從熱敏通道角度理解芳香開竅法在癲癇中的應(yīng)用?

郭 蓉，劉珍洪，高 蔚，佟海英，楊 楨

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029)

癲癇中醫(yī)稱之為“癇證”，發(fā)作時(shí)有短暫的意識(shí)喪失，常年不愈的患者會(huì)對(duì)心智產(chǎn)生嚴(yán)重影響。全世界約有5000萬人(占人口的2%～3%)受到的影響，并且嚴(yán)重影響生活質(zhì)量[1]。癲癇發(fā)病的現(xiàn)代機(jī)制尚未完全闡明，中醫(yī)對(duì)癇證的治療歷史久遠(yuǎn)且治法復(fù)雜多樣，開竅醒神治法是其中的一個(gè)重要治法，在臨床上廣泛應(yīng)用。開竅醒神宜用芳香類中藥，具有代表性的芳香類中藥諸如麝香、冰片、石菖蒲、辣椒、薄荷、肉桂、丁香都有芳香氣味，五味屬辛，以它們?yōu)橹鹘M成的開竅劑在癲癇治療中作用顯著。熱敏通道(Thermo-sensitive TRP Channels)是對(duì)溫度敏感的一類TRP通道(Transient Receptor Potential，瞬時(shí)受體電位)，一些芳香類中藥活性成分是熱敏通道激動(dòng)劑或抑制劑[2]。熱敏通道在控制癲癇的腦區(qū)有大量分布，其鈣通道屬性與癲癇鈣離子內(nèi)流異常密切相關(guān)，并且參與神經(jīng)遞質(zhì)(谷氨酸、γ-氨基丁酸)釋放的調(diào)控，這為其在癲癇發(fā)生與治療中的作用提供了基礎(chǔ)。本文從熱敏通道角度，就芳香類中藥發(fā)揮開竅醒神功效在癲癇治療中的作用進(jìn)行了關(guān)聯(lián)性研究。

1 癲癇與芳香開竅法

1.1 癲癇與竅閉

癲癇俗稱“羊癲風(fēng)”或“羊癇風(fēng)”，屬于中醫(yī)學(xué)“癲疾”“癇證”等范疇?！段迨》健肥怯涊d癲癇病名最早的書籍，其中有關(guān)于“嬰兒病癇”的描述[3]。癲癇大發(fā)作來勢(shì)更為兇猛，發(fā)作時(shí)患者以意識(shí)喪失、突然摔倒為早期表現(xiàn)，之后會(huì)發(fā)展為全身骨骼肌強(qiáng)直、陣攣、角弓反張、瞳孔散大、口中尖叫、呼吸停止等癥狀[4]。正如《靈樞·癲狂》所云：“癲疾始作，先反僵，因而脊痛”及“癲癇始作，而引口啼呼喘悸者”?！吨T病源候論》曰：“卒發(fā)仆也，吐涎沫，口，目急，手足繚戾，無所覺知，良久乃蘇。[5-6]”本病的病因多責(zé)之于先天稟賦不足，七情失調(diào)，腦部外傷，飲食不節(jié)，勞累太過，久病耗損導(dǎo)致痰濁阻滯，蒙蔽心腦二竅。癲癇致病的根源涉及驚、風(fēng)、痰、瘀[7]。神智改變是癲癇發(fā)作的重要標(biāo)志。在癲癇發(fā)作初期，標(biāo)實(shí)癥狀顯著，按中醫(yī)“急則治其標(biāo)，緩則治其本”的治療原則，癲癇神昏竅閉證當(dāng)以開竅醒神、平肝息風(fēng)、豁痰通竅急救。

1.2 開竅醒神法與辛香類中藥

發(fā)揮開竅醒神作用的中藥幾乎都是芳香類中藥。古代對(duì)芳香類中藥最早的文字記載始于《山海經(jīng)》，文中描述“熏草，配之可治病”。再者，《呂氏春秋通詮》載有五臭之說，香在其中，可見芳香屬于五臭的范疇。芳香類中藥的作用可整理歸納為芳香解表、芳香化濕、芳香溫里、芳香活血、芳香開竅五大類。其中芳香開竅藥辛香善走竄、有通九竅的功效，主要作用于心、腦等臟腑。芳香類中藥在嗅覺上都有芳香氣味，一般分子量小，現(xiàn)代研究顯示，此類藥物氣味中的有效成分通過鼻黏膜吸收進(jìn)入血液，透過血腦屏障發(fā)揮開竅醒神功效[8]。

以目前的《中藥學(xué)》教材為例，根據(jù)中藥性味歸經(jīng)理論，列舉常見開竅中藥如麝香(性溫、味辛，歸心、脾二經(jīng))、冰片(性辛苦、味微寒，歸心、脾、肺經(jīng))、石菖蒲(性辛、味溫，歸心、胃二經(jīng))、薄荷(性辛、味涼，歸肝、肺二經(jīng))、肉桂(性大熱、味辛，歸心、脾、肝、腎經(jīng))、丁香(性溫、味辛，歸脾、胃、腎經(jīng))，這些藥物具有芳香氣味，皆取其辛散之性，易走竄、有通九竅之功。

1.3 芳香開竅法在癲癇治療中的應(yīng)用

開竅醒神法也稱之為開竅法，是指運(yùn)用一些具有辛香走竄、通關(guān)開竅、蘇醒神志作用的藥物治療蒙蔽腦竅或邪閉心竅所導(dǎo)致的神志失常、神志不清以及元神失控的治法。開竅法始于張仲景《金匱要略》，并且提出“勿令九竅閉”的觀點(diǎn)[9]。

早在漢唐時(shí)期芳香開竅藥在癲癇治療中的選用即以出現(xiàn)。如保命丹(朱砂、琥珀、遠(yuǎn)志、南星、天竺黃、桔梗、麝香、冰片)中有芳香開竅藥的配伍使用。宋代芳香開竅法的發(fā)展明顯加快，有許多取用方便的中成藥流通?！短交菝窈蛣┚址健分兄委煱d癇之證的方劑至少有27個(gè)，如至寶丹、烏犀丸、牛黃清心丸、龍虎丹、碧霞丹、皂角丸、大圣保命丹、蘇合香丸、紫雪、妙香丸、耆婆萬病丸、返魂丹、清涼飲子、太乙丹等，部分藥物沿用至今。明清時(shí)期，對(duì)于癲癇的治療注重重鎮(zhèn)安神開竅醒神治法，如琥珀鎮(zhèn)心丸(《何氏濟(jì)生論》)中運(yùn)用石菖蒲、麝香、遠(yuǎn)志的配伍[10]。清代本草《本草述鉤元》中記載治癲癇風(fēng)疾：“九節(jié)菖蒲去毛，木臼搗末，以獖豬心一個(gè)批開，砂罐煮湯，調(diào)服三錢，日一服”用以開竅醒神。再者，清代著名開竅劑安宮牛黃丸具有清熱豁痰、開竅醒神的功效，已用于癲癇的治療。

現(xiàn)代芳香開竅法在臨床上使用較多的是安宮牛黃丸和由它而來的醒腦靜注射液。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明，安宮牛黃丸能對(duì)抗苯巴胺對(duì)小鼠的興奮作用，對(duì)大腦皮質(zhì)有抑制作用，能發(fā)揮抗癲癇、抗驚厥作用[11]?，F(xiàn)代臨床常用的醒腦靜注射液系安宮牛黃丸衍化而來的中藥復(fù)方針劑，在藥物組成上保留著芳香類中藥的配伍，在功效上基本延續(xù)安宮牛黃丸開竅醒神、清熱解毒的功效?，F(xiàn)代臨床用醒腦靜注射液治療酒精中毒性癲癇32例，效果顯著[12]。

2 熱敏通道與癲癇發(fā)作的關(guān)系

2.1 熱敏通道在中樞的表達(dá)

在膜通道蛋白中，有一類蛋白對(duì)溫度敏感，是人體的溫度傳感器。除了協(xié)調(diào)與環(huán)境溫度的關(guān)系，熱敏通道參與不同層次的感覺生理，包括機(jī)械感覺、傷害感受、觸覺、味覺、嗅覺和視覺，在周圍和中樞神經(jīng)都有大量分布?，F(xiàn)已確認(rèn)，分布在感覺神經(jīng)元上的熱敏通道有12種，包括TRPV1～TRPV4、TRPM2、TRPM4、TRPM5、TRPM8、TRPC5和TRPA1等[13-14]。

癲癇發(fā)作的起始部位在海馬，進(jìn)而涉及多個(gè)大腦區(qū)域的神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。熱敏通道TRPV1/TRPA1在海馬各區(qū)廣泛分布，其中TRPV1在癲癇腦區(qū)如海馬CA1區(qū)和齒狀回中普遍表達(dá)[15]。

2.2 熱敏通道TRPV1在大腦中活化釋放谷氨酸

內(nèi)源性的大麻素在低劑量時(shí)是CB1受體的激動(dòng)劑，在高濃度下是TRPV1的激動(dòng)劑，這種激活在病態(tài)情況如炎癥、呼吸和心血管系統(tǒng)疾病時(shí)更加容易[16]。腦損傷、糖尿病和電磁輻射等氧化應(yīng)激產(chǎn)生的自由基物質(zhì)，如活性氧(ROS)以及活性氮(RNS)均能激活TRPV1[17]。在物理性因素如發(fā)熱情況下，TRPV1也會(huì)活化[16]。TRPV1通道在大腦中激活而釋放谷氨酸，而且TRPV1介導(dǎo)的谷氨酸釋放獨(dú)立于其他途徑動(dòng)作電位引起谷氨酸釋放，這種配置允許單獨(dú)的脂質(zhì)代謝物對(duì)谷氨酸釋放進(jìn)行獨(dú)立和相反的調(diào)節(jié)[18]。

2.3 熱敏通道鈣累積是癲癇發(fā)作的重要因素

幾種癲癇的動(dòng)物模型證明，TRPV1是癲癇發(fā)作的重要因素。顳葉癲癇小鼠模型中，TRPV1通道的表達(dá)增加，小鼠齒狀回興奮性回路的活性增加和TRPV1通道活化相關(guān)[19-20]。

圖1顯示，作為控制癲癇發(fā)作的海馬對(duì)包括Ca2+進(jìn)入的環(huán)境刺激高度敏感，海馬神經(jīng)元中的鈣離子累積認(rèn)為是癲癇發(fā)作的主要原因之一[21-22]。TRPV1是一種非選擇性通道，具有較高的Ca2+通透性[17]，TRPV1是海馬中的鈣透性通道，因此TRPV1可能介導(dǎo)癲癇的發(fā)生，研究結(jié)果證明海馬TRPV1通道活化在癲癇發(fā)作中鈣離子累積的作用[23]。另一方面，大量谷氨酸堆積于細(xì)胞內(nèi)外導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞過度興奮而發(fā)生異常放電，為癲癇發(fā)作提供了基礎(chǔ)[24]。谷氨酸能突觸上TRPV1通道活化可以增加谷氨酸釋放、增強(qiáng)谷氨酸誘導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)，延長(zhǎng)了突觸后刺激的持續(xù)時(shí)間[25]。TRPV1通道激動(dòng)劑辣椒素可以增加海馬谷氨酸誘導(dǎo)的自發(fā)興奮性突觸傳遞[19,26]；相反，TRPV1通道拮抗劑辣椒平(CPZ)和5'-碘樹脂毒素(IRTX)可以使之減少，因此，TRPV1通道可能是通過谷氨酸能系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用發(fā)揮的抗癲癇作用[27]。

圖1 海馬神經(jīng)元中TRPV1通道活化介導(dǎo)的癲癇發(fā)作分子模型[25]

3 芳香開竅的分子意義

3.1 熱敏通道是芳香開竅中藥的分子靶點(diǎn)

一些芳香類中藥諸如麝香、冰片、石菖蒲、辣椒、薄荷、肉桂、丁香等有芳香氣味，同時(shí)具有辛散之性，均能發(fā)揮開竅醒神的功效，適用于癲癇、中風(fēng)、郁證等病癥的治療。大部分芳香類中藥含有熱敏通道激動(dòng)劑或抑制劑，能夠激活或脫敏熱敏通道。激活TRPV1的如辣椒(辣椒素)、石菖蒲、胡椒、大蒜，激活TRPV3的如冰片(龍腦、樟腦)、丁香(丁香酚)、薄荷(薄荷醇)是TRPM8的激動(dòng)劑，而肉桂(肉桂醛)、冰片(樟腦)、芥末是TRPA1的激動(dòng)劑[28]。部分芳香中藥對(duì)2個(gè)或2個(gè)以上的通道發(fā)揮作用，如大蒜、薄荷、樟腦等。

芳香中藥中的許多有效成分是熱敏通道的配體，它們能敏化、脫敏或者抑制熱敏通道，發(fā)揮相應(yīng)的生理病理作用。辣椒(辣椒素)是熱敏通道TRPV1典型的激動(dòng)劑，相應(yīng)的研究顯示TRPV1通道激動(dòng)劑辣椒素對(duì)大鼠海馬腦片的癲癇活性增加，且這種活性被選擇性TRPV1通道拮抗劑碘樹脂毒素(IRTX)阻斷[29]；另一TRPV1通道拮抗劑辣椒平(Capsazepine，CPZ)也有抗癲癇作用[30-31]。

3.2 芳香中藥可改變血腦屏障通透性

使用TRPV1激動(dòng)劑辣椒素在坐骨神經(jīng)給藥，活化表達(dá)TRPV1的C-纖維，進(jìn)而導(dǎo)致血液脊髓屏障(BSCB)和血腦屏障(BBB)的廣泛開放[32]。這一效能使得許多根本無法進(jìn)入大腦的藥物可以進(jìn)入大腦發(fā)揮作用。芳香中藥中的麝香、石菖蒲、冰片和丁香也具有這樣的作用，這也可部分解釋“引經(jīng)藥”的原理。此外，冰片、麝香、蘇合香和石菖蒲均能進(jìn)入血腦屏障，與熱敏通道相互作用發(fā)揮藥理作用，調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)反應(yīng)[29]。

3.3 芳香中藥通過TRP通道改變中樞神經(jīng)的興奮性

芳香中藥的抗癲癇作用最終會(huì)影響大腦的興奮性與抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。蘇合香、冰片、麝香和石菖蒲對(duì)大腦2種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)天冬氨酸和谷氨酸的水平、2種抑制性神經(jīng)遞質(zhì)甘氨酸和γ-氨基丁酸都有影響[29]。

蘇合香丸精油具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制作用，使用蘇合香丸精油吸入(芳香療法)，對(duì)戊四唑引起的驚厥，小鼠腦中的GABA水平顯著增加而谷氨酸含量顯著降低，結(jié)果表明這種精油的抗驚厥作用也可起源于小鼠腦中GABA水平的增加。因?yàn)榀d攣部分取決于GABA濃度，通過抑制GABA轉(zhuǎn)氨酶活性可以維持其濃度[33-34]。在體外癲癇模型中，辣椒素、丁香酚可以減少或消除癲癇樣活動(dòng)[35]。在紅藻氨酸癲癇模型中，辣椒素可以有效抑制癲癇的發(fā)生，并顯著降低紅藻氨酸誘導(dǎo)的腦中細(xì)胞因子IL-1β和TNF-α濃度[36]。

艾葉、青蒿、木香，沉香，檀香，乳香、龍蒿、百里香、玫瑰花、樟腦、甘菊、香茅、月桂、胡荽、纈草的精油均有鎮(zhèn)驚和抗驚厥作用，都能作用于GABA受體，同時(shí)，它們也都能作用于TRP熱敏通道[37]。

目前的研究結(jié)果顯示，抑制TRPV1的活性，減少癲癇發(fā)作時(shí)海馬和背根神經(jīng)節(jié)的鈣累積，是治療癲癇的重要方向[23]。芳香中藥在活化、脫敏和抑制熱敏通道方面有極其復(fù)雜的藥效，相關(guān)領(lǐng)域的深入研究可能最終揭開芳香開竅藥效的謎團(tuán)。

4 結(jié)語

開竅醒神法是中醫(yī)治療癲癇的重要治法，其功效主要是通過芳香類中藥的配伍實(shí)現(xiàn)的。部分芳香類中藥是熱敏通道激動(dòng)劑，熱敏通道可以介導(dǎo)癲癇的發(fā)生。芳香類中藥可以大大改變血腦屏障的通透性，使得部分藥物容易入腦；芳香中藥還能改變中樞興奮性神經(jīng)元和抑制性神經(jīng)元的活性，發(fā)揮抑制癲癇或驚厥的作用。因此，開竅醒神作用用于癲癇的治療可能是通過熱敏通道實(shí)現(xiàn)的。當(dāng)然，目前從分子層面對(duì)芳香類中藥在癲癇治療中的研究還很少，還需有更多的研究與實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證。另一方面，熱敏通道的敏化、脫敏與拮抗，其激動(dòng)劑種類與劑量產(chǎn)生的多模效應(yīng)，使得相關(guān)藥理作用撲朔迷離，中醫(yī)藥對(duì)癲癇的治療，或許能為這些研究提供借鑒。