福建柘榮不同品種太子參浸出物及多糖含量測定

林巧美 龐文生 曾潔

【摘 要】? 目的：考察閩產(chǎn)太子參“柘參2號”與新品種“柘參3號”浸出物及多糖含量的差異，為不同品種太子參質(zhì)量評價奠定基礎。方法：采用冷浸法測定太子參水溶性浸出物含量;采用加熱回流提取、苯酚硫酸法測定太子參中多糖含量。結(jié)果：15批次“柘參2號”太子參浸出物含量在29.78%～36.30%、多糖含量在31.14%～38.74%范圍之間; 15批次“柘參3號”太子參浸出物含量在35.84%～43.83%，多糖含量在32.16%～41.48%范圍之間。結(jié)論：“柘參3號”太子參浸出物和多糖含量均顯著高于“柘參2號”，新品種“柘參3號”太子參在浸出物、多糖含量指標方面優(yōu)于“柘參2號”。

【關鍵詞】 太子參;柘參2號;柘參3號;浸出物;多糖

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2019）3-0021-03

Abstract：Objective To inspection the difference of the extracts and polysaccharide content of the new cultivar “Zheshen No.3”（ZS3） and the “Zheshen No.2”（ZS2）， and to lay the foundation for quality evaluation of high quality varieties of Radix Pseudostellariae. Methods The method of cold soak in the determination of the extract was used to determine ZS2 and ZS3 ; The content of polysaccharides in Radix Pseudostellariae was determined by heating reflux extraction and phenol sulfuric acid method.Results The extracts of the 15 batches of Radix Pseudostellariae in the ZS2 ranged from 29.78% to 36.30%，and the content of polysaccharides ranged from 31.14% to 38.74%. The extracts of the 15 batches of Radix Pseudostellariae in the ZS3 ranged from 35.84% to 43.83%，and the content of polysaccharides ranged from 32.16% to 41.48%.Conclusion The extracts and polysaccharide content of the new cultivar ZS3 is significantly higher than that of ZS2， to a certain extent， it can reflect that the quality of the new variety of ZS3 is higher than that of ZS2.

Keywords：Pseudostellaria heterophylla; Zheshen No.2; Zheshen No.3; Extract; Polysaccharides

太子參為石竹科植物孩兒參Pseudostellaria haterophylla （Miq.）Pax ex Pax et Hoffm.的干燥塊根，系福建道地藥材，福建柘榮縣譽為“中國太子參之鄉(xiāng)”。柘榮地區(qū)太子參常見品種為“柘參1號”和“柘參2號”，其中“柘參2號”的品質(zhì)較為穩(wěn)定、產(chǎn)量較高，當?shù)胤N植面積達80%以上[1]。但由于太子參栽培過程長期采用塊根進行無性繁殖、栽培品種較單一，致使太子參種質(zhì)退化、病害加劇，因此需要進一步研究開發(fā)優(yōu)質(zhì)太子參品種。葉祖云等[2]應用植物多倍體誘導技術，培育出新品種即“柘參3號”，通過了福建省農(nóng)作物品種認定。多倍體通常能引起營養(yǎng)器官體積增大和次生代謝產(chǎn)物增多，且在培育過程中采用莖尖脫毒組培育苗技術，使得種苗更健康，因此“柘參3號”太子參在栽培過程中表現(xiàn)出塊根大、產(chǎn)量高、生長健壯等特點;但作為藥材，新品種“柘參3號”太子參的質(zhì)量，應該從多方面進行系統(tǒng)評價。本研究擬從多糖及浸出物含量兩個指標，以“柘參2號”作對照，初步考察“柘參3號”太子參的質(zhì)量。

1 儀器與材料

1.1 儀器 UV-3200紫外可見分光光度計 （配備UV-Vis Analyst 紫外可見分光光度計應用系統(tǒng)，上海美譜達儀器有限公司）;AE240S電子分析天平（梅特勒-托利多有限公司）;HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）;DHG-9123A電熱恒溫鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）。

1.2 材料 “柘參2號”太子參，購自福建柘榮太子參種植基地;“柘參3號”太子參，由福建西岸生物科技有限公司和寧德市南嶺農(nóng)業(yè)有限公司提供，從中隨機各抽取15批次樣品測定其浸出物及多糖含量。

D-無水葡萄糖對照品（批號：110833-201506，中國食品藥品檢定研究院）;硫酸（分析純，批號：160123，西隴化工股份有限公司）;苯酚（批號：20161018）、無水乙醇（批號：20170424）購自國藥集團化學試劑有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 太子參水溶性浸出物測定 按照2015年版《中華人民共和國藥典》水溶性浸出物測定法項下的冷浸法進行測定。準確稱取太子參粉末4g，每個批次平行3份，置于250mL錐形瓶中，精密加水100mL，密塞，冷浸，前6小時內(nèi)時時振搖，再靜置18小時，用干燥過濾器迅速濾過，精密量取續(xù)濾液20mL，置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3h;置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量，計算各批次太子參藥材中浸出物含量。

2.2 太子參中多糖含量測定

2.2.1 對照品溶液的制備 準確稱取D-無水葡萄糖對照品0.01824g，加蒸餾水溶解，定容至200mL容量瓶中，配制成濃度為91.20μg /mL的對照品溶液，作為母液。分別精密吸取母液1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0mL，加水定容至5mL，配制成濃度為18.24、27.36、36.48、54.72、72.96、91.20μg /mL的對照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 稱取太子參（粉碎過3號篩）0.1000g，精密稱定，置于索氏提取器中，加入85%乙醇100mL，90 ℃水浴加熱1.5h，棄去乙醇液，藥渣揮干乙醇。藥渣連同紙筒置于圓底燒瓶中，精確加入100mL蒸餾水，稱重，水浴加熱回流提取2h，放冷后加水補重，混勻，過濾。精確量取濾液20mL置100mL容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度線，即得供試品溶液。

2.2.3 線性關系考察 精密吸取各對照品溶液lmL，置10mL具塞試管中，精密加入5%苯酚溶液1mL，搖勻;再精密加硫酸5mL，搖勻。置沸水浴中加熱20min，取出，置冰浴中冷卻5min。以1mL水按同樣顯色操作為空白，分別在490nm 波長處測定吸光度。以葡萄糖濃度（μg/mL）為橫坐標，吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程，y=0.0089x+0.0195，r=0.9997，表明葡萄糖在18.24～91.20μg/mL范圍內(nèi)線性關系良好。

2.2.4 精密度試驗 精密吸取供試品溶液1mL，按“2.2.3項”下的方法操作，連續(xù)測定6次，吸光度RSD值為0.04% ，表明儀器精密度良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗 精密吸取供試品溶液1mL，按“2.2.3項”下的方法操作，分別于0、30、60、90、120min測定吸光度，吸光度RSD值為0.05%，表明在120min內(nèi)樣品具有良好的穩(wěn)定性。

2.2.6 重復性試驗 稱取太子參（粉碎過3號篩）0.1g，6份，精密稱定，按“2.2.3項”下方法制備樣品溶液，按“2.2.3項”下方法測定吸光度并計算多糖含量，結(jié)果太子參中多糖平均含量為34.39%，RSD為2.30%，表明該方法重復性良好。

2.2.7 加樣回收試驗 精密稱取已知含量的太子參（粉碎過3號篩）0.0500g，9份，精密稱定，分別加入葡萄糖對照品適量，使得高、中、低濃度對照品加入量與供試品中多糖含量之比約為0.5∶1、1∶1、1.5∶1各3份，按“2.2.2項”下方法制備樣品溶液，按“2.2.3項”下方法測定吸光度并計算回收率。多糖的平均加樣回收率為97.03%、101.13%、102.15%。

2.2.8 樣品多糖含量測定 分別稱取“柘參2號”與“柘參3號”太子參（粉碎過3號篩）0.1000g，精密稱定，每個批次平行3份，按“2.2.2項”下方法制備樣品溶液，按“2.2.3項”下方法測定吸光度，計算各批次太子參藥材中多糖含量。

2.3 結(jié)果 “柘參2號”與“柘參3號”太子參水溶性浸出物及多糖含量測定結(jié)果由表1、表2可知，兩個品種太子參水溶性浸出物含量范圍在29.78%～45.83%之間，其中“柘參2號”太子參浸出物含量范圍主要在32%～36 %之間，“柘參3號”太子參浸出物含量范圍主要在38%～42%之間;兩個品種太子參多糖含量范圍在31.14%～41.48%之間，其中“柘參2號”太子參多糖含量范圍主要在31%～35 %之間，“柘參3號”太子參多糖含量范圍主要在35%～40%之間。

3 結(jié)論

浸出物可反映藥材中化學成分總體積累水平，2015年版《中華人民共和國藥典》要求太子參水溶性浸出物含量不得低于25%，其在太子參品質(zhì)檢測中作為一項重要的衡量標準[3]。本研究分別進行“柘參2號”和“柘參3號”15批次太子參的水溶性浸出物測定，其含量均符合藥典要求。“柘參3號”太子參浸出物和多糖含量均顯著高于“柘參2號”，說明新品種“柘參3號”太子參在浸出物、多糖含量指標方面優(yōu)于“柘參2號”。

多糖是太子參中一類重要的水溶性成分，也是太子參中重要的有效成分。國內(nèi)學者及本課題組研究表明，太子參多糖抗心肌缺血、增強人體免疫力，具有降低血糖、血脂、改善胰島素抵抗等作用[4-7];已有較多學者研究太子參中多糖含量，以此作為太子參質(zhì)量評價的重要指標之一[8-11]。研究通過對“柘參2號”與“柘參3號”太子參水溶性浸出物和多糖含量的測定，考察了“柘參2號”與“柘參3號”新品種太子參浸出物和多糖含量的差異性，“柘參3號”太子參在浸出物、多糖含量指標方面優(yōu)于“柘參2號”。

綜上，本研究從多糖及浸出物含量兩個指標，初步考察“柘參3號”太子參的質(zhì)量信息，為評價太子參新品種質(zhì)量提供一定的數(shù)據(jù)基礎;為客觀反映新品種質(zhì)量，還應從活性化學成分、藥效學等多方面進行深入系統(tǒng)研究。

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（收稿日期：2018-11-28 編輯：程鵬飛）