楊云峰
【摘要】 目的 探討UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿紅細(xì)胞假陽性的原因。方法 選擇 680例患者的10 ml清潔中后段尿液為檢測(cè)樣本, 充分混勻后分為兩管, 每管5 ml。一管進(jìn)行UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè), 另一管進(jìn)行顯微鏡檢測(cè)。將顯微鏡檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。比較UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)結(jié)果與顯微鏡檢測(cè)結(jié)果的差異。分析出現(xiàn)假陽性的原因。結(jié)果 本組680例標(biāo)本中, UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)陽性134例, 陰性546例;顯微鏡檢測(cè)陽性117例, 陰性563例。UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)的假陽性率為8.17%(46/563), 假陰性率為24.79%(29/117), 敏感性為75.21%(88/117), 91.83%(517/563)。46例假陽性標(biāo)本中, 結(jié)晶18例, 細(xì)菌20例, 酵母樣菌5例, 其他3例。結(jié)論 酵母樣菌、結(jié)晶、細(xì)菌等干擾UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)紅細(xì)胞造成假陽性, UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)到紅細(xì)胞陽性必須結(jié)合顯微鏡檢測(cè)以降低誤診率、提高尿液檢驗(yàn)質(zhì)量。
【關(guān)鍵詞】 UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀; 尿紅細(xì)胞假陽性;顯微鏡檢測(cè)
DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.06.030
先進(jìn)尿液檢測(cè)技術(shù)隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展基本普及, 全自動(dòng)尿沉渣分析儀使尿沉渣鏡檢實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化, 提供的結(jié)果易于臨床動(dòng)態(tài)觀察, 提高了尿液分析的準(zhǔn)確性和特異 性[1-3], 全自動(dòng)尿沉渣分析儀和尿干化學(xué)儀聯(lián)機(jī)后, 兩種方法的尿液檢測(cè), 即對(duì)有形成分和無形成分檢測(cè)的交叉互檢實(shí)現(xiàn)尿液檢測(cè)的整體化和標(biāo)準(zhǔn)化[4]。但尿液檢測(cè)干擾因素很 多, 隨機(jī)性很強(qiáng), 部分臨床醫(yī)生對(duì)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)缺乏分析能力, 過分依賴化驗(yàn)結(jié)果, 不能最大限度地發(fā)揮檢驗(yàn)數(shù)據(jù)在診治疾病中的指導(dǎo)作用, 不清楚檢測(cè)數(shù)據(jù)假陽性、假陰性問題, 可能會(huì)由于一個(gè)錯(cuò)誤的數(shù)據(jù)而引起誤診[5, 6]。這就要求重視尿液分析后的質(zhì)量控制工作, 檢測(cè)到紅細(xì)胞陽性必須結(jié)合顯微鏡檢測(cè)以降低誤診率、提高尿液檢驗(yàn)質(zhì)量。本文進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)觀察和分析, 報(bào)告如下。
1 材料與方法
1. 1 儀器與試劑 自動(dòng)染色尿沉渣分析儀及配套試劑, UF-check質(zhì)控液, UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀及配套試劑CELLSHEATH鞘液、URINOPACK稀釋液、URINOSEARCH 染液, neubauer計(jì)數(shù)板、Olympus顯微鏡、上海醫(yī)用離心機(jī)廠400 g離心機(jī)。
1. 2 標(biāo)本來源 標(biāo)本來自隨機(jī)抽取的2017年2~6月本院680例患者, 應(yīng)用一次性塑料尿杯收集清潔中后段尿液。
1. 3 測(cè)定方法 全部的尿液標(biāo)本均在2 h內(nèi)完成檢測(cè)。取10 ml新鮮清潔中后段尿液, 充分混勻后分為兩管, 每管 5 ml。一管進(jìn)行UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè), 另一管進(jìn)行顯微鏡檢測(cè)。
1. 3. 1 UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè) 標(biāo)本離心進(jìn)行尿沉渣檢測(cè), 離心后標(biāo)本上機(jī)按UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀操作說明進(jìn)行檢測(cè), 檢測(cè)前先作儀器的每日質(zhì)控, 進(jìn)樣開頭記錄分析數(shù)據(jù), 分析各種參數(shù)。UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀正常值參考范圍[7]: 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為0~25個(gè)/μl , 超出此范圍即判定為陽性。
1. 3. 2 顯微鏡檢測(cè) 在離心力為400 g(回轉(zhuǎn)半徑15 cm水平離心機(jī)1500 r/min)條件下離心5 min。取0.2 ml沉渣混勻后, 吸20 μl在Fast-Read-10板上計(jì)數(shù)紅細(xì)胞, 正常值參考范 圍[8]:紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為0~5個(gè)/ HP , 超出此范圍即判定為陽性。
1. 4 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 將顯微鏡檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。比較UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)結(jié)果與顯微鏡檢測(cè)結(jié)果的差異。
2 結(jié)果
本組680例標(biāo)本中, UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)陽性134例, 陰性546例;顯微鏡檢測(cè)陽性117例, 陰性563例。UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)的假陽性率為8.17%(46/563), 假陰性率為24.79%(29/117), 敏感性為75.21%(88/117), 91.83%(517/563)。46例假陽性標(biāo)本中, 結(jié)晶18例, 細(xì)菌20例, 酵母樣菌5例, 其他3例。UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀與顯微鏡檢測(cè)結(jié)果見表1。
3 討論
UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀采用流式細(xì)胞儀的工作原理和電阻抗技術(shù), 在染色液中具有選擇性, 使細(xì)胞膜、細(xì)胞核分別染色兩種染料, 通過檢測(cè)單一有形成分的熒光強(qiáng)度(Fl)、前向散射光強(qiáng)度(Fsc)、前向熒光脈沖寬度(FIW)、前向散射光脈沖寬度(Fscw)分析細(xì)胞信息, 通過對(duì)每一個(gè)細(xì)胞信號(hào)和波形的特性對(duì)其分類[9-12]。
UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀雖然方便、快速、結(jié)果重復(fù)性好, 但在對(duì)尿紅細(xì)胞檢測(cè)的過程中受多種因素影響, 不能完全代替顯微鏡檢測(cè), 仍有許多局限性。當(dāng)尿液中出現(xiàn)細(xì)菌、結(jié)晶、酵母菌時(shí), 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)偏高, 可能會(huì)出現(xiàn)假陽性的結(jié)果, 為保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠, 此時(shí)需要進(jìn)行顯微鏡檢測(cè)復(fù)核, 避免誤診。
紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核, 儀器根據(jù)單一有形成分的Fl低和Fsc低將其歸類為紅細(xì)胞。尿液中存在的無定形結(jié)晶等, 會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)紅細(xì)胞假陽性的結(jié)果 [13]。結(jié)晶在染色過程中不著色, 其Fl較紅細(xì)胞更低, 結(jié)晶對(duì)紅細(xì)胞假陽性結(jié)果影響最大, 草酸鈣結(jié)晶Fl低和Fsc低的特征相似, 尿酸鹽結(jié)晶散布于散點(diǎn)圖中, 當(dāng)其濃度增高時(shí), 與紅細(xì)胞散點(diǎn)出現(xiàn)交叉分布, 會(huì)對(duì)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)產(chǎn)生影響。細(xì)菌體積小, Fl比紅細(xì)胞強(qiáng), Fsc要比紅細(xì)胞弱, 尿液中細(xì)菌濃度超過一定數(shù)量時(shí), 儀器將大的或成雙的葡萄球菌和鏈球菌誤認(rèn)為紅細(xì)胞。單個(gè)的酵母菌大小與紅細(xì)胞相似, 容易錯(cuò)判為紅細(xì)胞[14]。由于蛋白尿中形成的管型短而小, 易被漏檢, UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀尿沉渣分析儀檢測(cè)管型的假陰性主要見于蛋白尿的檢測(cè), 但脂肪管型中的脂肪滴熒光強(qiáng)度較低, 造成假陰性[15, 16]。