漿細(xì)胞性乳腺炎分期與相關(guān)炎性因子及其信號(hào)通路的機(jī)制研究

曹中偉*，王 瀟，尤廣寧，周 敏，馬新宇

（1．內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院甲乳外科，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010；2．內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究中心，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010）

漿細(xì)胞性乳腺炎是一種特殊類型的乳腺炎，主要發(fā)生于非妊娠和非哺乳期的女性[1-3］。大量漿細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)是漿細(xì)胞性乳腺炎的標(biāo)志[4］。近年來，漿細(xì)胞性乳腺炎的發(fā)病率逐漸上升[5］，然而其病因和發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚。

漿細(xì)胞來源于B淋巴細(xì)胞，在體液免疫應(yīng)答中起重要作用。白細(xì)胞介素-6（IL-6）是由淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和髓系細(xì)胞產(chǎn)生的炎癥敏感性細(xì)胞因子，可以激活JAK/STAT信號(hào)通路，進(jìn)而介導(dǎo)多種細(xì)胞功能[6］。腫瘤壞死因子α（TNF-α）通過將p65（Rela）DNA結(jié)合因子轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核來激活NF-κB因子，在炎癥、免疫等過程中起著重要的調(diào)控作用。這些炎性因子不僅對(duì)漿細(xì)胞的分化至關(guān)重要，而且對(duì)漿細(xì)胞的存活也有重要意義[7］。因此本文針對(duì)漿細(xì)胞性乳腺炎分期與相關(guān)炎性因子及其信號(hào)通路的機(jī)制進(jìn)行探究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年09月～2017年12月來我院就診的50例女性漿細(xì)胞性乳腺炎患者為研究對(duì)象，排除具有自身免疫性疾病、結(jié)核病史、乳腺其他疾病及感染者，近半年內(nèi)未使用免疫抑制劑。

1.2 觀察指標(biāo)

①免疫組化檢測(cè)手術(shù)切除漿細(xì)胞性乳腺炎組織中炎性因子TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表達(dá)水平。按照常規(guī)方法進(jìn)行評(píng)分；②實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)上述炎性因子的mRNA水平；③通過Western bloting技術(shù)檢測(cè)上述炎性因子的蛋白表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以Mean±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)評(píng)價(jià)相關(guān)值，P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般資料

50例漿細(xì)胞性乳腺炎患者年齡22～60歲，平均35.1±7.4歲，病程4天～5年，平均171.8±7.4天，單側(cè)發(fā)病46例，雙側(cè)發(fā)病4例。首發(fā)部位為乳頭乳暈區(qū)34例，外上象限3例，外下象限4例，內(nèi)上象限4例，內(nèi)下象限5例。

2.2 漿細(xì)胞性乳腺炎組織中炎性因子的表達(dá)水平

為探究相關(guān)炎性因子在組織層面的表達(dá)水平，采用免疫組化法檢測(cè)患者漿細(xì)胞性乳腺炎組織中TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，與慢性期的患者相比，急性期與亞急性期患者中TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表達(dá)水平顯著增加；差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1。

圖1 免疫組化法檢測(cè)炎性因子的表達(dá)水平

實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的mRNA水平。結(jié)果顯示與免疫組化檢測(cè)結(jié)果基本一致，與慢性期的患者相比，急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表達(dá)水平顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK的表達(dá)水平顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

圖2 實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)炎性因子的表達(dá)水平

通過Western bloting技術(shù)檢測(cè)上述因子的表達(dá)情況。結(jié)果顯示與慢性期的患者相比，急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表達(dá)水平顯著增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而急性期與亞急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK的表達(dá)水平有所增加。

圖3 Western bolt檢測(cè)炎性因子的表達(dá)水平

2.3 漿細(xì)胞性乳腺炎炎性因子相關(guān)信號(hào)通路的機(jī)制

通過檢測(cè)相關(guān)炎性因子的表達(dá)水平探討漿細(xì)胞性乳腺炎相關(guān)通路。結(jié)果顯示IL-6與p-STAT3染色呈顯著正相關(guān)（r=0.411，P=0.020）；TNF-α與NF-κB染色呈顯著正相關(guān)（r=0.408，P=0.025）。見表1、表2。

表1 漿細(xì)胞乳腺炎中TNF-α與NF-κB的相關(guān)性分析

表2 漿細(xì)胞乳腺炎中IL-6與p-STAT3的相關(guān)性分析

3 討 論

漿細(xì)胞性乳腺炎是一種乳腺實(shí)質(zhì)炎癥性疾病。目前少有研究涉及漿細(xì)胞性乳腺炎分期與炎性因子相關(guān)性的探究。本研究發(fā)現(xiàn)TNF-α與NF-κB染色以及IL-6與p-STAT3染色呈顯著正相關(guān)，說明TNF-α/NF-κB以及IL6/JAK/STAT3信號(hào)通路在漿細(xì)胞性乳腺炎的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用。然而，本研究具有一定局限性。（1）樣本數(shù)量，病理類型還不夠全面。（2）本研究為描述性研究。免疫組化分析提示相關(guān)炎性因子與臨床分期密切相關(guān)，但信號(hào)通路在漿細(xì)胞乳腺炎發(fā)病中的確切作用尚需進(jìn)一步研究。