幾種生物菌劑防治煙草青枯病藥效試驗

張仁軍 魏剛 楊兆忠

摘要? ? 為了篩選出高效防治煙草青枯病的生物菌劑，本試驗選用3種復(fù)合生物菌劑進(jìn)行了田間防效試驗。結(jié)果表明，以每株煙塘施復(fù)合放線菌肥20 g作為基肥的效果最佳，不僅能夠促進(jìn)煙株的生長，且對青枯病的相對防效達(dá)81.34%，與煙草青枯病防控的常規(guī)農(nóng)藝措施相比，相對防效顯著提高。本研究結(jié)果為田間防治煙草青枯病提供了一種有效的生物防控措施，同時為煙草土傳病害的綠色防治提供了一定的數(shù)據(jù)支撐。

關(guān)鍵詞? ? 生物菌劑;復(fù)合放線菌肥;煙草青枯病;防效

中圖分類號? ? S435.72? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼? ? A? ? ? ? 文章編號? ?1007-5739（2019）06-0079-03

Abstract? ? Three compound bio-fungicides were selected for field control experiments in order to select effective bio-fungicides against tobacco bacterial wilt.The results showed that the application of 20 g compound actinomycete fertilizer per plant as the base fertilizer was the best，which could not only promote the growth of tobacco plants，but also could effectively control the bacterial wilt. The relative control effect for bacterial wilt was up to 81.34%，which was higher than the conventional agronomic measures.The results of this study provided an effective biological control measure for the control of tobacco bacterial wilt in the field，and supported the green bio-control of soil-borne disease in tobacco.

Key words? ? bio-fungicides;compound actinomycetes fertilizer;tobacco bacterial wilt;control effect

煙草青枯病是由青枯雷爾氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的一種細(xì)菌性維管束病害，俗稱煙瘟、半邊瘋，其癥狀表現(xiàn)為半邊萎蔫、半邊正常，病情加重時莖桿外表呈現(xiàn)出黑色條斑，髓部常見白色菌膿并帶有一股腐臭味。1864年，首先在印度尼西亞報道了青枯病對煙草的危害，此后其他主要產(chǎn)煙國家相繼開始報道煙草青枯病。前人對煙草青枯病防治的研究報道多集中在抗性育種[1-2]、改善耕種制度[3]、藥劑防治[4-5]等方面，但防治效果并不理想。近年來，生物防治煙草青枯病日益受到人們的關(guān)注，與化學(xué)防治相比，生物防治技術(shù)符合綠色生態(tài)的理念。目前，對青枯病病原菌的拮抗篩選有許多研究，主要有芽孢桿菌（Bacillus）[6]、鏈霉菌（Strept-omyces）[7]、假單胞菌（Pseudomonas）[8-9]、叢枝菌根真菌（arbu-scula mycorrhizal fungi）[10]等，但應(yīng)用在大田試驗時防控效果會因環(huán)境不同產(chǎn)生很大差別，這與拮抗菌在土壤中的定殖能力密切相關(guān)，也與拮抗菌能否進(jìn)入植株產(chǎn)生抑制病原菌的效果有一定關(guān)系。芽孢桿菌與病原菌競爭營養(yǎng)物質(zhì)和空間位點，也能誘導(dǎo)植物獲得系統(tǒng)抗性[11]。假單胞菌容易定殖于植物根際，是土壤的優(yōu)勢微生物種群之一，具有防病促生的能力[12]。菌根真菌能與病原菌爭奪侵染位點，減少病原菌的侵染部位和感染概率[13]。

本試驗選用3種不同組合的生物菌劑進(jìn)行煙草青枯病的大田防治，為進(jìn)一步采取措施進(jìn)行煙草土傳病害的綠色防控提供理論依據(jù)。

1? ? 材料與方法

1.1? ? 試驗地概況

試驗選擇昆明市富民縣款莊鎮(zhèn)往年青枯病常發(fā)的地塊作為試驗區(qū)，海拔高度2 236 m，位于北緯25°47′26″、東經(jīng)102°61′55″。試驗地為典型的紅黃壤山地地塊，土壤肥力中等，pH值為5.24～5.31。

1.2? ? 試驗材料

供試煙草品種為紅花大金元。供試藥劑：哈茨木霉復(fù)合微生物菌劑（昆明保騰生化技術(shù)有限公司陸良分公司），主要菌種是哈茨木霉菌（Trichoderma harzianum）和萎縮芽孢桿菌（Bacillus atrophaeus），有效活孢數(shù)≥2.0億個/g;復(fù)合微生物菌劑-BAB（昆明保騰生化技術(shù)有限公司），主要菌種是枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）和解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens），有效活菌數(shù)≥2.0億個/mL;復(fù)合放線菌肥（云南大學(xué)微生物重點實驗室），主要菌種是鏈霉菌（T005、T009、T019），有效活孢數(shù)≥2.0億個/g。

1.3? ? 試驗設(shè)計

試驗共設(shè)7個處理，即CK0（空白處理）：不施用任何防控黑脛病和青枯病的藥劑，其余同常規(guī)處理;CK1（所有農(nóng)藝措施）：包括對黑脛病的常規(guī)防控;T1：用固體菌劑1 g/株兌水150 g/株，邊攪拌邊淋洗植株并灌根，15、30 d后各重復(fù)1次;T2：用固體菌劑1 g/株兌水150 g/株，邊攪拌均勻邊淋洗植株并灌根，15 d后用液體菌劑5 mL/株兌水100 g/株灌根，30 d后用固體菌劑1 g/株兌水150 g/株，攪拌均勻淋洗植株并灌根;T3：每株煙塘施放線菌肥5 g作基肥;T4：每株煙塘施放線菌肥10 g作基肥;T5：每株煙塘施放線菌肥20 g作基肥。每個處理50株煙，3次重復(fù)，各處理采用完全隨機區(qū)組排列。其他大田管理措施按照昆明優(yōu)質(zhì)煙葉生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程進(jìn)行。

1.4? ? 調(diào)查統(tǒng)計

1.4.1? ? 農(nóng)藝性狀調(diào)查。各處理選擇有代表性的煙株5～10株掛牌標(biāo)記，按《煙草農(nóng)藝性狀調(diào)查方法》（YC/T 142—1998）標(biāo)準(zhǔn)定點定株在煙草采烤期測定煙株的農(nóng)藝性狀，主要包括株高、莖圍、有效葉片數(shù)、最大葉長、最大葉寬，計算葉面積系數(shù)。葉面積計算公式如下：

2? ? 結(jié)果與分析

2.1? ? 煙株農(nóng)藝性狀

煙株的農(nóng)藝性狀于采烤期進(jìn)行調(diào)查。施用不同的生物菌劑和常規(guī)預(yù)防青枯病的農(nóng)藝措施較對照組CK0各項指標(biāo)有一定差異，總體而言煙株的長勢較好（圖1）。但施用復(fù)合放線菌肥與常規(guī)預(yù)防青枯病的農(nóng)藝措施相比，明顯能夠促進(jìn)煙葉的生長，提高煙葉產(chǎn)量。試驗結(jié)果表明，以處理T4效果最佳，最大葉面積明顯高于其他處理組。因此，煙葉生產(chǎn)上可每株煙施用復(fù)合放線菌肥10 g來提高煙葉產(chǎn)量。

2.2? ? 煙株發(fā)病率、病情指數(shù)

煙苗移栽后90、120 d分別對大田試驗的不同處理組進(jìn)行了青枯病發(fā)病情況調(diào)查，并計算相應(yīng)的病情指數(shù)和相對防效（表1）。煙苗移栽后的90～120 d，當(dāng)?shù)卣幱诟邷赜昙?，各處理組的病情指數(shù)和發(fā)病率呈上升趨勢。施用不同生物菌劑與常規(guī)防治青枯病的農(nóng)藝措施都能對青枯病有一定的防治效果。結(jié)果表明，施用復(fù)合放線菌能明顯降低青枯病的發(fā)生，且以處理T5相對防效最佳，高達(dá)81.34%。而處理T3、T4、T5之間相對防效的差異可能與放線菌在土壤中的有效定殖數(shù)量有關(guān)。生防菌作用于病原菌需要經(jīng)過在土壤中定殖的過程，施用不同量的防線菌肥會影響放線菌的定殖數(shù)量。處理T5與CK1相比也有著極顯著差異。因此，在煙葉生產(chǎn)上值得推廣使用復(fù)合放線菌肥，以每株煙塘施用放線菌肥20 g為宜。

3? ? 結(jié)論與討論

試驗結(jié)果表明，施用放線菌肥既能夠促進(jìn)煙葉的生長，又能夠有效地抑制青枯病的發(fā)生。合理控制放線菌肥的施用量，既能節(jié)約成本，又能有效地定殖生防菌，建議每株煙塘施用放線菌肥20 g，以達(dá)到煙草青枯病的高效防控。

放線菌能產(chǎn)生多種抗生素，對許多植物病原菌都具有明顯的抑制作用[14]。目前，生防菌防治煙草病害的報道越來越多，但大多處于試驗階段，在大田應(yīng)用的防效并不穩(wěn)定，這與生防菌在土壤和植株中的定殖能力有重要關(guān)系[15-16]。許多研究表明，生防菌兩兩混合后，其平板抑菌活性、定殖能力以及田間防效都有明顯提高，表明混合處理的生防菌之間有協(xié)同增效作用[17]。拮抗菌單獨施入土壤后不易定殖，提高拮抗菌在土壤根際的定殖成為生物防治的重點。目前，采用拮抗菌結(jié)合有機肥制成生物有機肥可調(diào)節(jié)土壤微生態(tài)、抑制病原菌的生長[18]?；旌戏揽卮胧┠芨玫匾种魄嗫莶〔≡?，起到改善土壤微生物平衡的作用，修復(fù)被破壞的土壤微生物體系[19]?；旌限卓咕谟袡C肥協(xié)助下形成“基質(zhì)—菌群”生態(tài)系統(tǒng)，利于土壤微生態(tài)環(huán)境的調(diào)節(jié)，可改善根際土壤微生物生態(tài)特征和物理化學(xué)特征，從而有效抑制病原菌[20]。本試驗選用復(fù)合放線菌肥效果良好，煙株健康壯碩，煙葉產(chǎn)量高，可有效降低青枯病的發(fā)病率。在煙草生產(chǎn)中，應(yīng)堅持“預(yù)防為主，綜合防治”的方針，才能更有效地防治煙草青枯病。

4? ? 參考文獻(xiàn)

[1] 楊友才，周清明，朱列書.煙草品種青枯病抗病性及抗性遺傳研究[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2005，31（4）：381.

[2] 徐輝，熊霞.煙草青枯病防治技術(shù)研究進(jìn)展[J].湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009（4）：91-93.

[3] 李勇，卓東.煙草青枯病綜合防治方法及其研究進(jìn)展[J].南方農(nóng)業(yè)，2011，5（12）：43-45.

[4] 陳永惠，黃福興.煙草青枯病藥劑防治試驗[J].廣西植保，1996（4）：23-25.

[5] 賈春燕，鄭洪波，張茹萍，等.防治煙草青枯病的藥劑篩選[J].山東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010（8）：76-78.

[6] 趙曉燕，楊歡，陳建剛，等.一株煙草青枯病生防菌的篩選鑒定及其發(fā)酵優(yōu)化[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，53（8）：1810-1814.

[7] 王靜.煙草青枯病拮抗細(xì)菌的初步篩選[C]//農(nóng)業(yè)生物災(zāi)害預(yù)防與控制研究.北京：中國植物保護(hù)學(xué)會，2005.

[8] ANURATHA C S，GNANAMANICK S S.Biological control of bacterial wilt caused by Pseudomonas solancearum in Indian with antagonistic bacteria [J].Plant and Soil，1990，124（1）：109-114.

[9] 胡華軍，張伏軍，藍(lán)希鉗，等.煙草根際細(xì)菌銅綠假單胞菌swu31-2的定殖能力及其對煙草青枯病的防治作用[J].植物 ，2009，35（5）：89-94.

[10] 曾維愛，龍世平，李宏光，等.苗期接種不同叢枝菌根真菌對煙草青枯病防治效果的影響[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011，42（6）：612-615.

[11] 齊愛勇，趙緒生，劉大群.芽孢桿菌生物防治植物病害研究現(xiàn)狀[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2011，27（12）：277-280.

[12] 陳曉斌，張炳欣，何勇強.假單胞菌屬生防菌株的遺傳工程改良[J].微生物學(xué)通報，2000，7（4）：293-296.

[13] VIGO C，NORMAN J R，HOOKER E.Biocontrol of the pathogen Phyto-phthora parasitica by arbuscular mycorrhizal fungi is a consequence of effects on infection loci[J].Plant Pathology，2000（49）：509-514.

[14] 梁亞萍，宗兆鋒，馬強.6株野生植物內(nèi)生放線菌防病促生作用的初步研究[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報，2007，35（7）：131-136.

[15] 郭堅華，王玉菊，李瑾，等.抑菌圈—定殖力雙重測定法篩選青枯病生防細(xì)菌[J].植物病理學(xué)報，1996，26（1）：49-54.

[16] KLOEPPER J W.A review of issues related to measuring colonization of plant roots by bacteria[J].Canadian Journal of Mierobiology，1992，38（6）：667-672.

[17] 呂建林，劉二明，柏連陽，等.煙草青枯病生防菌混合接種對其定殖及防效的影響[J].中國生物防治，2010，26（2）：200-205.

[18] ABAWI G S，WIDMER T L.Impact of soil health management practices on soilborne pathogens，nematodes and root diseases of vegetable crops[J].Applied Soil Ecology，2000，15（1）：37-47.

[19] LIU Y，SHI J，F(xiàn)ENG Y，et al.Tobacco bacterial wilt can be biologically controlled by the applicaiton of antagonistic strains in combination with organic fertilizer[J].Biology and Fertility of Soils，2013，49（4）：447-464.

[20] 張志紅，李華興，韋翔華，等.生物肥料對香蕉枯萎病及土壤微生物的影響[J].生態(tài)環(huán)境，2008，17（6）：2421-2425.