苯甲?；孱悮⑾x劑對綠盲蝽生物活性的測定

郭志剛，安靜杰，高占林，黨志紅，潘文亮，袁文龍，李耀發(fā)

(1.河北省農林科學院植物保護研究所/河北省農業(yè)有害生物綜合防治工程技術研究中心/農業(yè)部華北北部作物有害生物綜合治理重點實驗室, 河北保定 071000; 2.河北省植保植檢站, 石家莊 050011)

0 引 言

【研究意義】盲蝽(Heteroptera：Miridae)是我國各棉花產區(qū)的一類重要害蟲，其種類繁多，包括綠盲蝽Apolyguslucorum(Meyer-Dür)、中黑盲蝽Adelphocorissuturalis(Jakovlev)、苜蓿盲蝽Adelphocorislineolatus(Goeze)、三點盲蝽Adelphocorisfasciaticollis(Reuter)等[1-2]。近年來，盲蝽類害蟲逐步取代棉鈴蟲成為我國大部分棉田的主要害蟲[3]，其中綠盲蝽為我國黃河流域和長江流域棉區(qū)主要盲蝽種類[2]，2014年西北內陸棉區(qū)報道了綠盲蝽在棉田和葡萄等作物上的嚴重為害[4]。由于盲蝽具有寄主廣泛、隱蔽性高、世代重疊嚴重和移動性強等特點，給實際生產防治帶來了一定的困難，常造成重大的經濟損失[5-7]?！厩叭搜芯窟M展】化學防治一直是棉農防治盲蝽的主要措施，其中包括使用有機磷、氨基甲酸酯、菊酯類及新煙堿類殺蟲劑。苯甲?；孱悮⑾x劑屬于昆蟲生長調節(jié)劑，該類藥劑具有獨特的作用機理、較好的選擇活性及對環(huán)境污染少等特點，因而作為害蟲綜合治理的有效措施之一，正在被廣泛開發(fā)利用。苯甲酰基脲類殺蟲劑對鱗翅目、直翅目、雙翅目和鞘翅目等害蟲均有效，尤其是對鱗翅目有特效，目前主要應用于小菜蛾、粘蟲及甜菜夜蛾等鱗翅目害蟲的防治[8]。【本研究切入點】有關其對綠盲蝽的生物活性缺乏系統(tǒng)研究。前期研究發(fā)現(xiàn)，苯甲?；孱悮⑾x劑對苜蓿盲蝽等具有較好的室內和田間活性[9]。研究測定和分析苯甲?；孱悮⑾x劑對綠盲蝽的生物活性?！緮M解決的關鍵問題】選用氟鈴脲等有代表性的苯甲?；孱悮⑾x劑，研究對綠盲蝽的室內生物活性，為生產上應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1 綠盲蝽

綠盲蝽(Apolyguslucorum)2009年采自河北省獻縣西城鄉(xiāng)棗園，于河北省農科院植保所殺蟲劑組養(yǎng)蟲室內飼養(yǎng)多代，挑選生理狀態(tài)一致、健康活潑3齡若蟲供試。試驗期間，試蟲飼養(yǎng)室和試蟲處理后均為：溫度(25±1)℃、相對濕度60%～70%、光照16 h∶8 h(L∶D)。

1.1 .2 供試藥劑

97.8%氟鈴脲原藥(河北威遠生物化工股份有限公司)；96%氟啶脲原藥(上海威敵化工有限公司)；96%殺鈴脲原藥(吉林通化化工有限公司)。

1.2 方 法

1.2 .1 生物活性測定

點滴法[10]：將各藥劑原藥用丙酮溶解，并稀釋成5～7個系列濃度。將生理狀態(tài)一致的綠盲蝽3齡若蟲用CO2麻醉處理，用微量點滴儀將藥液滴至3齡若蟲胸部背板，每頭0.25 μL，每處理不少于30頭若蟲。丙酮作為對照，試驗重復3次。處理后試蟲用新鮮豇豆(市購)飼養(yǎng)，48 h后檢查試蟲死亡情況，以毛筆輕觸蟲體，完全不動視為死亡(下同)。

浸漬法[11]：將各藥劑原藥用丙酮溶解并稀釋成母液，將母液用0.1%吐溫80水溶液稀釋成5～7個系列濃度藥液。將新鮮豇豆(市購)在藥液中浸漬15 s，吸水紙上晾干后移至養(yǎng)蟲盒內，將30頭3齡若蟲(蛻皮后24 h)移至養(yǎng)蟲盒中，重復3次，以0.1%吐溫80水溶液作為對照。48 h后檢查試蟲死亡情況。

食料混藥法[12]：在人工飼料配制時減少10%的水量，并將剛配成的人工飼料稍加冷卻，在凝固前以飼料∶藥液=9∶1的比例混勻，制成混有不同濃度藥液的5～7個處理飼料，以飼料中混入0.1%吐溫80溶液，作為對照。飼料用parafilm膜包裹，置于養(yǎng)蟲盒中。每盒接入30頭3齡若蟲，每處理3次重復，檢查120 h試蟲死亡情況。

1.2 .2 不同觀察時間對氟鈴脲生物活性影響測定

采用點滴法(同點滴法)，不同濃度氟鈴脲點滴處理試蟲后，置于養(yǎng)蟲盒中，每處理不少于30頭3齡若蟲，重復3次，每天相同時間點觀察并記錄試蟲死亡情況，直至存活若蟲羽化，以明確觀察時間對生物活性測定結果的影響。

1.2 .3 不同觸藥時間對氟鈴脲生物活性影響的測定

采用浸漬法(同浸漬法)，將新鮮豇豆浸入配制好的氟鈴脲LC40溶液中，15 s后取出，吸水紙上晾干后置于養(yǎng)蟲盒中，并接入30頭3齡若蟲，重復3次，使試蟲分別接觸藥劑12、24、48、72和96 h后，替換為新鮮豇豆，觀察并統(tǒng)計不同觸藥時間后試蟲死亡情況。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)處理運用DPSv6.55軟件，根據(jù)死亡機率值和濃度對數(shù)值求出毒力回歸式(Y=A+BX)和致死中濃度LC50值。

2 結果與分析

2.1 不同方法測定苯甲?；孱悓G盲蝽的室內生物活性

分別采用點滴法、浸漬法和食料混藥法，三種作用方式有較大差異的生物活性測定方法，測定苯甲酰基脲類殺蟲劑對綠盲蝽3齡若蟲毒力的差異。

點滴法(48 h)測定表明，氟鈴脲對綠盲蝽3齡若蟲在觸殺方面具有較強的生物活性，LD50值為0.019 mg/頭，其次為氟啶脲，其LD50值為0.041 mg/頭，也表現(xiàn)出了較好的觸殺活性，而殺鈴脲對綠盲蝽幾乎沒有觸殺活性。

浸漬法(48 h)測定表明，3種苯甲?；孱悮⑾x劑均表現(xiàn)出了一定的生物活性。氟鈴脲、氟啶脲和殺鈴脲與對綠盲蝽3齡若蟲的LC50值分別為541.51 、648.27 和231.49 mg/L，其中，殺鈴脲對試蟲的毒力最高。

食料混藥法(120 h)測定表明，3種苯甲?；孱悮⑾x劑對綠盲蝽3齡若蟲均具有一定的胃毒作用，3種藥劑胃毒活性基本相當。表1

表1 苯甲?；孱悮⑾x劑下綠盲蝽3齡若蟲的生物活性
Table1 Bioassay of BPUs to 3 rd nymph ofA.lucorumby different method

藥劑Pesticides生物測定方法Bioassay method毒力回歸線LD-p Line致死中量或濃度LD50 or LC50(mg/larva or mg/L)相關系數(shù)(R)氟鈴脲點滴法Y=2.815 5+1.167 3x0.0190.994 2浸漬法Y=3.384 1+0.591 1 x541.510.788 0食料混藥法Y=-0.619 9+3.162 7x65.860.971 4氟啶脲點滴法Y=1.761 4+1.464 1x0.0410.982 4浸漬法Y=2.045 0+1.050 9x648.270.966 7食料混藥法Y=1.659 6+1.628x107.090.997 4殺鈴脲點滴法->600-浸漬法Y=2.320 3+1.133 3x231.490.937 0食料混藥法Y=-0.473 1+2.469 1x164.690.991 6

2.2 不同觀察時間對氟鈴脲生物活性的影響

研究表明,綠盲蝽3齡若蟲直到氟鈴脲處理后1～2 d才開始出現(xiàn)死亡，到處理后3 d死亡蟲量劇增，至4 d后死亡率基本不再增加直至羽化。圖1

圖1 綠盲蝽若蟲對不同濃度氟鈴脲的時間反應曲線
Fig.1 Time-response curve ofA.lucorumnymph to hexaflumuron

2.3 不同觸藥時間對氟鈴脲生物活性的影響

研究表明,用氟鈴脲LC40濃度處理豇豆，若蟲接觸12 h后，替換新鮮豇豆飼養(yǎng)，5 d后的死亡率僅為18.7%；而若蟲接觸24、48、72 和96 h，則最終死亡率分別可達到96.7%、97.9%、98.3%、98.6%。試蟲接觸藥劑24 h后，即可獲得準確的最終死亡率。圖2

3 討 論

3.1 苯甲?；孱悮⑾x劑可能影響盲蝽若蟲新表皮生成

苯甲酰基脲類殺蟲劑屬于幾丁質合成抑制劑，使昆蟲新表皮的正常沉積受到影響[13]，造成新表皮不能形成或變薄變軟。試驗發(fā)現(xiàn)，經過藥劑處理的綠盲蝽若蟲死亡癥狀為舊表皮不能脫離蟲體，新表皮不完整，推斷其致死原因可能與新表皮正常沉積受阻有關，與馬龍等[14]研究結果一致。在供試濃度下，苯甲?；孱悮⑾x劑處理低齡若蟲，在處理48 h后，若蟲蛻皮前后有一個死亡高峰，以后持續(xù)死亡，至4 d后多數(shù)若蟲第二次蛻皮，4 d后存活的若蟲雖基本上能羽化，但其發(fā)育歷期明顯延長。黨志紅等[15]利用氟鈴脲亞致死劑處理高齡若蟲，發(fā)現(xiàn)雖對若蟲基本無直接殺傷作用，但是，對羽化后成蟲壽命、單雌產卵量等方面均有明顯影響。

圖2 不同觸藥時間下氟鈴脲—綠盲蝽時間反應曲線
Fig.2 Effect of different exposing time on time-response curve of hexaflumuron toA.lucorum

3.2 苯甲?；孱悮⑾x劑對盲蝽生物活性的影響因素

研究表明，氟鈴脲和氟啶脲除表現(xiàn)出了較強的胃毒作用外，還具有較強的觸殺活性，而殺鈴脲的觸殺活性卻較低。藥劑處理后的觀察時間實驗結果表明，實驗條件下，氟鈴脲處理的綠盲蝽3齡若蟲直到處理后1～2 d開始出現(xiàn)死亡，到處理后3 d死亡若蟲數(shù)量劇增，至4 d后死亡率基本不再增加，直至羽化，這可能與綠盲蝽若蟲的發(fā)育速度有關。而Chandleretal.[16]研究發(fā)現(xiàn)，草地夜蛾和谷實夜蛾用除蟲脲和伏蟲隆處理后，死亡率觀察的最佳時間分別是處理后3 和5 d，與研究基本一致。然而，Ismail&Wright[17]卻報導，氟蟲脲、氟鈴脲、伏蟲隆、定蟲隆、除蟲脲處理小菜蛾2齡若蟲，在20℃溫度下需要9～17 d才能達到最終死亡率。觸藥時間實驗結果表明，綠盲蝽若蟲觸藥時間長短可明顯影響試蟲的最終死亡率，但是觸藥時間超過24 h，相同藥劑濃度處理下，試蟲的最終死亡率不再隨著時間的延長而增加，該類藥劑可能在試蟲接觸藥劑24 h內已快速達到了作用靶標。

4 結 論

供試苯甲?；孱悮⑾x劑氟鈴脲、氟啶脲和殺鈴脲對綠盲蝽均具有一定的胃毒作用，氟鈴脲和氟啶脲還具有較好的觸殺活性。氟鈴脲處理后1～4 d，隨著時間延長，試蟲死亡率逐漸增加，至第4 d后不再變化。試蟲接觸氟鈴脲超過24 h后，隨著觸藥時間的延長，最終死亡率保持穩(wěn)定。

苯甲?；孱悮⑾x劑對綠盲蝽均表現(xiàn)出了較好的胃毒作用，氟鈴脲和氟啶脲還表現(xiàn)出了較強的觸殺活性，但其活性明顯受調查時間和試蟲觸藥時間的影響。