抗核抗體和抗核抗體譜聯(lián)合檢測在自身免疫性疾病診斷中的臨床應(yīng)用

李春江 周玉英 劉艷平 謝 瑤 王 蕊 劉曉彤

（1 沈陽迪安醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司，遼寧 沈陽 110141；2 山西迪安醫(yī)學(xué)檢驗中心，山西 呂梁 033306）

AID檢測中最重要的就是自身抗體的檢測[1]。隨著生物學(xué)的快速發(fā)展，AID的特異性抗體不斷地被發(fā)現(xiàn)與利用AID檢測中，大大提高了AID的確診率[2]。IIF檢測ANA及其熒光模型在AID診斷與鑒別中，是最重要的篩選檢測，是公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)檢驗[3]。近年來也有許多機(jī)構(gòu)將IBT用于檢測AID中，故本次研究探討了IIF-ANA、IBT-ANAs聯(lián)合檢測應(yīng)用于AID的臨床診斷鑒別中的重要性與必要性，減少AID漏診、誤診，提高檢驗準(zhǔn)確?，F(xiàn)將研究的結(jié)果做出如下報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料：實驗資料選擇2017年2月至2018年8月之間我實驗室收集的2000例患者的血清樣本分別采用免疫熒光法（IIF）與免疫印跡法（IBT）進(jìn)行ANA與ANAs檢測。患者的平均年齡為（45.64±12.68）歲，其中男性患者1200例，女性患者800例。將兩組患者的一般資料進(jìn)行對比，組間對比結(jié)果差異小，沒有統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性（P＞0.05）。

1.2 實驗方法

1.2.1 IIF-ANA檢測：ANA檢測采用IIF，HEP-2（細(xì)胞/猴肝切片）為基質(zhì)，操作嚴(yán)格要求無菌。標(biāo)本的稀釋濃度設(shè)置為1：100.熒光片采用Olympus-BX42型顯微鏡進(jìn)行觀察后將ANA檢測結(jié)果與ANAs檢測結(jié)果進(jìn)行對比[4]。

1.2.2 IBT-ANAs檢測：ANAs檢測采用IBT。其中特異性抗體包括：IBT_ANAs檢測ANAs檢測采用IBT。檢測的項有Sm、AMA-M2、nRNP/Sm、組蛋白、Jo-1、SS-A、R0-52、核糖體p蛋白、PCNA、SS-B、PM-Scl、CENP-B、dsDNA、核小體、Scl-70等。操作嚴(yán)格要求無菌。采用全自動免疫印跡儀檢測。檢測后采用Lide100掃描儀掃描結(jié)果后用EUROLineScan自動判別軟件自動判定[5]。

1.3 數(shù)據(jù)處理：在本次研究中，使用SPSS20.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料以（±s）進(jìn)行表示，采用t檢驗法。計數(shù)資料，采用卡方檢驗法。若P＜0.05則認(rèn)為二者差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2000份血清樣中共有1270例ANA陽性血清，ANA陽性率63.5%（1270/2000）。ANA滴度與ANAs及確診AID例數(shù)的關(guān)系，見表1。

表1 IBT-ANAs結(jié)果與IIF-ANA結(jié)果對照表

2000份血清樣中共有1060例ANA陽性血清，ANAs陽性率53%（1060/2000）。抗體單項陽性率分別為Sm2.83%、AMA-M21.89%、nRNP/Sm1.89%、Jo-12.36%、SS-A22.6%、R0-5223.58%、PCNA2.36%、SS-B2.83%、PM-Scl4.34%、dsDNA4.34%、CENP-B 1.98%、Scl-70 1.60%、核糖體p蛋白 1.60%、組蛋白20.75%、核小體2.1%；抗兩種以上抗體的陽性率為占 75.47%（800/1060）。單項陽性抗 體最多的三個為：SS-A、Ro52以及組蛋白。見表2。

表2 ANAs陽性檢測率對比表

3 討 論

檢驗自身抗體是診斷AID的重要指示指標(biāo)。血清中每一種AID指標(biāo)都具有一定的特征性的自身抗體譜。血清中高效價的自身抗體都是AID的特異質(zhì)指標(biāo)值之一，也是臨床醫(yī)學(xué)診斷的主要依據(jù)。ANA是真核細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)。細(xì)胞膜等多重組合成分自身抗體的總稱，不同的AID有不同的抗核抗體譜。

IIF檢測是檢驗ANA的金標(biāo)準(zhǔn)，是實驗室檢查自身抗體的最主要方法。在各大檢驗實驗室以及醫(yī)院檢驗科均采用該方法進(jìn)行檢驗。彼此實驗中的IIF檢驗共進(jìn)行了2000份血樣篩查，共篩查出1270例ANA陽性患者，，ANA陽性率63.5%（1270/2000）。

本次研究中，ANA滴度?1：1000的陽性率最高達(dá)到了92%（460/500）；其次是ANA滴度≥1∶320的陽性率最高達(dá)到了82%（320/390）；第三為ANA滴度≥1∶100的陽性率最高達(dá)到了53.85%（220/260）。ANAs檢測2000份血清樣中共有1060例ANA陽性血清，ANAs陽性率53%（1060/2000）。抗體單項陽性率分別為Sm2.83%、AMA-M21.89%、nRNP/Sm1.89%、Jo-12.36%、SS-A22.6%、R0-5223.58%、PCNA2.36%、SS-B2.83%、PM-Scl4.34%、dsDNA4.34%、CENP-B 1.98%、Scl-70 1.60%、核糖體p蛋白 1.60%、組蛋白20.75%、核小體2.1%；抗兩種以上抗體的陽性率為占75.47%（800/1060），上述研究結(jié)果說明兩種方法中，ANA檢測具有高度靈敏度，ANAs檢測具有強(qiáng)特異性。

綜上所述，IIF對于血清樣本中ANA的敏感性高，IBT針對血清中ANAs的特異性好，二者聯(lián)合檢驗可減少AID的漏診與誤診，提高檢驗準(zhǔn)確率，值得應(yīng)用。