營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)皖西白鵝育肥早期腸道功能及血液指標(biāo)的影響

江 幸， 李升和， 胡倩倩， 任 曼， 吳 旭， 張 旭

(安徽科技學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，安徽 鳳陽(yáng) 233100)

皖西白鵝是我國(guó)地方優(yōu)良的中型鵝品種，以體型大，生長(zhǎng)發(fā)育快，抗病力強(qiáng)，肉質(zhì)好等特點(diǎn)而聞名[1]。其羽絨產(chǎn)量高、品質(zhì)好，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高，具有廣闊的養(yǎng)殖前景。此外，皖西白鵝耐粗飼，前期生長(zhǎng)較快，在農(nóng)村較粗放的飼養(yǎng)條件下，30日齡仔鵝體重可達(dá)以上1.5 kg以上，60日齡達(dá)3.0～3.5 kg左右。成年公鵝平均體重6.8 kg，最大公鵝可達(dá)9.5 kg以上，母鵝平均體重5.0～6.0 kg。8月齡放牧飼養(yǎng)和不催肥的鵝，其半凈膛和全凈膛屠宰率分別為79%和72.8%[2]。而目前皖西白鵝缺乏營(yíng)養(yǎng)需要量標(biāo)準(zhǔn)，國(guó)內(nèi)皖西白鵝飼料一般參考雞、鴨以及國(guó)外品種鵝營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行配制，因而易造成皖西白鵝營(yíng)養(yǎng)過?；驙I(yíng)養(yǎng)缺乏。營(yíng)養(yǎng)水平過高，會(huì)造成機(jī)體營(yíng)養(yǎng)利用效率降低，浪費(fèi)資源，污染環(huán)境；營(yíng)養(yǎng)水平過低，機(jī)體則會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)發(fā)育不良，甚至抑制生長(zhǎng)，影響經(jīng)濟(jì)效益[3]。能量和蛋白質(zhì)是動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育過程中重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，皖西白鵝的能量和蛋白需要會(huì)隨著體重、年齡、生產(chǎn)時(shí)期及所處環(huán)境不同而發(fā)生變化。能量是配制飼糧的首要營(yíng)養(yǎng)因素，是確定其他營(yíng)養(yǎng)素的基礎(chǔ)[4]。能量需要分為維持需要、生長(zhǎng)需要、生產(chǎn)需要等幾個(gè)不同生產(chǎn)階段，能量過高或過低對(duì)鵝都有不良的影響。蛋白質(zhì)是一切生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，是構(gòu)成家禽體細(xì)胞的重要組成部分，約占細(xì)胞干重的50%以上。蛋白質(zhì)在鵝的生長(zhǎng)、肌肉發(fā)育、組織修復(fù)以及皮膚和絨毛的更新起到重要作用，蛋白的攝入量也要適宜，過多或過少都不利于鵝的生長(zhǎng)發(fā)育[5-7]。本試驗(yàn)擬探討不同能量蛋白水平對(duì)皖西白鵝腸道功能和血液指標(biāo)的影響，初步研究能量和蛋白質(zhì)對(duì)皖西白鵝的作用，以期為建立皖西白鵝營(yíng)養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)提供參考，進(jìn)而降低皖西白鵝生產(chǎn)成本和增加養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料與方法

1.1 供試材料與主要儀器

皖西白鵝及飼料均購(gòu)自于六安市金安區(qū)飛翔皖西白鵝遺傳資源保護(hù)中心；α-淀粉酶試劑盒(C-016)和胰蛋白酶試劑盒(A080-2)均購(gòu)自于南京建成生物工程研究所；獸用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀(BC-200Vet)(北京曼程科技有限公司)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方案

從鵝群中選擇體重接近、符合該品種特征的健康活潑仔鵝360只，隨機(jī)分成6組，每組60只。采用2×3因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，即設(shè)定2個(gè)代謝水平(ME12.30 MJ/kg、ME11.75 MJ/kg)和3個(gè)粗蛋白質(zhì)水平(CP16.3%，14.3%)的日糧，各組飼糧代謝能和粗蛋白質(zhì)水平詳見表1。試驗(yàn)日糧為玉米-豆粕型飼糧，原料為玉米、豆粕、統(tǒng)糠、麥麩、石粉等。

表1 各試驗(yàn)組日糧能量蛋白水平

1.3 飼養(yǎng)管理與樣品采集

試驗(yàn)鵝全期均為舍內(nèi)飼養(yǎng)，自由采食和飲水，其他飼養(yǎng)管理措施按鵝場(chǎng)常規(guī)要求進(jìn)行，每日打掃圈舍衛(wèi)生，保持舍內(nèi)通風(fēng)，定期消毒，每日注意觀察試驗(yàn)鵝的采食與健康等情況。60日齡時(shí)，每組隨機(jī)選取健康試驗(yàn)鵝6只，翅根采血約2 mL放入抗凝管，于4 ℃保存?zhèn)溆谩ｋS后，鵝頸靜脈放血致死，立即解剖取空腸，將腸道組織置于液氮中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 血液生理指標(biāo) 從4 ℃冰箱取出抗凝管測(cè)定血液生理指標(biāo)。測(cè)定白細(xì)胞(WBC)數(shù)、紅細(xì)胞(RBC)數(shù)、血紅蛋白(HGB)濃度、紅細(xì)胞積壓(HCT)、紅細(xì)胞平均積壓(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細(xì)胞分布寬度(RDW)、血小板(PLT)、平均血小板體積(MPV)、血小板體積分布寬度(PDW)等11 個(gè)指標(biāo)，以上指標(biāo)均采用獸用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀進(jìn)行測(cè)定。

1.4.2 空腸酶活性 取出冷凍空腸，按W∶V = 1∶10生理鹽水稀釋，組織勻漿10 min，用4 ℃離心機(jī)10 000 r/min 離心15 min，取上清液，使用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒分別測(cè)定其脂肪酶、二糖酶(蔗糖酶、乳糖酶和麥芽糖酶)、消化酶(α-淀粉酶、胰蛋白酶)活性。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，并采用Duncan's進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同能量蛋白水平日糧對(duì)皖西白鵝空腸酶活性的影響

由表2可知，試驗(yàn)Ⅳ組皖西白鵝空腸麥芽糖酶活性顯著高于試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ組(P<0.05)；各試驗(yàn)組間蔗糖酶、乳糖酶、淀粉酶與胰蛋白酶活性差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)Ⅰ組淀粉酶活性最高，試驗(yàn)Ⅵ組淀粉酶活性最低，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ組淀粉酶活性相接近，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ組的淀粉酶活性比較接近。試驗(yàn)Ⅳ組胰蛋白酶活性最高，試驗(yàn)Ⅴ組胰蛋白酶活性最低，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅵ組胰蛋白酶活性相接近，試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ組的胰蛋白酶活性相接近?？傮w來看，麥芽糖酶活性的高低趨勢(shì)為Ⅳ組>Ⅲ組>Ⅴ組>Ⅰ組>Ⅱ組>Ⅵ組，脂肪酶活性的高低趨勢(shì)為試驗(yàn)Ⅰ組>Ⅱ組>Ⅳ組>Ⅵ組>Ⅲ組>Ⅴ組。

表2 不同能量蛋白水平日糧對(duì)皖西白鵝空腸酶活性的影響

注：同行數(shù)據(jù)上標(biāo)不同字母者表示差異顯著(P<0.05)。下同。

2.2 不同能量蛋白水平日糧對(duì)皖西白鵝血液生理指標(biāo)的影響

由表3可知，在60日齡時(shí)，試驗(yàn)各組飼料配方對(duì)皖西白鵝血液中WBC數(shù)、HGB濃度、PLT數(shù)、MPV、PDWD的影響均不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)Ⅵ組RBC數(shù)、HCT與Ⅴ組相比，差異不顯著(P>0.05)；但與其他試驗(yàn)組相比，顯著降低(P<0.05)。試驗(yàn)Ⅵ組MCV高于其他試驗(yàn)組，且顯著高于試驗(yàn)Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ組(P<0.05)。試驗(yàn)Ⅵ組MCH、MCHCY高于其他試驗(yàn)組，且顯著高于Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組(P<0.05)。試驗(yàn)Ⅴ組PDW高于其他組，顯著高于試驗(yàn)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組(P<0.05)。

表3 不同能量蛋白水平日糧對(duì)皖西白鵝血液生理指標(biāo)的影響

3 結(jié)論與討論

3.1 不同能量蛋白水平日糧對(duì)皖西白鵝空腸酶活性的影響

家禽對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收主要是在小腸三段，飼料經(jīng)過胃蠕動(dòng)的物理消化成為食糜，進(jìn)入腸道進(jìn)行進(jìn)一步消化吸收。腸道消化酶是參與腸道消化的內(nèi)源性酶的總稱，它們各司其職，可有效促進(jìn)食糜中糖類、脂類以及蛋白類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收[8-10]。腸道消化酶活性越高，則機(jī)體對(duì)日糧營(yíng)養(yǎng)的吸收越充分[11]；畜禽攝入體內(nèi)的養(yǎng)分主要靠各種酶進(jìn)行水解吸收，而胰蛋白酶在蛋白質(zhì)水解過程中起重要作用，是家禽飼料氨基酸消化的重要消化酶[12]。禽類小腸腸道中主要是蔗糖酶和麥芽糖酶。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)Ⅳ組的胰蛋白酶活性為236.87 U/mL，高于其他五組，但不顯著(P>0.05)；而各試驗(yàn)組蔗糖酶與乳糖酶活性無明顯差異。這可能是由于日糧蛋白質(zhì)水平升高，動(dòng)物機(jī)體腸道消化分泌系統(tǒng)刺激加強(qiáng)，蛋白酶原被激活，引起蛋白酶合成增加，進(jìn)而增強(qiáng)了胰蛋白酶的活性，同時(shí)，胰蛋白酶對(duì)其他酶也有活化作用。因此表現(xiàn)出隨著蛋白質(zhì)水平的升高，胰蛋白酶活性增強(qiáng)，而淀粉酶和脂肪酶的活性無明顯變化，官麗輝等[13]研究表明日糧能量蛋白水平可影響消化酶活性，也證實(shí)了這一觀點(diǎn)。試驗(yàn)Ⅳ組的胰蛋白酶活性為236.87 U/mL，高于其他五組，但不顯著(P>0.05)；試驗(yàn)Ⅴ組的麥芽糖酶活性為392.64U/mL，顯著高于Ⅰ組(P<0.05)，這可能是由于蛋白質(zhì)也參與粘膜二糖酶的水平調(diào)節(jié)[14]，張?jiān)苿偟萚15]研究發(fā)現(xiàn)高蛋白日糧可使動(dòng)物二糖酶活力下降，低蛋白或無蛋白日糧均顯著降低大鼠體內(nèi)二糖酶的活性。從總體看，消化酶活性隨能量蛋白水平的升高先升后降，與吳勝利等[16]研究結(jié)果相近。這可能是由于能量蛋白水平不超出機(jī)體吸收閾值時(shí)，對(duì)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育有促進(jìn)作用；當(dāng)能量蛋白水平超出機(jī)體吸收閾值時(shí)，腸道無法消化過量能量蛋白質(zhì)，導(dǎo)致能量沉積，蛋白質(zhì)浪費(fèi)，從而抑制生長(zhǎng)。

3.2 不同能量蛋白水平日糧對(duì)皖西白鵝血液生理的影響

血液生理指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體健康狀態(tài)的重要指標(biāo)之一，RBC、WBC是血液生理指標(biāo)中判斷貧血的主要指標(biāo)，不同能量蛋白水平日糧可以影響機(jī)體血液中對(duì)WBC、RBC的合成[17-18]。血液生理指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體健康狀態(tài)的重要指標(biāo)之一，目前日糧能量蛋白水平對(duì)皖西白鵝血液生理指標(biāo)影響的相關(guān)報(bào)道極少。RBC是血液中含量最多的血細(xì)胞，能夠反映動(dòng)物機(jī)體血液運(yùn)輸氧氣和二氧化碳的能力。MCV、MCH、MCHC、RDW分別反映了紅細(xì)胞的體積大小、色素含量、色素飽滿度和變異程度；MCV、MCH、MCHC被稱為貧血三項(xiàng)，是鑒定貧血的重要指標(biāo)[19]。本研究中試驗(yàn)各組RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW含量有明顯差異(P<0.05)，RBC、HCT均隨日糧能量水平的提高而線性降低，這可能是由于日糧能量水平的提高，促進(jìn)了機(jī)體血液循環(huán)速率，從而加快其對(duì)氧的交換速率，使得在維持相同氧需要的前提下，所需要的RBC數(shù)目和HCT含量減少。雖然各試驗(yàn)組WBC、PLT 、MPV、RDW等指標(biāo)均無顯著差異，說明日糧能量水平對(duì)皖西白鵝血液免疫細(xì)胞的影響不明顯；但隨日糧能量水平的提高，試驗(yàn)各組均呈現(xiàn)出線性降低的趨勢(shì)，這可能是因?yàn)樵诘湍芰康鞍姿较?，機(jī)體代謝狀況較高能量水平日糧組差，刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，從而使血液免疫細(xì)胞數(shù)目增加[20]。

綜上所述，本研究結(jié)果顯示30日齡皖西白鵝生長(zhǎng)的最佳能量蛋白水平日糧為代謝能水平11.75 MJ/kg、日糧粗蛋白質(zhì)水平16.3%。