女性軀體形式障礙患者外周血中miR-16、miR-182表達(dá)與臨床特征關(guān)系

宋 晉 馬子龍 陳繪景 王 強(qiáng)

1.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬精神衛(wèi)生中心(430012)；2.武漢科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院

軀體形式障礙(SFD)是一種臨床常見(jiàn)的神經(jīng)癥，以失眠、頭痛、眩暈為主要臨床表現(xiàn)，常伴有抑郁、焦慮等癥狀，發(fā)病率較高，嚴(yán)重影響患者社會(huì)功能，給患者帶來(lái)沉重的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[1]。微小RNA(miRNA)可參與精神分裂癥[2]、癲癇[3]、抑郁[4]等神經(jīng)異常疾病發(fā)展過(guò)程。微小RNA-16(miR-16)是miRNA中一員，在抑郁疾病發(fā)展中發(fā)揮重要作用[5]。Li等[6]研究發(fā)現(xiàn)，微小RNA-182(miR-182)在抑郁進(jìn)程中表達(dá)升高，參與抑郁的發(fā)生與發(fā)展過(guò)程。但miR-16、miR-182在女性SFD患者外周血漿中表達(dá)及與病證關(guān)系鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)觀察女性SFD患者外周血血漿中miR-16、miR-182表達(dá)水平，分析二者與SFD臨床特征關(guān)系，為SFD臨床診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般臨床資料

選取2017年3月-2018年12月于本院就診的SFD女性患者115例為病例組，同期女性健康體檢者為對(duì)照組。診斷標(biāo)準(zhǔn)：由兩名專(zhuān)業(yè)精神科醫(yī)生依據(jù)中國(guó)精神障礙分類(lèi)與診斷(第三版)關(guān)于SFD的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)[7]確定SFD。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合SFD評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)；②年齡19～65歲；③病理診治資料完全。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重軀體疾病史；②患有嚴(yán)重抑郁、焦慮癥等嚴(yán)重精神病史；③中途退出研究。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批，研究對(duì)象簽署知情同意書(shū)。

1.2 評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)

癥狀自評(píng)量表(SCL-90)[8]包含軀體化、強(qiáng)迫狀態(tài)、人際關(guān)系、抑郁、焦慮、恐怖、敵對(duì)、精神病性、偏執(zhí)及其他共10個(gè)因子，分為90個(gè)項(xiàng)目，每項(xiàng)均采用1～5級(jí)評(píng)分，以個(gè)體單個(gè)因子評(píng)分>2分時(shí)表示存在心理問(wèn)題。SCL-90均分=各項(xiàng)評(píng)分之和/項(xiàng)目數(shù)。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1主要試劑TRIzol RNA分離試劑購(gòu)買(mǎi)于上海賽默飛世爾科技，PrimeScript RT reagent Kit with gDNA eraser試劑盒、SYBR PrimeScript RT-PCR試劑盒均購(gòu)買(mǎi)于大連TAKARA生物科技有限公司，miR-16、miR-182及內(nèi)參U6均由上海吉瑪公司設(shè)計(jì)合成。

1.3.2樣本采集及預(yù)處理采取所有對(duì)象空腹靜脈血置肝素抗凝劑離心管離心，取血漿置-20℃冰箱保存，2h內(nèi)檢測(cè)。血漿樣本置冰盒融化，依據(jù)TRIzol RNA分離試劑說(shuō)明書(shū)加1ml TRIzol行裂解處理，抽提總RNA。利用Nanodrop紫外分光光度計(jì)對(duì)總RNA質(zhì)量和濃度檢測(cè)，以A260/A280在1.8～2.0為合格樣本行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。按照PrimeScript RT reagent Kit with gDNA eraser試劑盒說(shuō)明書(shū)合成cDNA后，依照SYBR PrimeScript RT-PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行擴(kuò)增、檢測(cè)。miR-16、miR-182均以U6為內(nèi)參，其引物序列如表1所示。以2-△△CT法計(jì)算miR-16及miR-182表達(dá)水平。

表1 miR-16、miR-182及內(nèi)參U6的引物序列

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組對(duì)象基本情況

病例組115例，年齡(42.9±7.6)歲(19～65歲)，受教育(12.8±2.0)年(9～16年)；對(duì)照組118例，年齡(43.2±7.9)歲(20～63歲)，受教育(11.9±2.0)年(8～16年)。兩組比較無(wú)差異(P<0.05)。

2.2 miR-16、miR-182表達(dá)及SFD臨床特征

病例組外周血漿miR-16(1.57±0.38)、miR-182(1.70±0.41)表達(dá)水平均高于對(duì)照組(1.02±0.30、1.09±0.33)(t=12.279、12.526，均P=0.000)。以病例組SFD患者miR-16和 miR-182表達(dá)量平均值為界，分為低表達(dá)組和高表達(dá)組。結(jié)果顯示，SFD患者miR-16、miR-182相對(duì)表達(dá)水平均與抑郁、焦慮因子有關(guān)(P<0.05)，與年齡及軀體化、強(qiáng)迫狀態(tài)、人際關(guān)系等8項(xiàng)因子均無(wú)關(guān)(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 SFD組患者血漿miR-6、miR-182表達(dá)與臨床特征[例(%)]

2.3 兩組SCL-90均分及與miR-16、miR-182表達(dá)關(guān)系

SCL-90均分病例組(2.84±0.65分)高于對(duì)照組(1.72±0.39分)(t=15.995，P=0.000)。Pearson 相關(guān)性分析，miR-16、miR-182相對(duì)表達(dá)水平與SCL-90均分均呈正相關(guān)(r=0.356,P<0.05；r=0.466,P<0.05)。見(jiàn)圖1。

圖1 miR-16、miR-182表達(dá)水平與SCL-90均分相關(guān)性

2.4 發(fā)生SFD 的多因素分析

以SFD是否發(fā)生為因變量，以miR-16、miR-182表達(dá)水平、SCL-90均分為自變量，進(jìn)行多因素logistic回歸分析顯示，miR-16、miR-182、SCL-90均分均為女性發(fā)生SFD的危險(xiǎn)影響因素(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 女性發(fā)生SFD的多因素影響分析

3 討論

SFD是臨床常見(jiàn)的以各種軀體不適為主要臨床癥狀的神經(jīng)癥，抑郁癥、焦慮癥等是SFD患者常伴的臨床癥狀，且女性更易情緒化發(fā)病率較高[9]。尋找影響SFD發(fā)病因素及早期臨床診斷生物學(xué)指標(biāo)，及時(shí)采取干預(yù)，對(duì)提高患者生命質(zhì)量和改善其社會(huì)功能具有重要意義。

miRNA可調(diào)控目標(biāo)靶基因的表達(dá)，影響一系列正常生理、病理過(guò)程[10]。袁梅菊等[11]研究發(fā)現(xiàn)miR-124在抑郁癥患者外周血中表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)與抑郁的診治密切相關(guān)，可作為抑郁診斷及預(yù)后評(píng)估指標(biāo)。miR-17-92在抑郁和焦慮中呈低表達(dá)，與抑郁、焦慮癥發(fā)生與發(fā)展關(guān)系密切[12]；miR-499、miR-708、miR-1908在抑郁發(fā)作期間表達(dá)異常[13]。以上研究表明miRNA表達(dá)失調(diào)與抑郁、焦慮等神經(jīng)癥關(guān)系密切。Bai等[14]發(fā)現(xiàn)母愛(ài)剝奪及慢性不可預(yù)測(cè)的壓力誘導(dǎo)的抑郁行為可引起miR-16表達(dá)上調(diào)。Manami等[15]研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期學(xué)業(yè)壓力造成的焦慮可使miR-16表達(dá)水平異常升高。SFD是神經(jīng)癥狀的一種，臨床特征與抑郁、焦慮等神經(jīng)癥狀存在重疊，并相互作用[16]。本研究病例組外周血血漿miR-16表達(dá)水平高于對(duì)照組，提示miR-16可能在SFD發(fā)病進(jìn)展中發(fā)揮作用。miR-182是一種神經(jīng)系統(tǒng)特異性miRNA，可在抑郁癥中發(fā)揮功效[17]。miR-182過(guò)表達(dá)可加重慢性不可預(yù)測(cè)的輕度應(yīng)激誘導(dǎo)的抑郁癥[6]。本研究miR-182在病例組外周血血漿中的表達(dá)水平高于對(duì)照組，提示SFD發(fā)病與miR-182異常表達(dá)可能有關(guān)。

SCL-90是臨床用評(píng)估SFD各種癥狀及心理問(wèn)題的測(cè)量工具，SCL-90均分是受試者最近一周內(nèi)的心理狀況。本研究病例組SCL-90均分高于對(duì)照組，血漿miR-16、miR-182表達(dá)水平與SCL-90的抑郁、焦慮因子有關(guān)，提示SFD患者血漿miR-16、miR-182過(guò)表達(dá)，可能調(diào)控了抑郁、焦慮癥的發(fā)病進(jìn)展，從而參與SFD疾病的發(fā)展，提示該指標(biāo)有望作為SFD發(fā)病診治的生物學(xué)指標(biāo)。miR-16、miR-182相對(duì)表達(dá)水平與SCL-90均分呈正相關(guān)，進(jìn)一步表明miR-16、miR-182可通過(guò)影響SFD疾病的臨床特征，進(jìn)而影響SFD的SCL-90均分。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，miR-16、miR-182及SCL-90均分均是影響女性發(fā)生SFD的危險(xiǎn)因素，提示miR-16、miR-182過(guò)表達(dá)及SCL-90過(guò)高可能會(huì)增加女性患SFD的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)miR-16、miR-182表達(dá)水平進(jìn)行早期監(jiān)控，并結(jié)合SCL-90均分，對(duì)早期診斷SFD有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。

綜上所述，在女性SFD患者外周血漿中miR-16、miR-182表達(dá)均升高，二者有望作為SFD病情診斷指標(biāo)。由于本研究樣本量較少，可能代表性不強(qiáng)；SCL-90均分結(jié)果帶有主觀因素，可能存在一定偏差；miR-16、miR-182在女性SFD中的具體機(jī)制尚未清晰，后續(xù)將擴(kuò)大樣本量對(duì)miR-16、miR-182在女性SFD中的相關(guān)機(jī)制進(jìn)行深入研究。