

3 討論

一般可以在母體外周血循環(huán)中發(fā)現(xiàn)胎兒游離DNA，這也是胎兒無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)領(lǐng)域發(fā)展的起點(diǎn)，推動(dòng)著無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)的發(fā)展[5]。無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)具體是對(duì)孕婦外周血中游離DNA染色體數(shù)量的差異進(jìn)行分析，進(jìn)而無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查胎兒染色體非整倍體疾病13-三體綜合征（帕陶氏綜合征）、18-三體綜合征（愛(ài)德華氏綜合征）、21-三體綜合征（唐氏綜合征），尤其這一檢測(cè)具有比較高的特異性及靈敏度，所以在臨床得到比較廣泛的應(yīng)用[6]。

性染色體非整倍體異常具體有超雄綜合征（47，XYY）、Turner綜合征（45，XO）、超雌綜合征（47，XXX）、克氏綜合征（47，XXY）[7]。這類(lèi)疾病都會(huì)程度不一影響胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育，具體涵蓋器官發(fā)育不全、智力功能障礙、神經(jīng)功能障礙、各類(lèi)臟器功能障礙[8]?？耸暇C合征在女?huà)雰褐械某霈F(xiàn)率要低于男嬰兒。Turner綜合征是其中出現(xiàn)率較高的一種，如果女性懷孕的第一胎出現(xiàn)Turner綜合征，而二胎為T(mén)urner綜合征的可能性明顯更高[9]。

性染色體異常會(huì)使得胎兒性分化異常，因此會(huì)造成生殖器官發(fā)育異常、生長(zhǎng)發(fā)育異常、智力發(fā)育障礙、心腎障礙等情況。不過(guò)性染色體異常致死率較低，通過(guò)B超檢查基本難以發(fā)現(xiàn)。羊水穿刺是臨床應(yīng)用的有效方法，不過(guò)其存在有創(chuàng)性，孕婦的接受度不高[10]。當(dāng)前雖然人們對(duì)生育重視程度越來(lái)越高，健康意識(shí)越來(lái)越強(qiáng)，不過(guò)接受產(chǎn)前染色體非整倍性疾病篩查診斷的人數(shù)并不多，由于篩查率低，所以無(wú)法及時(shí)發(fā)現(xiàn)性染色體異常的胎兒，沒(méi)有在最合適的時(shí)間接受相應(yīng)治療，大多等到長(zhǎng)大到生育年齡后才發(fā)現(xiàn)不孕或者不育這一問(wèn)題，因此，做好性染色體異常的篩查工作具有重要意義。

無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)是一種新型檢測(cè)方法，這一檢測(cè)方法的應(yīng)用不僅能夠高準(zhǔn)確性、高特異性的檢測(cè)多種染色體非整倍性疾病，如18-三體綜合征、13-三體綜合征、21-三體綜合征，同時(shí)能夠準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)性染色體異常，并且因?yàn)槠錈o(wú)創(chuàng)性特點(diǎn)，所以大部分孕婦都可以接受。從筆者所在科室開(kāi)始實(shí)施無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)后，越來(lái)越多的孕婦愿意接受產(chǎn)前篩查，其中部分為高齡孕婦，部分為人工受精受孕，這類(lèi)孕婦基本難以通過(guò)羊水穿刺實(shí)施篩查。本研究在檢測(cè)顯示存在性染色體異常的孕婦，還是有少數(shù)孕婦不愿意接受羊水穿刺檢查，而堅(jiān)持要求進(jìn)行胎兒分娩。雖然無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)技術(shù)只是篩查性染色體異常的一種手段，不過(guò)因?yàn)槠錅?zhǔn)確率高，所以能夠?qū)μ旱纳L(zhǎng)發(fā)育進(jìn)行嚴(yán)密觀察，做到對(duì)疾病新生兒盡早的診斷及治療，在最合適的時(shí)間選擇性激素及生長(zhǎng)激素治療。

筆者所在科室2015年開(kāi)始開(kāi)展無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)，在這之前并沒(méi)有胎兒性染色體異常篩查的系統(tǒng)方法，基本都是通過(guò)羊水培養(yǎng)高危孕婦來(lái)進(jìn)行性染色體異常胎兒的檢測(cè)。在開(kāi)展無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)之前，筆者所在科室雖然是宜昌市的產(chǎn)前診斷中心，但自愿接受羊水穿刺檢查的孕婦不多，開(kāi)展無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)之后自愿接受羊水培養(yǎng)的孕婦逐漸增多，并且發(fā)現(xiàn)，在進(jìn)行無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前篩查后，筆者所在科室胎兒性染色體異常的檢出率也逐漸上升，證實(shí)無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因篩查對(duì)于性染色體異常的篩查是有重要價(jià)值的。

綜上所述，無(wú)創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測(cè)篩查胎兒性染色體異常具有較高準(zhǔn)確率，有助于臨床盡早采取處理措施，改善胎兒預(yù)后，可以廣泛推廣應(yīng)用。

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