長期應(yīng)用前列腺素類似物滴眼液對青光眼患者結(jié)膜菌群的影響

李繼英，崔宏宇，張志宏

0引言

青光眼屬視神經(jīng)損害性疾病，臨床癥狀表現(xiàn)為眼壓升高、虹視、視神經(jīng)損害、視野損害等，并可導(dǎo)致不可逆的致盲，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[1]。有效控制眼壓，改善視覺功能是治療青光眼的關(guān)鍵，拉坦前列素滴眼液是人工合成F2α類前列腺素，可降低原發(fā)性青光眼患者的平均眼壓及晝夜眼壓差，療效持續(xù)穩(wěn)定，是治療青光眼的常用藥物[2]。因?yàn)榍喙庋壑委煹淖罱K目標(biāo)是維持患者視覺功能，許多患者需接受拉坦前列素滴眼液長期治療，反復(fù)應(yīng)用滴眼液可影響角膜和結(jié)膜上皮。正常情況下，人結(jié)膜囊存在多種細(xì)胞，多為正常菌群或致病菌，了解長期應(yīng)用前列腺素類似物對本地區(qū)結(jié)膜囊細(xì)菌菌群的影響及其耐藥性，對眼部感染的防控具有重要意義。本研究選擇2016-06/2017-06在我院就診的連續(xù)應(yīng)用拉坦前列素滴眼液治療超過1a的69例青光眼患者作為研究對象，觀察長期應(yīng)用前列腺素類似物對結(jié)膜菌群的影響，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1對象和方法

1.1對象經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，選擇2016-06/2017-06在我院就診的應(yīng)用拉坦前列素滴眼液治療的青光眼患者69例113眼作為研究對象。其中男44例70眼，女25例43眼；年齡32～63(平均48.63±8.24)歲；眼內(nèi)壓25.87±4.26mmHg。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合青光眼的診斷標(biāo)準(zhǔn)，接受拉坦前列素滴眼液單藥治療；(2)年齡18～70歲，性別不限；(3)患者對研究知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)青光眼手術(shù)史、入組前2wk曾全身或局部應(yīng)用抗生素治療；(2)存在或可疑細(xì)菌、真菌感染；(3)控制不良的眼部或全身基礎(chǔ)疾??；(4)精神疾病、認(rèn)知功能障礙，不能正確理解研究內(nèi)容者；(5)擬納入或已納入其他臨床研究者。

1.2方法所有患者均應(yīng)用拉坦前列素滴眼液(規(guī)格：125μg∶2.5mL)1滴/次治療，1次/d，治療時間>1a，采用每周微信溝通、每2wk 1次電話，每月1次門診的方式隨訪，隨時觀察患者眼表健康，對于中途自行應(yīng)用其他藥物者予以剔除。所有患者分別于入組后、用藥3mo，1a時采用無防腐劑鹽酸奧布卡因滴眼液(國藥準(zhǔn)字H20056587，規(guī)格：0.5mL∶2.0mg)局部浸潤麻醉，采用無菌棉拭子對結(jié)膜囊凸表面，標(biāo)本置入培養(yǎng)皿中，4℃～8℃存儲。細(xì)菌培養(yǎng)：采集的標(biāo)本接種于血平板和巧克力平板上，用(35±2)℃、5% CO2孵育24h。采用SCAN4微生物分析儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定。藥敏試驗(yàn)：根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(NCCLS)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)采用左氧氟沙星、加替沙星、莫西沙星、頭孢甲肟、頭孢他啶、妥布霉素、氯霉素和紅霉素作為目標(biāo)抗生素測定抗生素的敏感性，分為敏感、中介和耐藥，敏感所占株數(shù)與總株數(shù)所占百分比為敏感性，表皮葡萄球菌苯唑西林最小抑菌濃度≤2μg/mL表明對甲氧西林敏感的表皮葡萄球菌(MSSE)，≥4μg/mL表明為耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；若理論頻數(shù)<5則采用Fisher確切概率法檢驗(yàn)，入組時、用藥3mo、用藥1a多組間兩兩計(jì)數(shù)資料比較調(diào)整α水平為原α水平與組間兩兩比較次數(shù)的比值，即P<0.0167為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1患者不同時間細(xì)菌和耐藥菌檢出率入組時、用藥3mo，1a時檢出細(xì)菌例數(shù)分別為63、66、67例，組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.496，P=0.287)?；颊呷虢M時、用藥3mo，1a時表皮葡萄球菌、鏈球菌屬、金黃色葡萄球菌、人葡萄球菌、溶血葡萄球菌、莫拉菌屬等檢出率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；用藥3mo時MRSE比率高于入組時，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.461，P=0.063)，用藥1a時MRSE比率高于入組時和用藥3mo時，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=38.945、24.984，均P<0.001)，見表1。

2.2不同時間患者表皮葡萄球菌對不同抗生素敏感性用藥3mo時表皮葡萄球菌對左氧氟沙星、加替沙星、莫西沙星、頭孢他啶、妥布霉素、頭胞甲肟、紅霉素的敏感性均低于入組時，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.0167)，對氯霉素敏感性低于入組時，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0167)；用藥1a時表皮葡萄球菌對左氧氟沙星、加替沙星、莫西沙星、頭孢他啶、頭孢甲肟、妥布霉素、氯霉素、紅霉素敏感性低于入組時和用藥3mo時，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.0167)，見表2。

3討論

青光眼是以特異性視神經(jīng)損害和眼壓升高為主要特征的臨床癥候群，是全球第2大致盲性眼病，有效控制眼壓和改善患者的視覺功能是治療青光眼的關(guān)鍵[3]。青光眼的治療措施包括藥物、激光、手術(shù)治療等方式，首選方式為局部藥物降眼壓治療[4]。拉坦前列素滴眼液是合成F2α類的前列腺素，屬于異丙酯前體，水解后形成富含生物活性的游離酸，激活位于睫狀肌和小梁網(wǎng)細(xì)胞中的前列腺素受體，松弛睫狀肌，增加肌間隙，同時基質(zhì)金屬蛋白酶活性增加，減少房水外流壓力，增加房水外流，降低眼壓，是臨床常用的治療藥物[5]。

青光眼治療的最終目標(biāo)是患者終生維持視覺功能，多數(shù)情況下，前列腺素類滴眼液需要長期應(yīng)用[2]。但因?yàn)榍傲邢偎仡惪骨喙庋鄣窝垡汉蟹栏瘎?，長期應(yīng)用可導(dǎo)致角膜結(jié)構(gòu)改變，易出現(xiàn)結(jié)膜炎、干眼癥等多種眼表疾病[6]。Panos等[7]、Arita等[8]研究均顯示，長期應(yīng)用含防腐劑的前列腺素類滴眼液可改變患者的角膜結(jié)構(gòu)，但較少見長期應(yīng)用前列腺素類似物對眼部菌群的影響。正常人角膜存在多種細(xì)菌，多數(shù)為正常菌群或條件致病菌，眼表微環(huán)境和機(jī)體狀態(tài)發(fā)生改變時，可導(dǎo)致眼內(nèi)炎癥的發(fā)生[9]。研究[10]顯示，正常人群分離出的細(xì)菌如表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、棒狀桿菌等屬于正常菌群，無致病性或偶有致病性，但部分細(xì)菌瞼板炎、結(jié)膜炎等感染性疾病致病菌與結(jié)膜分離細(xì)菌一致，表皮葡萄球菌成為首位致病菌。本研究結(jié)果顯示，入組時、用藥3mo，1a時患者表皮葡萄球菌均占檢出菌第一位，與王瑾等[11]研究結(jié)果一致，進(jìn)一步證實(shí)表皮葡萄球菌的高檢出率。此外革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的檢出率沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但三組的MRSE和MSSE分布存在差異，用藥1a時MRSE比率顯著高于用藥3mo和入組時。任春陽等[12]在研究中表示，表皮葡萄球菌檢出率居于首位為64.84%，且結(jié)膜囊細(xì)菌對常用藥物耐藥性逐年上升，敏感性逐年下降，與廣譜類抗生素的應(yīng)用時間和頻次有密切的關(guān)系。而本研究中用藥3mo時表皮葡萄球菌對左氧氟沙星、加替沙星、莫西沙星、頭孢他啶、妥布霉素、紅霉素、頭孢甲肟、氯霉素敏感性均低于入組時；用藥1a時表皮葡萄球菌對左氧氟沙星、加替沙星、莫西沙星、頭孢他啶、頭孢甲肟、妥布霉素、氯霉素、紅霉素敏感性低于入組時和用藥3mo時。結(jié)果提示，隨著抗生素用藥時間的延長，藥物的敏感性不斷下降，而長期應(yīng)用拉坦前列素滴眼液雖然不會影響結(jié)膜細(xì)菌的檢出率，但可引起表皮葡萄球菌的耐藥性變化。

表1 細(xì)菌和耐藥菌在不同時間檢出情況比較株

表2 不同時間患者表皮葡萄球菌對不同抗生素敏感性的比較株(%)

注：aP<0.0167vs入組時；cP<0.0167vs用藥3mo。

拉坦前列素滴眼液中含有添加劑0.02%苯扎氯銨，苯扎氯銨可通過細(xì)胞膜蛋白變性、酶抑制和增加膜通透性等多種機(jī)制殺傷細(xì)菌，具有顯著的抗菌性能和穩(wěn)定性，可防止滴眼液器皿內(nèi)的潛在污染[13]。研究顯示，正常濃度的苯扎氯銨作為防腐劑，不會導(dǎo)致細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性，可有效抑制容器中的細(xì)菌，但含有苯扎氯銨的滴眼液滴入后，苯扎氯銨濃度迅速被稀釋，滴眼后5min，濃度即降至初始濃度的10%甚至更低，此后隨時間延長而不斷降低，結(jié)膜細(xì)菌長期暴露于低濃度的苯扎氯銨，導(dǎo)致表皮葡萄球菌對苯扎氯銨的耐藥性增加，從而導(dǎo)致交叉耐藥，出現(xiàn)MRSE比率增加[14-15]。

綜上所述，長期應(yīng)用拉坦前列素滴眼液不會影響結(jié)膜菌群的檢出率，但可增加MRSE的發(fā)生率，臨床對需要長期應(yīng)用拉坦前列素滴眼液的患者應(yīng)綜合考慮，防止耐藥菌株產(chǎn)生，以防發(fā)生不可控制的感染。