血清巨噬細(xì)胞遷移抑制因子和白細(xì)胞介素10水平與重癥膿毒癥患者生存時間的相關(guān)性

陳 琛,蘇 華,許玉環(huán),馬琴琴

(河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院:1.重癥醫(yī)學(xué)科;2.檢驗(yàn)科，河北張家口 075000)

膿毒癥是指由感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征，是住院患者死亡的主要原因之一[1]。早期全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)的特征在于促炎介質(zhì)的表達(dá)，其后是發(fā)展代償性抗炎癥反應(yīng)綜合征(CARS)[2-3]。研究表明，促炎介質(zhì)的表達(dá)可能引發(fā)一系列早期反應(yīng)從而導(dǎo)致早期死亡[4-5]。巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)是全身性炎性反應(yīng)的一種重要調(diào)節(jié)因素，其過表達(dá)可能導(dǎo)致嚴(yán)重膿毒癥的早期死亡[6-8]。此外，小鼠模型實(shí)驗(yàn)顯示白細(xì)胞介素-10(IL-10)在感染后12 h內(nèi)達(dá)到峰值，表明早期IL-10水平升高也可能是造成機(jī)體炎性反應(yīng)不足和控制感染失敗的原因[9]。本研究通過比較不同生存時間的兩組嚴(yán)重膿毒癥患者的血清MIF和IL-10水平，探討血清MIF和IL-10水平與嚴(yán)重膿毒癥患者生存時間的相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 連續(xù)收集2015年7月至2017年7月于本院住院接受治療的135例重癥膿毒癥患者入組。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)根據(jù)膿毒癥國際診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]，被確診為膿毒癥患者；(2)年齡大于18歲，精神狀況良好；(3)患者生存時間小于72 h或大于30 d。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)不愿參與本研究的患者；(2)不能進(jìn)行正常交流的患者。本研究已獲得所有研究對象的知情同意，并獲得醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。根據(jù)患者生存時間將其分為A、B兩組，A組生存時間小于72 h，B組生存時間大于30 d；其中A組15例，男8例，女7例，B組120例，男65例，女55例。記錄患者的性別、年齡和心血管功能障礙(收縮壓<90 mm Hg，平均動脈壓<65 mm Hg，或收縮壓降低> 40 mm Hg)、呼吸系統(tǒng)障礙(雙側(cè)肺部浸潤，動脈氧分壓與吸入氧分量之比<300 mm Hg)、腎功能損害[血清肌酐水平>2 mg/dL或尿量持續(xù)2 h<0.5 mL/(kg·h)]、肝功能損害(總血清膽紅素水平>2 mg/dL)、乳酸代謝障礙(血清乳酸水平>2 mmol/L)和血液功能障礙(血小板計數(shù)<100×109/L)等信息。

1.2方法 收集所有患者清晨空腹血樣，將血液收集在無菌試管中，離心并將血清分裝到Eppendorf管中并在-70 ℃儲存直至分析。血清MIF和IL-10水平采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒(MIF：RayBiotech，Norcross，GA，USA;IL-10：Biolegend，San Diego，CA，USA)測定。

2 結(jié) 果

2.1兩組一般資料對比 本研究兩組的一般資料見表1。兩組間性別、年齡、呼吸功能障礙和腎、肝功能損害情況差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；而在心血管功能障礙、乳酸代謝障礙和血液功能障礙3方面差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表1 兩組一般資料對比

2.22組血清MIF和IL-10水平比較 A組血清MIF和IL-10水平分別為(7 633±658)和(883±312)pg/mL，B組血清MIF和IL-10水平分別為(2 598±764)和(583±276)pg/mL；A組的血清MIF和IL-10水平均顯著高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組巨噬細(xì)胞遷移抑制因子和IL-10

2.3單因素分析 單因素分析顯示心血管功能、乳酸代謝和血液功能障礙，以及MIF和IL-10水平升高均為膿毒癥死亡風(fēng)險因素(P<0.05)。見表3。

表3 膿毒癥死亡風(fēng)險的單因素分析

2.4多因素分析 將單因素分析中顯著的變量納入多因素分析，結(jié)果顯示心血管功能、乳酸代謝和血液功能障礙，以及MIF和IL-10水平升高均為膿毒癥死亡風(fēng)險因素(P<0.05)。

表4 膿毒癥死亡風(fēng)險的多因素分析

3 討 論

一般來講，膿毒癥的兩階段模型由最初的促炎階段和隨后的抗炎階段組成。而本研究表明，在患有嚴(yán)重膿毒癥的患者中同時發(fā)生促炎細(xì)胞因子和抗炎細(xì)胞因子如MIF和IL-10水平升高的現(xiàn)象，這與TAMAYO等[11]和CHUANG等[12]的研究結(jié)果類似，表明嚴(yán)重膿毒癥的早期階段同時存在促炎和抗炎反應(yīng)。早期研究報道IL-10與嚴(yán)重膿毒癥患者48、72 h、15、28 d病死率有顯著相關(guān)性[13]。而在最近發(fā)表的使用細(xì)胞因子多重分析的研究中，IL-10并不是48 h死亡率的預(yù)測因子，但它是28 d死亡率的顯著預(yù)測因子[14]。然而，本研究表明IL-10水平升高與72 h死亡風(fēng)險顯著相關(guān)，與上述結(jié)果不同，推測可能有以下原因：(1)患者的來源不同，同時各項(xiàng)研究的方法以及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)不同；(2)采集血樣的時間不同，可能導(dǎo)致血清因子測定的水平差異；(3)測量細(xì)胞因子水平的方法不同。這些都可能導(dǎo)致不同研究間的差異性。

高M(jìn)IF水平和腎上腺不良反應(yīng)與嚴(yán)重膿毒癥患者的早期死亡有關(guān)[15-16]。本結(jié)果表明，MIF水平升高是嚴(yán)重膿毒癥患者死亡風(fēng)險的獨(dú)立風(fēng)險因素之一。結(jié)合以前的研究結(jié)果，表明膿毒癥兩階段模型中初始均會發(fā)生促炎階段。此外，在膿毒癥大鼠模型中腹膜內(nèi)注射重組MIF會誘導(dǎo)彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)，而在DIC膿毒癥患者中也發(fā)現(xiàn)持續(xù)的MIF水平升高及可溶性纖維蛋白和低蛋白C活性增強(qiáng)[17]。因此，推測MIF和蛋白C活性水平之間存在顯著負(fù)相關(guān)，而該相關(guān)性可能參與膿毒癥患者快速死亡結(jié)局，但這仍需要在未來的工作中進(jìn)一步探索。

IL-10是由多種類型細(xì)胞分泌的有效內(nèi)源性免疫抑制劑細(xì)胞因子，包括T輔助(Th)2細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞和上皮細(xì)胞。它抑制Th1促炎性細(xì)胞因子，包括干擾素γ(IFN-γ)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、IL-1b、IL-8、IL-12和IL-21。MIF是全身炎性反應(yīng)的關(guān)鍵介質(zhì)，由垂體前葉和免疫細(xì)胞分泌，主要是T細(xì)胞。它刺激促炎細(xì)胞因子包括TNF-α、IFN-g、IL-1b、IL-6、IL-8和IL-22的表達(dá)和分泌。本研究結(jié)果證實(shí)，由于嚴(yán)重膿毒癥而在72 h內(nèi)死亡的患者具有顯著的MIF和IL-10水平升高現(xiàn)象。下一步研究將聚焦于Th1細(xì)胞分泌的促炎性細(xì)胞因子是否在嚴(yán)重膿毒癥患者的高M(jìn)IF和IL-10水平的雙重作用下產(chǎn)生。此外，筆者也將探討Th1/Th2細(xì)胞在嚴(yán)重膿毒癥患者中的差異表達(dá)譜。

4 結(jié) 論

本研究表明MIF和IL-10水平升高是重癥膿毒癥患者快速死亡的風(fēng)險因素。而MIF和IL-10的自發(fā)表達(dá)是否影響嚴(yán)重膿毒癥患者中Th1/Th2相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)，從而形成不同結(jié)局，值得進(jìn)一步研究。