論高效液相色譜法在食品添加劑檢測中的應用

摘 要：當前隨著我國市場經(jīng)濟社會的發(fā)展，食品生產(chǎn)公司規(guī)模不斷擴大，數(shù)量不斷增加，但是食品安全問題卻是一直存在的問題。因此，加強食品添加劑檢測對于保證食品安全是非常重要的。高效液相色譜法在檢測食品添加劑中發(fā)揮著重要的作用，它可以對食品中的添加劑是否超標進行嚴格的檢測。此次研究對高效液相色譜法的含義進行了闡述，且對該方法在食品添加劑檢測中的應用情況進行了闡述。

關鍵詞：高效液相色譜法;食品添加劑;檢測;應用

1 高效液相色譜法的原理與

特點

1.1 高效液相色譜法的原理

高效液相色譜法主要是指在高壓條件下溶質(zhì)在固定相與流動相之間進行連續(xù)多次交換的一個過程，它主要是利用兩相間的分子大小、吸附力、親和力、分配系數(shù)達到不同溶質(zhì)分離的目的。

1.2 高效液相色譜法的特點

從原理上進行分析，高效液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法之間并沒有本質(zhì)的區(qū)別，但是它使用了高效微粒固定相、高靈敏度檢測器、新型高壓輸液泵，這就使得高效液相色譜法與常規(guī)方法相比更具有優(yōu)勢。經(jīng)過不斷的發(fā)展，當前的高效液相色譜法在操作自動化、檢測靈敏度、分離效能、分析速度方面均達到了較好的效果，且樣品適用范圍較廣，可選擇的流動相種類較多[1]。主要優(yōu)勢為：通過高效微粒固定相可以使色譜分離效能顯著提高;使用新型的高壓輸液泵可以有效縮短分離時間;使用高靈敏度的檢測器可以顯著提高檢測靈敏度;高效液相色譜法的流動相、高柱效可以顯著改善分離過程，選擇性較高。

2 高效液相色譜儀

高效液相色譜儀主要由數(shù)據(jù)處理裝置、記錄儀、檢測器、色譜柱、進樣器、高壓輸液泵、貯液罐組成?；镜牟僮鞣椒椋嘿A液罐中的流動相通過高壓泵進入系統(tǒng)，樣品溶液通過進樣器進入流動相，后被流動相載入色譜柱中，由于樣品溶液中各組分在兩相中的分配系數(shù)不同，在相對運動時會重復進行吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上會發(fā)生較大的區(qū)別，被分離為單個組分，在檢測時，樣品的濃度會從電信號傳輸?shù)接涗泝x上，數(shù)據(jù)要通過圖譜形式打印出來[2]。

2.1 貯液罐

貯液罐的材料應該選擇耐腐蝕的材料，主要為特種塑料聚醚醚酮（PEEK）、氟塑料、不銹鋼、玻璃。容積大約為0.5～2.0 L。制備型儀器、凝膠色譜儀的容積應該更大一點。貯液罐放置貯液罐放置位置要高于泵體，且要保持相對的輸液靜壓差。在使用期間要對貯液罐進行密封，以防溶劑蒸發(fā)引起流動相組成發(fā)生變化，還可以有效防止空氣中的二氧化碳、氧氣重新溶解到已脫氣的流動相中。

2.2 高壓輸液泵

高壓輸液泵主要分為恒流泵、恒壓泵。高壓輸液泵的要求主要為：①泵體材料要選擇耐化學腐蝕的。通常使用的材料為優(yōu)質(zhì)耐酸不銹鋼、普通耐酸不銹鋼;②可以在高壓下連續(xù)工作，耐壓一般為40～50 MPa/cm，在這個條件下可以連續(xù)工作8～24 h;③輸出流量穩(wěn)定、重復性高;④輸出流量范圍寬。

2.3 色譜柱

色譜柱主要有固定相與柱管兩部分。柱壁材料主要為內(nèi)壁光滑的聚合材料、銅、鋁、不銹鋼、玻璃等。色譜柱內(nèi)徑為4～5 mm，長為5～30 cm，制備色譜柱內(nèi)徑>25 mm，凝膠色譜柱內(nèi)徑為3～12 mm。

2.4 檢測器

高效液相色譜法中檢測器的主要作用為監(jiān)視經(jīng)色譜柱分離后的組分濃度情況，描記的圖形主要是用于定量與定性分析，因此，檢測器要適應范圍廣、線性范圍寬、重復性好、靈敏度高，且要對溫度、流量變化變化不敏感。檢測器常用的為熒光檢測器（FD）、電導檢測器（ECD）、折光指數(shù)檢測器（RID）、紫外吸收檢測器（UVD）[3]。高效液相色譜中無通用檢測器，實際的應用要根據(jù)實際需求以及結(jié)合檢測器特點進行選擇與使用。

3 高效液相色譜法在食品添加劑檢測中的應用

食品添加劑主要是指為了改善食品的色香味、保鮮、防腐等在進行加工時加入的天然物質(zhì)或者是人工合成物質(zhì)。其主要有香精香料、抗氧化劑、天然或人工合成色素、甜味劑、防腐劑。天然食品添加劑對人體一般是沒有害處的，但是當前使用的添加劑一般是化學物質(zhì)合成的，且具有一定的毒性，如果不限制使用劑量，會對人體健康產(chǎn)生很大的危害。因此，對食品中的添加劑進行控制與檢測，有利于保證食品安全與人民身心健康。食品添加劑分析一般使用的方法為HPICE、IPC、RHPLC。使用較多的檢測器為紫外-可見光檢測器（UVD），其次是折光示差檢測器（RID）、電導檢測器（CD）、UVD-RID、UVD-CD檢測器串聯(lián)等。色譜柱一般為C18柱，其次為陰離子色譜柱。另外，在進行檢測時要對食品添加劑組分高度重視[4]。

（1）甜味劑檢測。高效液相色譜法可以對食品中的甜菊苷、甘草苷、安賽蜜、甜蜜素、甜味素、糖精鈉等多種成分進行檢測，測定人工合成甜味劑的主要方法為陰離子交換色譜法、RHPLC-UVD法、離子對色譜法。因

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此，常用的檢測器主要為CD、UVD。色譜柱主要為-NH2柱、陰離子交換柱、C18柱。

（2）防腐劑檢測。高效液相色譜法檢測防腐劑時方法簡單，結(jié)果準確。脫氫乙酸、羥基苯甲酸乙酯（丙酯）、CA、BA均使用RHPLC法測定。CA、BA、甜蜜素檢測使用UVD-RID串聯(lián)技術。

（3）有機酸檢測。一般使用RID、UVD檢測器，RHPLC法（C18柱）主要檢測琥珀酸、延胡索酸、檸檬酸、醋酸、蘋果酸、酒石酸、乳酸等;或者使用PICE法，電導檢測器主要是對焦谷氨酸、乙酰丙酸、乙酸、乳酸、甲酸、琥珀酸、丙酮酸、啤酒中檸檬酸、酸奶、醬油、葡萄酒進行測定。

（4）色素檢測。對人工合成色素與天然色素檢測時使用HPLC法，簡單方便。應用C18柱分離、HPLC-UVD梯度洗脫系統(tǒng)可以對亮藍、赤蘚紅、日落黃、胭脂紅、莧菜紅、檸檬黃、新紅進行測定。

（5）增白劑檢測。高效液相色譜法檢測過氧化苯甲酰的最小濃度為0.04 mg/kg。IC法主要是對各類食品中的H2SO3進行檢測。

（6）抗氧化劑檢測。使用RHPLC梯度洗脫方法對油脂中9種抗氧化劑進行檢測。最小濃度為2 mg/kg，或者使用高效液相色譜法對BHA、BHT、PG進行分離或者是檢測，該方法的回收率為84.0%、99.0%、95.0%。

（7）咖啡因檢測。應用C18反相體系UVD對飲料中的甜味素、咖啡因、糖精鈉、安賽蜜進行檢測，后三者的最小濃度大約為0.004 mg/mL，或者單獨對飲料中的咖啡因進行檢測。

4 結(jié)語

食品添加劑的種類較多，且發(fā)展速度較快，以往的檢測方法復雜，消耗的人力、物力較多。高效液相色譜法的發(fā)展與使用，提高了分離效率、分離速度、流動相的選擇范圍更加寬廣，靈敏度更高，不僅適用于分離，而且還適用于定量分析，在各種的化合物中，高效液相色譜法發(fā)揮了非常重要的作用。

參考文獻

[1]李卓，舒蕊華，張亞鋒，等.高效液相色譜法測定飲料中甜菊糖苷的不確定度評定[J].中國食品添加劑，2017

（3）：162-166.

[2]尹華.高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定飲料中6種食品添加劑[J].衛(wèi)生研究，

2017（6）：116-119，125.

[3]郭蓉，王彩霞，胡佳薇，等.陜西省8類市售食品中防腐劑和甜味劑的檢測結(jié)果與分析[J].現(xiàn)代預防醫(yī)學，2017（7）：

52-54，85.

[4]吉生軍，星玉秀，王靜瑩，等.青稞酒中53種塑料添加劑檢測研究[J].食品研究與開發(fā)，2018（1）：106-112.

作者簡介：周旭峰（1984—），男，廣東陽江人，本科，檢驗員。研究方向：食品檢測。